BMP-2、bFGF和Dex聯(lián)合應(yīng)用對(duì)犬牙周膜細(xì)胞成骨分化能力的影響
發(fā)布時(shí)間:2021-11-09 01:18
牙周膜細(xì)胞(PDLCs)被廣泛應(yīng)用于牙周再生領(lǐng)域。體外培養(yǎng)的PDLCs可以在誘導(dǎo)因子的調(diào)控下向成骨、成牙骨質(zhì)等方向分化[1]。以往研究多集中于不同細(xì)胞因子對(duì)PDLCs生物學(xué)行為的不同影響,且往往局限于單一細(xì)胞因子對(duì)其作用的研究,多種誘導(dǎo)因子聯(lián)合應(yīng)用于PDLCs,其生物學(xué)特性的變化尚無詳細(xì)報(bào)道。本研究通過聯(lián)合應(yīng)用BMP-2、bFGF和Dex三種因子誘導(dǎo)PDLCs,觀察細(xì)胞增殖,成骨、成脂分化以及部分成骨因子的表達(dá),為BMP-2、bFGF和Dex促進(jìn)牙周組織的再生提供理論依據(jù)。目的:聯(lián)合應(yīng)用BMP-2、bFGF和Dex誘導(dǎo)PDLCs,觀察其生物學(xué)特性的變化。方法:體外培養(yǎng)犬PDLCs,將第4代PDLCs分為5組:(1)對(duì)照組(未添加誘導(dǎo)因子);(2)加入200μg/LBMP-2+10μg/LbFGF組;(3)加入200μg/LBMP-2+10ˉ8mol/LDex組;(4)加入10μg/LbFGF+10ˉ8mol/LDex組;(5)加入10μg/LbFGF+200μg/LBMP-2+10ˉ8mol/LDex組。MTT法觀察BM...
【文章來源】:中國(guó)人民解放軍空軍軍醫(yī)大學(xué)陜西省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:71 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
誘導(dǎo)因子對(duì)犬PDLCs增殖的時(shí)間效應(yīng)p﹥0.05,*與相應(yīng)的對(duì)照組比較;**與相應(yīng)的誘導(dǎo)組比較
空白組未受到成骨誘導(dǎo)液培養(yǎng),鏡下觀察并未發(fā)現(xiàn)成骨結(jié)節(jié)染得色形成。3.2.4 BMP-2、bFGF 和 Dex 聯(lián)合誘導(dǎo)對(duì) PDLCs 的 ALP 活性影響的時(shí)間效應(yīng)圖18 誘導(dǎo)因子對(duì)PDLCs的ALP活性影響的時(shí)間效應(yīng)p <0.05,* 與相應(yīng)的對(duì)照組比較;** 與相應(yīng)的誘導(dǎo)組比較。經(jīng)bFGF+Dex、 BMP-2+bFGF、BMP-2+Dex、bFGF+ BMP-2+Dex組誘導(dǎo)后(圖18),體外培養(yǎng)的犬PDLCs的ALP活性均高于對(duì)照組,各組間ALP活性與對(duì)照組相比均有顯著提高(p<0.05)。其中,bFGF+ BMP-2+Dex組ALP活性最強(qiáng),與BMP-2+bFGF、BMP-2+Dex組間均有顯著性差異(p<0.05)。培養(yǎng)14d時(shí),各誘導(dǎo)組PDLCs的ALP活性仍趨于增高,與對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p<0.05)。14d與7d檢測(cè)結(jié)果不同的是
圖19 RT-PCR電泳圖 免疫熒光對(duì) PDLCs 中成骨基因 BSP 的檢測(cè)熒光染色結(jié)果發(fā)現(xiàn)各組細(xì)胞在常規(guī)培養(yǎng)的情況下細(xì)胞漿內(nèi)的BS期指標(biāo),添加了誘導(dǎo)因子的PDLCs,兩兩及三種聯(lián)合誘導(dǎo)組均顯性(圖20-23),但從(圖23)中我們可明顯發(fā)現(xiàn)三種誘導(dǎo)因子聯(lián)P為強(qiáng)陽性表達(dá);對(duì)照組細(xì)胞則顯示BSP為陰性表達(dá)(圖24)。充LCs在受到誘導(dǎo)因子刺激后均有成骨分化的趨勢(shì)。空白組未受到液培養(yǎng),鏡下觀察并未發(fā)現(xiàn)形成。論P(yáng)DLCs 在體外培養(yǎng)的條件下,向牙周組織分化需要誘導(dǎo)因子的一素,生長(zhǎng)因子可以促進(jìn) PDLCs 其向特定的細(xì)胞轉(zhuǎn)化,有利于組織
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]鼠根端乳頭條件培養(yǎng)基誘導(dǎo)下的牙周膜細(xì)胞膜片與牙本質(zhì)管和煅燒骨間的牙周膜再生[J]. 寧慧影,劉宏偉. 華西口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2011(04)
[2]人牙周膜細(xì)胞群多向分化潛能的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 劉娟,趙紅宇,軒東英,謝寶儀,章錦才. 華西口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2010(02)
[3]堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子對(duì)牙周膜細(xì)胞表皮生長(zhǎng)因子受體基因表達(dá)的影響[J]. 陳瑩,林崇韜,高穎. 華西口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2009(03)
[4]地塞米松對(duì)體外培養(yǎng)的人牙囊細(xì)胞增殖和堿性磷酸酶活性的影響[J]. 張永寬,林珠,金作林,孫海燕,王慶銀. 臨床口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2006(02)
