發(fā)布時間：2022-02-11 03:07

　　研究背景:熱療（Hyperthermia,HT）較常規(guī)外科手術(shù)和放、化療不僅具有保護正常組織結(jié)構(gòu)、提高患者生存質(zhì)量的優(yōu)勢,還能通過逆轉(zhuǎn)腫瘤細胞上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（Epithelial-mesenchymal transition,EMT）過程從而降低惡性腫瘤的術(shù)后復發(fā)率及遠處轉(zhuǎn)移率。然而,單獨使用熱療治療腫瘤的效果不佳,臨床上通常將熱療與外科手術(shù)、放療、化療和分子靶向治療相結(jié)合而增強其療效,其中腫瘤分子靶向治療近年來成為腫瘤綜合療法的研究熱點。研究目的:本課題嘗試以分子靶向治療的方式抑制促癌基因DNA結(jié)合分化抑制因子-1（Id-1）的表達,再與熱療進行聯(lián)合配伍,探索兩者聯(lián)用于舌鱗癌治療的可能性,特別是觀察研究熱療及沉默Id-1基因作用于舌鱗癌細胞后,能否逆轉(zhuǎn)細胞的EMT過程,并初步探討兩者聯(lián)用作用于舌鱗癌細胞EMT的分子機制。研究方法:1.選取適宜本課題的舌鱗癌細胞株。實時定量PCR實驗檢測SCC4、SCC9、SCC25和CAL-27 4株舌鱗癌細胞中Id-1 mRNA的表達水平,選取其中Id-1 mRNA表達量最高的細胞株作為本課題的研究細胞。2.驗證siRNA沉默Id-1基因表達的能力... 

【文章來源】：青島大學山東省

【文章頁數(shù)】：91 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

轉(zhuǎn)膜夾內(nèi)的排列順序Fig1Theorderinthetransmembraneclip

結(jié)果 實時定量 PCR 實驗檢測 4 株舌鱗癌細胞中 Id-1 mRNA 的表達水平檢測 4 株舌鱗癌細胞中 Id-1 基因 mRNA 的表達水平，選擇 Id-1 mRNA 相對表平最高的細胞系進行后續(xù)實驗。實時定量 PCR 結(jié)果顯示（見表 7 和圖 2），CAL-胞中 Id-1 mRNA 表達量明顯高于 SCC4 細胞、SCC9 細胞以及 SCC25 細胞，故舌鱗癌 CAL-27 細胞株用于本課題的后續(xù)研究細胞。表 7 4 株舌鱗癌細胞中 Id-1 mRNA 的表達水平比較Tab 7 Relative expression of Id-1 mRNAdetected by RT-PCR in four strain of STCCGroup Ct(Id-1) Ct(GAPDH) △Ct2-△△CtSCC4 30.17±0.45 14.72±0.12 15.45±0.36 0.3030±0.0798SCC9 30.44±0.66 14.49±0.15 15.95±0.58 0.2226±0.0930SCC25 30.30±0.46 14.43±0.41 15.88±0.80 0.2471±0.1501CAL-27 27.80±0.67 14.09±0.49 13.70±0.18 1.0030±0.1282

青島大學碩士學位論文將 CAL-27 細胞隨機分為 3 組，分別為空白對照組（normal）、陰性對照組（N沉默 Id-1 組（Id-1-siRNA），通過實時定量 PCR 的檢測方法對 siRNA 轉(zhuǎn)染 CAL-胞后 Id-1 的 mRNA 表達水平進行測定（見表 8 和圖 3）。 Id-1-siRNA 組與空白組相比，Id-1 的 mRNA 表達水平下降 83.29%（P=0.0001）；Id-1-siRNA 組與 N相比，Id-1 的 mRNA 表達水平下降 70.39%（P=0.0003）；空白對照組和 NC 組，無統(tǒng)計學意義（P=0.3011）。表 8 siRNA 轉(zhuǎn)染后細胞內(nèi) Id-1mRNA 的表達水平Tab 8 Relative expression of Id-1 mRNA after siRNA transfection of STCCGroup Ct(Id-1) Ct(GAPDH) △Ct2-△△Ctnormal 28.39±0.34 14.39±0.11 14.00±0.45 1.0298±0.1338NC 28.60±0.21 14.44±0.21 14.16±0.20 0.9008±0.1246Id-1-siRNA 30.77±0.19 14.42±0.14 16.35±0.20 0.1969±0.0257

【參考文獻】：
期刊論文
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[2]2016年全國熱療年會暨第二屆中日醫(yī)學科技交流協(xié)會熱療專業(yè)委員會熱療臨床進展學術(shù)研討會會議紀要[J]. 王東安,肖紹文.  中華放射腫瘤學雜志. 2017 (01)
[3]Hyperthermia inhibits hypoxia-induced epithelial-mesenchymal transition in HepG2 hepatocellular carcinoma cells[J]. Guang-Jin Yuan, Qian-Wen Li, Shun-Lin Shan, Wu-Ming Wang, Sen Jiang, Cancer Center, the 82nd Hospital of the Chinese People’s Liberation Army, Huai’an 223001, Jiangsu Province, China Xi-Ming Xu, Cancer Center, Renmin Hospital of Wuhan University, Wuhan 430060, Hubei Province, China.  World Journal of Gastroenterology. 2012(34)
[4]Id-1在惡性腫瘤發(fā)生中的作用及其機制[J]. 郭斌,張成梅,劉少華.  生命科學. 2010(05)
[5]高溫誘導BcaCD885頰癌細胞凋亡及檢測[J]. 王升志,洪曉軍,何永文,劉流,毛祖彝,童昕.  口腔頜面外科雜志. 2000(03)



本文編號：3619759