目的:骨缺損的修復(fù)一直以來是醫(yī)學(xué)領(lǐng)域研究的熱點(diǎn),由于創(chuàng)傷、感染和腫瘤等原因造成的骨缺損需要大量的骨組織修復(fù)。近年來骨組織工程已成為骨缺損修復(fù)的主要途徑。骨組織工程包括三個(gè)要素:具有成骨潛能的種子細(xì)胞,調(diào)節(jié)誘導(dǎo)細(xì)胞成骨的生長因子,提供基本框架的支架材料。其中支架材料是骨組織工程的關(guān)鍵因素,它促進(jìn)種子細(xì)胞的粘附和生長,為細(xì)胞提供了粘附、生長、增殖和分化的環(huán)境,在組織的構(gòu)建中起著關(guān)鍵作用,是組織工程重要的研究內(nèi)容。本研究的目的是利用羥基磷灰石,膠原和多壁碳納米管制備復(fù)合支架,分析支架的物理、化學(xué)及生物學(xué)性能,并在支架材料上接種骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,通過體內(nèi)及體外實(shí)驗(yàn),評價(jià)其在骨缺損修復(fù)中的作用。研究方法:通過冷凍干燥技術(shù),制備羥基磷灰石/膠原/多壁碳納米管支架,對支架的吸水率,孔隙率及生物相容性等性能進(jìn)行測定,探討膠原及多壁碳納米管對支架生物學(xué)性能的影響,通過掃描電鏡,測定支架的孔徑及細(xì)胞在支架表面的粘附,生長情況。并采用大鼠臨界骨缺損模型,利用細(xì)胞-支架復(fù)合物修復(fù)顱骨缺損,觀察骨形成的情況。結(jié)果:1、實(shí)驗(yàn)所制備的支架材料疏松多孔,結(jié)構(gòu)穩(wěn)定,掃描電鏡觀察結(jié)果顯示羥基磷灰石/膠原/多壁碳納米管支架... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：42 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

茜素紅染色結(jié)果，可見經(jīng)成骨誘導(dǎo)后，細(xì)胞外基質(zhì)內(nèi)有多量鈣化結(jié)節(jié)（10X）

中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文83結(jié)果3.1支架基本性能測定支架材料為多孔結(jié)構(gòu)，孔隙率約為70±0.084%，吸水率75±0.37%，孔徑約為100-150um。細(xì)胞接種到支架后，生長良好。3.2BMSCs光鏡下形態(tài)學(xué)分析：光鏡下可見第四代BMSCs圖像，可以觀察到細(xì)胞貼壁生長，成梭形，大小較均勻，緊密分布，說明細(xì)胞生長狀態(tài)良好（圖1）。3.3BMSCs成骨誘導(dǎo)結(jié)果分析：干細(xì)胞在分化為成骨細(xì)胞的過程中，在細(xì)胞表面沉積鈣鹽，形成鈣結(jié)節(jié)，茜素紅可與其螯合，產(chǎn)生深紅色的螯合物，用于鑒定干細(xì)胞是否已向成骨細(xì)胞分化。染色結(jié)果顯示，鏡下有大量的深紅色的復(fù)合物存在（圖2）。圖1光鏡下細(xì)胞成像，可見緊密分布，大小均勻的梭形細(xì)胞（20X）圖2茜素紅染色結(jié)果，可見經(jīng)成骨誘導(dǎo)后，細(xì)胞外基質(zhì)內(nèi)有多量鈣化結(jié)節(jié)（10X）

中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文93.4BMSCs成脂誘導(dǎo)結(jié)果分析：油紅O是一種紅色的脂溶性染料,可與組織、細(xì)胞中的甘油三酯發(fā)生特異性結(jié)合,將脂滴染成橘紅色。細(xì)胞內(nèi)脂滴的生成情況可以反映脂肪細(xì)胞的分化情況。染色結(jié)果顯示，存在多個(gè)脂肪滴團(tuán)塊，脂肪滴呈橘色（圖3）。3.5SEM掃描電鏡結(jié)果分析：電鏡結(jié)果顯示，MWCNTs徑向尺寸較小，管外徑約在11.5-42.6nm之間（圖4A），通過冷凍干燥方法，HA/Col/MWCNTs支架顯示出高度相連的多孔結(jié)構(gòu)，具有良好的穿通性，平均孔徑大小約為100-150um，有助于營養(yǎng)物質(zhì)的運(yùn)輸與細(xì)胞的生長與繁殖（圖4B）。圖3油紅O染色結(jié)果，可見經(jīng)成脂誘導(dǎo)后，細(xì)胞內(nèi)呈橘色的脂肪滴團(tuán)塊（40X）


本文編號：3488387