目的:探討IL-1β經(jīng)NK-kB通路對(duì)炎癥狀態(tài)下牙周膜干細(xì)胞成骨成分調(diào)控機(jī)制。方法:從正常牙周組織和慢性牙周炎組織采用組織消化和有限稀釋法獲取不同來源的人牙周膜干細(xì)胞(hPDLSCs),采用免疫細(xì)胞化學(xué)法和流式細(xì)胞儀檢測(cè)兩種源細(xì)胞表面標(biāo)志分子表達(dá),采用MTT和細(xì)胞周期檢測(cè)間充質(zhì)干細(xì)胞增殖能力;間充質(zhì)干細(xì)胞多向分化能力檢測(cè)采用成骨和成脂分化誘導(dǎo)。構(gòu)建IL-1β(l0ng/ml)模擬牙周炎癥微環(huán)境模型,加入NF-kB信號(hào)通路抑制劑BAY 11-7082,研究牙周膜干細(xì)胞缺失性功能研究。結(jié)果:體外有限稀釋法結(jié)果表明,兩種來源間充質(zhì)干細(xì)胞均具有自我更新能力,MTT和細(xì)胞周期檢測(cè)表明牙周炎組干細(xì)胞增殖能力優(yōu)于對(duì)照組,炎癥因子IL-1β處理的正常組牙周膜干細(xì)胞可激活NF-kB通路,在IL-1β處理同時(shí)加入BAY 11-7082后成骨有關(guān)基因及蛋白表達(dá)水平增加。結(jié)論:炎癥因子IL-1β可激活NF-kB信號(hào)通路,并且可抑制牙周膜干細(xì)胞向成骨分化;對(duì)NF-kB信號(hào)通路抑制后能夠明顯逆轉(zhuǎn)IL-1β導(dǎo)致的干細(xì)胞成骨分化能力降低。

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 資料和方法
    1.1 主要試劑：
    1.2 樣本收集：
    1.3 實(shí)驗(yàn)方法
        1.3.1 干細(xì)胞原代培養(yǎng)和克�。�
        1.3.2 干細(xì)胞表型分析
            1.3.2. 1 細(xì)胞免疫熒光法：
            1.3.2. 2 流式細(xì)胞儀分析：
            1.3.2. 3 MTT和周期分析：
            1.3.2. 4 干細(xì)胞誘導(dǎo)分化實(shí)驗(yàn)：
        1.3.3 Real-time RT-PCR檢測(cè)和Western blot檢測(cè)：
    1.4 NF-кB信號(hào)通路研究：
    1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：
2 結(jié)果
    2.1 兩種來源PDLSCs細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察：
    2.2 兩種來源PDLSCs細(xì)胞表型：
    2.3 兩種來源PDLSCs細(xì)胞增殖能力比較：
    2.4 兩種來源PDLSCs分化能力對(duì)比：
    2.5 炎癥組PDLSCs成骨分化過程N(yùn)F-кB信號(hào)通路激活增強(qiáng)：
    2.6 阻斷NF-кB信號(hào)通路可促進(jìn)hPDLSCs成骨分化：
    2.7 IL-1β體外模擬炎癥微環(huán)境對(duì)PDLSCs成骨分化能力的影響：
    2.8 IL-1β對(duì)PDLSCs的NF-кB通路影響：
3 討論



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