目的:（1）體外培養(yǎng)人牙齦成纖維細胞,建立該細胞模型,為進一步研究提供實驗基礎。（2）觀察不同濃度IL-1β和IL-6干預下,角質(zhì)細胞生長因子（keratinocyte growth factor,KGF）在人牙齦成纖維細胞炎癥損傷過程中基因表達水平的變化,進一步明確KGF在牙周病發(fā)生發(fā)展過程中可能的作用。方法:（1）取液氮凍存的人牙齦成纖維細胞復蘇傳代培養(yǎng),并進行形態(tài)學和免疫學鑒定,觀察凍存后復蘇的細胞性能,從而建立穩(wěn)定的體外細胞模型。（2）選擇生長穩(wěn)定、形態(tài)良好的第5⁸代人牙齦成纖維細胞,分別用濃度為0ng/ml、0.1ng/ml、0.5ng/ml、1ng/ml、5ng/ml、10ng/ml的IL-1β和0ng/ml、0.1ng/ml、0.5ng/ml、1ng/ml、5ng/ml、10ng/ml的IL-6對人牙齦成纖維細胞進行干預,建立炎癥損傷的牙齦成纖維細胞模型,采用逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應法（RT-PCR）檢測KGF基因在各實驗組的表達情況,利用醫(yī)學圖像分析系統(tǒng)對檢測結(jié)果進行圖像分析及數(shù)據(jù)采集,然后運用單因素方差分析方法,對不同濃度IL-1β及IL-6干預后的人... 

【文章來源】：山西醫(yī)科大學山西省

【文章頁數(shù)】：43 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

復蘇后的細胞呈成纖維樣細胞形態(tài)×100Figure1:recoverycellswerefibroblast-likecells

圖 1：復蘇后的細胞呈成纖維樣細胞形態(tài)×100Figure 1: recovery cells were fibroblast-like cells圖 2：免疫學鑒定陰性對照組×250Figure 2: the negative control group×250圖 3：免疫學鑒定抗波絲蛋白抗體陽性×250圖 4：免疫學鑒定抗角蛋白抗體陰性×250

附圖圖 1：復蘇后的細胞呈成纖維樣細胞形態(tài)×100Figure 1: recovery cells were fibroblast-like cells圖 2：免疫學鑒定陰性對照組×250Figure 2: the negative control group×250

【參考文獻】：
期刊論文
[1]人牙齦成纖維細胞的原代培養(yǎng)及鑒定[J]. 崔娟,孫克勤,李霞,張華屏.  中國醫(yī)藥導報. 2010(03)
[2]人牙齦成纖維細胞與牙周膜細胞的生物活性[J]. 程遠,曾照芳,朱俊.  生物信息學. 2009(01)
[3]人牙周膜細胞和牙齦成纖維細胞生物學活性的研究[J]. 王琨,許彥枝,朱曚曚.  牙體牙髓牙周病學雜志. 2008(06)
[4]牙周病的研究進展[J]. 王珊.  中國醫(yī)藥指南. 2008(09)
[5]兩種冠邊緣設計對齦溝液中IL-6和TNF-α表達的影響[J]. 武紅艷,何惠明,王忠義,張春寶,賈衛(wèi),翟強.  牙體牙髓牙周病學雜志. 2003(12)
[6]人牙齦成纖維細胞和牙周膜成纖維細胞的培養(yǎng)和生物學特征[J]. 徐燕,李頌,程繼光,胡勇,王明麗.  口腔醫(yī)學研究. 2002(06)
[7]牙周治療前后齦溝液中白細胞介素-6水平的變化[J]. 吳亞菲,趙川江,張靜儀.  華西口腔醫(yī)學雜志. 2001(02)
[8]白介素1信號轉(zhuǎn)導研究進展[J]. 郭甫坤,吳曙光.  國外醫(yī)學(分子生物學分冊). 2001(01)
[9]牙齦溝液中白細胞介素-6含量與牙周炎關(guān)系的研究[J]. 吳亞菲,趙川江,張靜儀,黃萍.  華西醫(yī)科大學學報. 2000(04)

碩士論文
[1]IL-1β/LPS誘導下人牙齦成纖維細胞表達TRAF6的研究[D]. 崔娟.山西醫(yī)科大學 2010
[2]重度牙周炎患者唾液中IL-6和TNF-α含量作為牙周炎分子診斷標記物的可行性研究[D]. 耿衛(wèi)艷.第三軍醫(yī)大學 2009
[3]角質(zhì)細胞生長因子（KGF）及其受體（KGFR）在口腔扁平苔蘚中的表達[D]. 王伶俐.山東大學 2007
[4]角質(zhì)細胞生長因子（KGF）在口腔白斑和口腔鱗癌中的表達[D]. 顏世果.山東大學 2006



本文編號：3519255