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miR-497-5p在根尖乳頭干細(xì)胞成骨/成牙本質(zhì)向分化中的作用及機(jī)制研究

發(fā)布時間:2022-01-05 01:54
  研究背景:齲病和牙外傷是青少年的常見病和多發(fā)病,如果得不到及時而有效的治療會導(dǎo)致牙髓壞死或根尖周病變,引起年輕恒牙牙齒發(fā)育停滯,相應(yīng)地抗力減弱,嚴(yán)重影響患者的咀嚼功能和美觀。根尖乳頭干細(xì)胞(stem cells from apical papilla,SCAP)存在于發(fā)育中的恒牙根尖乳頭組織,研究表明SCAP在牙根發(fā)育中發(fā)揮重要作用,因其與牙髓干細(xì)胞相比,有更強(qiáng)的增殖和分化潛能,成為牙髓牙本質(zhì)再生重要的種子細(xì)胞。MicroRNA(miRNA)是一類非編碼小分子RNA,可與目標(biāo)mRNA的3’端非編碼區(qū)(3’untranslatedregion,3’UTR)結(jié)合,從而負(fù)向調(diào)控靶基因的表達(dá),發(fā)揮轉(zhuǎn)錄后調(diào)控的作用。研究發(fā)現(xiàn),miRNA對間充質(zhì)干細(xì)胞的成骨向分化有重要的調(diào)控作用,且多數(shù)通過信號通路進(jìn)行調(diào)控。而有關(guān)miRNA對于根尖乳頭干細(xì)胞成骨/成牙本質(zhì)向分化的調(diào)控機(jī)制尚不清楚。因此,本研究擬建立SCAP成骨/成牙本質(zhì)分化相關(guān)的miRNAs表達(dá)譜,篩選并確定在SCAP成骨/成牙本質(zhì)向分化中表達(dá)明顯升高的miR-497-5p,探究miR-497-5p對SCAP成骨/成牙本質(zhì)向分化的影響以及相關(guān)機(jī)制... 

【文章來源】:山東大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:66 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

miR-497-5p在根尖乳頭干細(xì)胞成骨/成牙本質(zhì)向分化中的作用及機(jī)制研究


圖1?SCAP原代及傳代培養(yǎng)??

生長曲線,生物學(xué)特性,流式細(xì)胞術(shù),表型


?干細(xì)胞表面標(biāo)記物?STR0-1?(31.8%)、CD24?(23.2%)和?CD146?(99.5°/。),而造??血分子表面標(biāo)記物CD34?(0.27%)和CD45?(0.16%)呈陰性表達(dá)(圖2.C-G)。??說明所培養(yǎng)SCAP具備間充質(zhì)干細(xì)胞特性。??A?B??41?OD?Values?—??^??__,__,__,_,?*?轉(zhuǎn):%3??0?2?4?6?8?10??Days??c?D??k?900?H?i??-I?二:I??:Lld?:ut=d??1〇0?to*?to?to0?K?〇?1〇S?,0?to???STRO-1?APC?CD24?PE??E:]?“|?'I]If:]^I??:,.IS,?,1?j,?,lr ̄i?:LJzz??io°?to3?io*??〇*?w°??oa??〇??〇?to0?ios?wi*?io*??CD1-46PE?COM?PE?CEM5?PE??圖2?SCAP生物學(xué)特性鑒定??A.?SCAP生長曲線;B.結(jié)晶紫染色(40X);?C-G.流式細(xì)胞術(shù)檢測SCAP表面分子表型。??5.?SCAP多向分化能力鑒定??SCAP屬于特異性的間充質(zhì)干細(xì)胞,與其他間充質(zhì)干細(xì)胞一樣也具有多向分??化潛能。經(jīng)成骨誘導(dǎo)7天后

間充質(zhì)干細(xì)胞,對照組,實(shí)驗(yàn)組,陰性


SCAP屬于特異性的間充質(zhì)干細(xì)胞,與其他間充質(zhì)干細(xì)胞一樣也具有多向分??化潛能。經(jīng)成骨誘導(dǎo)7天后,ALP染色實(shí)驗(yàn)組與對照組相比,胞漿呈明顯的藍(lán)紫??色,對照組無特異性顏色變化(圖3.A,B);成骨誘導(dǎo)21天后,細(xì)胞呈復(fù)層生長,??茜素紅實(shí)驗(yàn)組染色示有大量的紅褐色礦化結(jié)節(jié)生成,對照組染色陰性(圖3.C,D);??成脂誘導(dǎo)28天后,油紅0染色示胞質(zhì)中有大小不一的紅色脂滴形成,對照組染??色陰性(圖3.E,F)。??19??


本文編號:3569497

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