[目的]研究蛋白激酶C-δ（protein kinase C-δ,PKC-δ）在舌鱗癌組織中的表達(dá)特征及其在熱誘導(dǎo)人舌鱗癌Tca8113細(xì)胞凋亡過程中的作用。[方法] （1）應(yīng)用EnVision免疫組織化學(xué)法檢測42例舌鱗癌腫瘤上皮細(xì)胞中PKC-δ蛋白的表達(dá),以15例正常舌黏膜上皮為對照。每片隨機(jī)觀察5個高倍視野,計算陽性細(xì)胞數(shù)和上皮細(xì)胞總數(shù)之比,大于等于10%為PKC-δ陽性結(jié)果,小于10%為PKC-δ陰性結(jié)果。（2）常規(guī)培養(yǎng)人舌鱗癌Tca8113細(xì)胞,應(yīng)用PKC-δ活化抑制劑Rottlerin和DMSO預(yù)處理細(xì)胞30min后,43℃水浴法加熱處理各組靶細(xì)胞0min、40min、80min、120min,常規(guī)培養(yǎng)24h,倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)的變化;收獲各組細(xì)胞,碘化丙啶（PI）染色,流式細(xì)胞儀（FCM）檢測細(xì)胞凋亡率;Rhodaminel23線粒體染色,收獲各組細(xì)胞, FCM檢測Tca8113細(xì)胞線粒體膜電位（△（?）m）的變化。常規(guī)培養(yǎng)4h,收獲細(xì)胞,提取細(xì)胞總蛋白,免疫印跡分析Tca8113細(xì)胞中PKC-δ斷裂活化狀況;免疫細(xì)胞化學(xué)檢測PKC-δ在細(xì)胞中的表達(dá)定位變化。常規(guī)培養(yǎng)... 

【文章來源】：昆明醫(yī)科大學(xué)云南省

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

PKC一6八:正常舌勃膜卜皮全層表達(dá)(EnVisionx4OO)

圖1PKC一6在正常舌戮膜上皮棘細(xì)胞層表達(dá)(EnVisionx400)Fig1ExPressionofPKC一6inthePrickleeelllayerofnormaltonguemueos

e，d)�；戡斪熳u(yù):滬浮心腳廣.自矽圖5PKC-PKC一6在Tcasll3細(xì)胞的表達(dá)幾c圖 (EnVisionx100)，b，d圖(EnVisionx400)6在細(xì)胞的胞漿中和核周表達(dá) ExPressionofPKC一 6ineytoPlasmaandPerinuelearofTcasl13eells

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3470035