[5]bFGF和rhBMP對(duì)牙周膜細(xì)胞膠原酶水平的影響[J]. 趙征,金巖,張廣耘,文玲英. 臨床口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2005(04)
[6]骨形成蛋白-2和成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子對(duì)人牙周膜細(xì)胞增殖的聯(lián)合效應(yīng)[J]. 吳勇,吳織芬,王勤濤,張斌,蒲秦. 牙體牙髓牙周病學(xué)雜志. 2001(01)
[7]年齡對(duì)牙周膜細(xì)胞鈣化表達(dá)的影響[J]. 劉宏偉,馬良,歐龍,袁志萍,龐勁凡. 中華口腔醫(yī)學(xué)雜志. 1998(06)
本文編號(hào):3484363
【文章來源】:中國(guó)人民解放軍空軍軍醫(yī)大學(xué)陜西省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:71 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
誘導(dǎo)因子對(duì)犬PDLCs增殖的時(shí)間效應(yīng)p﹥0.05,*與相應(yīng)的對(duì)照組比較;**與相應(yīng)的誘導(dǎo)組比較
空白組未受到成骨誘導(dǎo)液培養(yǎng),鏡下觀察并未發(fā)現(xiàn)成骨結(jié)節(jié)染得色形成。3.2.4 BMP-2、bFGF 和 Dex 聯(lián)合誘導(dǎo)對(duì) PDLCs 的 ALP 活性影響的時(shí)間效應(yīng)圖18 誘導(dǎo)因子對(duì)PDLCs的ALP活性影響的時(shí)間效應(yīng)p <0.05,* 與相應(yīng)的對(duì)照組比較;** 與相應(yīng)的誘導(dǎo)組比較。經(jīng)bFGF+Dex、 BMP-2+bFGF、BMP-2+Dex、bFGF+ BMP-2+Dex組誘導(dǎo)后(圖18),體外培養(yǎng)的犬PDLCs的ALP活性均高于對(duì)照組,各組間ALP活性與對(duì)照組相比均有顯著提高(p<0.05)。其中,bFGF+ BMP-2+Dex組ALP活性最強(qiáng),與BMP-2+bFGF、BMP-2+Dex組間均有顯著性差異(p<0.05)。培養(yǎng)14d時(shí),各誘導(dǎo)組PDLCs的ALP活性仍趨于增高,與對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p<0.05)。14d與7d檢測(cè)結(jié)果不同的是
圖19 RT-PCR電泳圖 免疫熒光對(duì) PDLCs 中成骨基因 BSP 的檢測(cè)熒光染色結(jié)果發(fā)現(xiàn)各組細(xì)胞在常規(guī)培養(yǎng)的情況下細(xì)胞漿內(nèi)的BS期指標(biāo),添加了誘導(dǎo)因子的PDLCs,兩兩及三種聯(lián)合誘導(dǎo)組均顯性(圖20-23),但從(圖23)中我們可明顯發(fā)現(xiàn)三種誘導(dǎo)因子聯(lián)P為強(qiáng)陽性表達(dá);對(duì)照組細(xì)胞則顯示BSP為陰性表達(dá)(圖24)。充LCs在受到誘導(dǎo)因子刺激后均有成骨分化的趨勢(shì)。空白組未受到液培養(yǎng),鏡下觀察并未發(fā)現(xiàn)形成。論P(yáng)DLCs 在體外培養(yǎng)的條件下,向牙周組織分化需要誘導(dǎo)因子的一素,生長(zhǎng)因子可以促進(jìn) PDLCs 其向特定的細(xì)胞轉(zhuǎn)化,有利于組織
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]鼠根端乳頭條件培養(yǎng)基誘導(dǎo)下的牙周膜細(xì)胞膜片與牙本質(zhì)管和煅燒骨間的牙周膜再生[J]. 寧慧影,劉宏偉. 華西口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2011(04)
[2]人牙周膜細(xì)胞群多向分化潛能的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 劉娟,趙紅宇,軒東英,謝寶儀,章錦才. 華西口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2010(02)
[3]堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子對(duì)牙周膜細(xì)胞表皮生長(zhǎng)因子受體基因表達(dá)的影響[J]. 陳瑩,林崇韜,高穎. 華西口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2009(03)
[4]地塞米松對(duì)體外培養(yǎng)的人牙囊細(xì)胞增殖和堿性磷酸酶活性的影響[J]. 張永寬,林珠,金作林,孫海燕,王慶銀. 臨床口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2006(02)
[5]bFGF和rhBMP對(duì)牙周膜細(xì)胞膠原酶水平的影響[J]. 趙征,金巖,張廣耘,文玲英. 臨床口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2005(04)
[6]骨形成蛋白-2和成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子對(duì)人牙周膜細(xì)胞增殖的聯(lián)合效應(yīng)[J]. 吳勇,吳織芬,王勤濤,張斌,蒲秦. 牙體牙髓牙周病學(xué)雜志. 2001(01)
[7]年齡對(duì)牙周膜細(xì)胞鈣化表達(dá)的影響[J]. 劉宏偉,馬良,歐龍,袁志萍,龐勁凡. 中華口腔醫(yī)學(xué)雜志. 1998(06)
本文編號(hào):3484363
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