目的探討改良型富含血小板纖維蛋白（Advanced platelet-rich fibrin,A-PRF）對人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（Human Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells,HBMSCs）體外增殖及成骨分化的影響。方法在體外無菌條件下采集人骨髓血,根據(jù)干細(xì)胞易貼附于塑料底物的特性培養(yǎng)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞。細(xì)胞傳代至第三代,通過細(xì)胞流式儀技術(shù)檢測細(xì)胞來源,利用茜素紅染色法鑒定細(xì)胞是否具有成骨分化潛能。A-PRF的制備:于志愿者肘靜脈處采血10 mL,離心后獲取A-PRF纖維蛋白凝塊,放置于完全培養(yǎng)液中備用。含有不同濃度A-PRF的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞后采用噻唑藍(lán)（methylthiazolyl diphenyltetrazolium bromide,MTT）法檢測不同濃度A-PRF對人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的促增殖效應(yīng)并篩選出促進(jìn)細(xì)胞增殖的最佳濃度。含有10%A-PRF濃度的不同條件培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞后分別采用堿性磷酸酶法（Alkaline phosphatase,ALP）、茜素紅染色法檢測A-PRF對人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞不同時(shí)期的體外成骨分化的影響,采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合... 

【文章來源】：蘭州大學(xué)甘肅省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：86 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

HBMSCs表面抗原表達(dá)Figure.2-2Expressionofmesenchymal-associatedsurfacemarkersonHBMSCs

大學(xué)碩士學(xué)位論文 A-PRF 對人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外增殖及成骨分BMSCs 成骨分化能力的鑒定 HBMSCs 在完全培養(yǎng)液培養(yǎng) 21 d 后經(jīng)茜素紅染色后可見培養(yǎng) 2-3a），研究級(jí)倒置熒光顯微鏡下可見少量礦化結(jié)節(jié)（圖 2-3b培養(yǎng)液培養(yǎng) 21 d 后經(jīng)茜素紅染色后可見培養(yǎng)皿底呈鮮紅色（置熒光顯微鏡下可見大量礦化結(jié)節(jié)（圖 2-3d）。

“*”表示 p< 0.05，“**”表示 p< 0.01 4-1 MTT 檢測不同濃度的 A-PRF 對 HBMSCs 增殖的影ects of normal culture medium treated with different concentrathe proliferation of HBMSCs.檢測的結(jié)果 A-PRF 的正常培養(yǎng)液及成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)液作用于 HBd 時(shí)檢測 ALP 活性（圖 4-2a）。ALP 活性在實(shí)驗(yàn)設(shè)定A-PRF 正常培養(yǎng)液組的 ALP 值明顯高于正常培養(yǎng)液學(xué)差異（p< 0.01）。同時(shí)，含有 10%A-PRF 成骨誘于成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)液組，兩組比較有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)差4 d 時(shí) A-PRF 促進(jìn) HBMSCs 成骨分化的作用更加顯色的結(jié)果A-PRF 的正常培養(yǎng)液及成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)液作用于 HB


本文編號(hào)：3547080