發(fā)布時間：2024-02-24 14:35

　　目的:從細(xì)胞分子水平初步了解KLF6(Kruppel-like factor 6,Kruppel樣因子6)基因在舌癌細(xì)胞誘導(dǎo)分化過程中的作用及其可能機(jī)制,探討KLF6作為新的抗舌癌作用靶點(diǎn)的可行性。 方法:應(yīng)用誘導(dǎo)分化劑HMBA處理舌癌細(xì)胞TCA8113,觀察處理前后舌癌細(xì)胞的生長狀況和細(xì)胞形態(tài)的變化;運(yùn)用RT-PCR檢測HMBA誘導(dǎo)前后KLF6 mRNA表達(dá)的變化;同時細(xì)胞爬片后,采用免疫組化技術(shù)檢測了解KLF6蛋白、p53、c-Jun以及Cyclin D1表達(dá)的變化,綜合分析探討KLF6在舌癌發(fā)生與誘導(dǎo)分化過程中的作用及其可能機(jī)制。 結(jié)果:HMBA處理后貼壁細(xì)胞的數(shù)量隨濃度增加明顯減少;MTT實(shí)驗證實(shí)其對舌癌細(xì)胞的生長抑制作用呈濃度-時間效應(yīng)關(guān)系,隨著誘導(dǎo)劑濃度的增大、作用時間的延長,其抑制效應(yīng)逐漸增加;處理后舌癌細(xì)胞出現(xiàn)了一些向正常細(xì)胞形態(tài)逆轉(zhuǎn)演變的特征,比如:細(xì)胞外部形態(tài)趨向一致、體積增大比較明顯、細(xì)胞鋪展多;核漿比例變小,細(xì)胞核變小,核形狀多為卵圓形,核仁數(shù)量明顯減少;細(xì)胞質(zhì)較為豐富,HE染色著色均勻一致等。應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測HMBA處理組對人舌癌細(xì)胞周期分布的影響,檢測結(jié)果...

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
符號說明
前言
KLF6 基因在舌癌細(xì)胞誘導(dǎo)分化過程中的作用研究
    1 材料和方法
        1.1 材料
        1.2 試劑
        1.3 重要儀器設(shè)備與耗材
        1.4 方法
        1.5 細(xì)胞生長檢測與形態(tài)觀察
        1.6 RT-PCR 檢測KLF6 mRNA 表達(dá)
        1.7 免疫細(xì)胞化學(xué) S-P 法測定 KLF6、p53、CyclinD1、c-Jun 蛋白表達(dá)
        1.8 統(tǒng)計學(xué)分析
    2 結(jié)果
        2.1 HMBA 處理對TCA 8113 舌癌細(xì)胞生長的影響
        2.2 HMBA 處理后TCA 8113 舌癌細(xì)胞形態(tài)的變化
        2.3 HMBA 處理對TCA 8113 細(xì)胞周期的影響
        2.4 HMBA 處理后對TCA 8113 細(xì)胞中KLF6 mRNA 表達(dá)的影響
        2.5 HMBA 處理前后 TCA 8113 人舌癌細(xì)胞中KLF6、p53、c-Jun 及Cyclin D1蛋白表達(dá)影響
    3 討論
    4 結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
綜述
    綜述參考文獻(xiàn)
致謝
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本文編號：3909147