目的：探討靜水壓聯(lián)合IGF-1對體外單層培養(yǎng)的山羊顳下頜關節(jié)(temporomandibular joint, TMJ)盤細胞骨架絲狀肌動蛋白(F-actin)的影響,分析靜水壓、胰島素樣生長因子-1(insulin-like growth factor-1, IGF-1)與F-actin的關系變化對細胞生物學行為改變的影響。 方法：取4只1月齡左右山羊頭,采用酶消化法分離培養(yǎng)顳下頜關節(jié)盤細胞,并采用Ⅰ、Ⅱ型膠原免疫組織化學染色鑒定。取體外單層培養(yǎng)的第2、3代混合培養(yǎng)的顳下頜關節(jié)盤細胞,根據(jù)細胞干預方法不同將實驗分為4組：A組由完全培養(yǎng)基培養(yǎng),為對照組；B組以強度為0.2MPa、頻率1Hz的靜水壓作用3h；C組以含IGF-1(10ng/ml)的完全培養(yǎng)基進行干預；D組采用靜水壓與IGF-1聯(lián)合干預,方法同B、C組。分別于24、72h時以異硫氰酸熒光素(fluorescein isothiocyanate, FITC)標記的鬼筆環(huán)肽對F-actin行免疫熒光染色,激光共聚焦顯微鏡下觀察F-actin變化；圖像分析軟件測定單個細胞熒光強度。 結果：經(jīng)形態(tài)學觀察及免疫組織化學染色鑒定,所培養(yǎng)...

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【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
第一章 前言
    1.1 靜水壓在組織工程中的應用
    1.2 胰島素樣生長因子-Ⅰ在組織工程中的應用
    1.3 纖維軟骨細胞生物力學與致炎因子的關系
    1.4 不同力學加載方式與纖維軟骨生物力學的關系
        1.4.1 拉伸力與纖維軟骨細胞生物力學的關系
        1.4.2 壓縮力與纖維軟骨細胞生物力學的關系
        1.4.3 剪切力與纖維軟骨細胞生物力學的關系
    1.5 機械力學刺激對F-ACTIN表達影響的研究
第二章 IGF-1對山羊TMJ盤細胞F-ACTIN表達的影響
    2.1 實驗材料
        2.1.1 主要試劑
        2.1.2 主要儀器
        2.1.3 主要器械
        2.1.4 主要試劑的配制
    2.2 實驗方法
        2.2.1 山羊顳下頜關節(jié)盤細胞的體外分離、原代、傳代培養(yǎng)、凍存、復蘇
        2.2.2 纖維軟骨細胞Ⅰ、Ⅱ型膠原免疫組化鑒定
        2.2.3 IGF-1對TMJ盤細胞F-actin表達的影響
    2.3 實驗結果
        2.3.1 TMJ盤細胞形態(tài)學觀察
        2.3.2 關節(jié)盤細胞Ⅰ、Ⅱ型膠原免疫組化染色結果
        2.3.3 IGF-1對TMJ盤細胞F-actin表達的影響的結果
    2.4 討論
第三章 實驗二靜水壓合并工GF-1對山羊顳下頜關節(jié)盤細胞F-ACTIN表達的影響
    3.1 實驗材料
        3.1.1 主要儀器及設備
        3.1.2 主要試劑
    3.2 實驗方法
        3.2.1 山羊TMJ盤貼壁細胞受力
        3.2.2 各組干預結束后F-actin的免疫熒光染色
    3.3 統(tǒng)計方法
    3.4 實驗結果
    3.5 討論
第四章 結論
    4.1 主要結論
    4.2 研究展望
參考文獻
綜述
    參考文獻
在學期間的研究成果
中英文縮略詞
致謝



本文編號：3787715