DAPT通過RANKL/Notch2信號通路抑制鈦顆粒誘導骨缺損的機制研究
發(fā)布時間:2023-04-29 22:13
第一部分 DAPT抑制破骨細胞的分化目的:觀察DAPT,一種γ分泌酶(γ-secretase)抑制劑對骨髓源巨噬細胞(BMMs)在核因子κB受體活化因子配體(RANKL)和巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)誘導下的影響。方法:應用3-5周齡C57/BL6小鼠股骨、脛骨的BMMs為體外實驗研究對象,使用完全培養(yǎng)基(α-MEM)培養(yǎng)細胞以達到理想的貼壁數(shù)量和狀態(tài),使用CCK-8法檢測DAPT對細胞的毒性作用;使用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色法觀察不同濃度的DAPT在RANKL和M-CSF誘導下對破骨細胞形成的影響;使用骨吸收培養(yǎng)板檢測不同濃度的DAPT在RANKL和M-CSF誘導下對破骨細胞功能的影響;使用RT-qPCR技術檢測不同濃度的DAPT在RANKL和M-CSF誘導下對破骨細胞中NFATc1、TRAP、c-Fos、CtsK、CTR、DC-STAMP等相關基因的表達量的影響。結果:CCK-8 結果顯示,在 48h、72h、96h 時,DAPT 的 IC50 分別為 316.2μM、281.8μM 288.4μM,且僅在DAPT濃度大于80μM時細胞活性有顯著下降,遠遠高于本實驗...
【文章頁數(shù)】:51 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
英文摘要
英文縮略語
前言
第一部分 DAPT抑制破骨細胞的分化
1. 材料與方法
1.1 材料
1.2 方法
1.3 統(tǒng)計學分析
2. 結果
3. 討論
第二部分 DAPT抑制破骨細胞分化的機制研究
1. 材料與方法
1.1 材料
1.2 方法
1.3 統(tǒng)計學分析
2. 結果
3. 討論
第三部分 DAPT抑制鈦顆粒誘導小鼠顱骨骨溶解的作用
1. 材料與方法
1.1 材料
1.2 方法
1.3 統(tǒng)計學分析
2. 結果
3. 討論
全文總結
參考文獻
致謝
攻讀學位期間的科研成果
學位論文評閱及答辯情況表
本文編號:3805842
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