目的:正畸牙齒移動(dòng)的生物學(xué)基礎(chǔ)是骨改建,影響牙槽骨改建的因素很多,機(jī)械力是其中至關(guān)重要的因素之一。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMMSCs)受到機(jī)械力刺激后進(jìn)行增殖和分化,其對(duì)正畸牙齒移動(dòng)和正畸后保持具有重要意義。本實(shí)驗(yàn)從細(xì)胞分子水平著手,進(jìn)一步探討應(yīng)力作用下介導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖分化的信號(hào)通路及其作用機(jī)制,為臨床治療尋求更加科學(xué)合理的正畸治療手段提供理論依據(jù)。方法:1.全骨髓貼壁法獲取大鼠原代骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,細(xì)胞純化后進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察,通過(guò)細(xì)胞計(jì)數(shù)繪制生長(zhǎng)曲線,流式鑒定細(xì)胞表面抗原。2.構(gòu)建大鼠BMMSCs體外培養(yǎng)-張應(yīng)力加載模型,對(duì)BMMSCs加載頻率為1Hz,應(yīng)力拉伸變形幅度為5%的周期性張應(yīng)力,分別持續(xù)0h、3h、6h、9h、12h。應(yīng)用Western blot和q RT-PCR分別檢測(cè)各組細(xì)胞在不同應(yīng)力加載時(shí)間下成骨相關(guān)因子RUNX2、BMP2以及轉(zhuǎn)錄因子Twist、E2A、p21的蛋白和m RNA表達(dá)變化。3.針對(duì)大鼠p21基因序列設(shè)計(jì)合成四個(gè)sh RNA oligo序列和一個(gè)陰性對(duì)照序列,插入到慢病毒載體中構(gòu)建慢病毒表達(dá)質(zhì)粒,轉(zhuǎn)化至感受態(tài)細(xì)胞進(jìn)行測(cè)序鑒定。慢病毒包裝后收集濃縮...

【文章頁(yè)數(shù)】：121 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
引言
第一章 分離、培養(yǎng)、鑒定大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞
    材料與方法
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    討論
    結(jié)論
第二章 周期性張應(yīng)力對(duì)大鼠BMMSCS轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)及成骨分化的影響
    材料與方法
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    討論
    結(jié)論
第三章 TWIST/E2A/P21 對(duì)大鼠BMMSCS成骨分化的作用機(jī)制初探
    材料與方法
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    討論
    結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    綜述參考文獻(xiàn)
病例展示
    病例一
    病例二
攻讀碩士期間的研究成果
附錄
致謝



本文編號(hào)：3880875