目的:近年來(lái),研究發(fā)現(xiàn)牙周可疑致病菌感染與許多重要腫瘤相關(guān)。具核梭桿菌（Fusobacterium nucleatum,F.nucleatum）作為重要牙周病致病菌廣泛存在于口腔中,屬橙色復(fù)合體,梭桿菌屬,兼性厭氧菌,研究顯示F.nucleatum比口腔其他細(xì)菌更廣泛存在于身體其他器官,與呼吸系統(tǒng)疾病,肝膿腫,早產(chǎn)等疾病密切相關(guān)。細(xì)胞DNA損傷是細(xì)菌破壞基因組穩(wěn)定性和完整性,從而影響腫瘤細(xì)胞的遺傳改變的重要機(jī)制,其中真核細(xì)胞內(nèi)最常見(jiàn)的損傷為DNA雙鏈斷裂（DNA double-strand break,DSB）,人類(lèi)和高等真核生物中最常見(jiàn)的DSB的主要修復(fù)途徑是非同源重組修復(fù)（Non-homologous end joining,NHEJ）,因此本文探討F.nucleatum感染口腔鱗癌細(xì)胞發(fā)生DNA雙鏈斷裂損傷后影響基因組的穩(wěn)定性和完整性,并對(duì)細(xì)胞增殖能力產(chǎn)生調(diào)控作用。通過(guò)檢測(cè)DSB標(biāo)志因子γH2AX表達(dá)構(gòu)建F.nucleatum感染Tca8113舌鱗癌細(xì)胞DNA損傷模型,觀察細(xì)胞增殖和細(xì)胞周期的變化,進(jìn)一步檢測(cè)NHEJ重要修復(fù)因子Ku70,抑癌因子wild p53,抑癌因子p27和... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁(yè)數(shù)】：62 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

Westernblot檢測(cè)F.nucleatum感染Tca8113舌鱗癌細(xì)胞4h，γH2AX表達(dá)變化情況

圖 3.2 F.nucleatum 感染 Tca8113 舌鱗癌細(xì)胞 36h，γH2AX 表達(dá)變化情況A：Western blot 檢測(cè)γH2AX 的電泳圖，B：各組γH2AX 的灰度值柱狀圖。F.nucleatum（MOI=500）感染 Tca8113 舌鱗癌細(xì)胞 36h，損傷因子γH2AX 表達(dá)上調(diào)并呈現(xiàn)時(shí)間依賴(lài)性，且24h 顯著上調(diào)，*表示與空白對(duì)照組相比 P＜0.05；#表示與前一時(shí)間點(diǎn)相比 P＜0.05。Western blot 結(jié)果發(fā)現(xiàn) 24h 時(shí)，損傷因子γH2AX 表達(dá)明顯增強(qiáng)，因此選取 24h時(shí)間點(diǎn)，運(yùn)用免疫熒光法進(jìn)一步驗(yàn)證模型，結(jié)果顯示在 24h 時(shí)γH2AX 相比于空白對(duì)照組熒光強(qiáng)度明顯增強(qiáng)且數(shù)量明顯增加（見(jiàn)圖 3.3），進(jìn)一步證明模型構(gòu)建成功。0h4h12h24h36h0.00.51.01.5grayscalevalue%ofγH2AX**#*AB

atum 感染 Tca8113 舌鱗癌細(xì)胞 DNA 損傷模型內(nèi)，各時(shí)間點(diǎn) F.nucleatum 感染組細(xì)胞于空白對(duì)照組顯著增強(qiáng)，*表示與空白對(duì)照組相比細(xì)胞增殖率 P＜0.05。cleatum 感染 Tca8113 舌鱗癌細(xì)胞發(fā)生 DNA 損傷并加速細(xì)胞 G1細(xì)胞于 S 期leatum 感染 Tca8113 舌鱗癌細(xì)胞 DNA 損傷模型內(nèi)，進(jìn)一步檢測(cè)細(xì)胞周期，見(jiàn)圖 3.6，3.7 和表 3.2），Tca8113 舌鱗癌細(xì)胞在 DNA 損傷模型內(nèi),各時(shí)各自空白對(duì)照組 G1 期細(xì)胞含量呈現(xiàn)下調(diào)狀態(tài)（P＜0.05），而 S 期細(xì)胞 值）除在 36h 呈現(xiàn)少量下調(diào)，其余時(shí)間點(diǎn)均呈上調(diào)狀態(tài)（P＜0.05），說(shuō)atum 感染 Tca8113 舌鱗癌細(xì)胞 DNA 損傷并調(diào)控細(xì)胞周期，使細(xì)胞阻滯于4h 12h 24h36h0h

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]淺談牙周病與呼吸道疾病之間的相關(guān)性[J]. 譚麗思,潘亞萍.  中國(guó)實(shí)用口腔科雜志. 2016(03)
[2]Abnormal DNA-PKcs and Ku 70/80 expression may promote malignant pathological processes in gastric carcinoma[J]. Wei Li,Chuan Xie,Zhen Yang,Jiang Chen,Nong-Hua Lu.  World Journal of Gastroenterology. 2013(40)
[3]Predictive role of XRCC5/XRCC6 genotypes in digestive system cancers[J]. Mei-Due Yang,Chia-Wen Tsai,Wen-Shin Chang,Yung-An Tsou,Cheng-Nan Wu,Da-Tian Bau.  World Journal of Gastrointestinal Oncology. 2011(12)



本文編號(hào)：3476297