實(shí)驗(yàn)?zāi)康?口腔種植體周存在低濃度鈦離子現(xiàn)已被相關(guān)研究證實(shí)。本研究通過(guò)在MC3T3-E1細(xì)胞中加入不同濃度鈦離子,建立細(xì)胞模型,檢測(cè)MC3T3-E1細(xì)胞在一定濃度的鈦離子中增殖變化,并通過(guò)檢測(cè)成骨相關(guān)因子的表達(dá)研究MC3T3-E1細(xì)胞成骨分化的變化,并且通過(guò)檢測(cè)TGF-β/Smad蛋白通路相關(guān)蛋白的表達(dá),探究鈦離子是否會(huì)通過(guò)TGF-β/Smad通路影響MC3T3-E1細(xì)胞的成骨分化,從而對(duì)臨床產(chǎn)生指導(dǎo)意義。實(shí)驗(yàn)方法:1.對(duì)MC3T3-E1細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),加入10,50,100,200μmol/L鈦離子進(jìn)行細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn)。2.篩選出10 μmol/L鈦離子濃度與細(xì)胞共培養(yǎng)1天,4天,7天和14天后檢測(cè)細(xì)胞的增殖情況。3.通過(guò)qRT-PCR檢測(cè)1天,4天,7天MC3T3-E1細(xì)胞成骨相關(guān)因子Runx2,OCN,ALP,Colla1的基因表達(dá)。4.通過(guò)ALP、茜素紅染色檢測(cè)MC3T3-E1細(xì)胞的成骨分化情況。5.通過(guò)qRT-PCR檢測(cè)1天,4天,7天后MC3T3-E1細(xì)胞中TGF-β/Smad 通路相關(guān)因子 TGF-β1,TGF-βr1,TGF-βr2,Smad2 和Smad3的基因表達(dá)。6.通過(guò)W... 

【文章來(lái)源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：46 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖３．?１鈦離子濃度為１０?ｎｍｏｌ／Ｌ時(shí)促進(jìn)了?ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１細(xì)胞的增殖??Ａ：細(xì)胞毒性測(cè)定顯示濃度為２００ｉｍｏｌ／Ｌ的鈦離子對(duì)細(xì)胞有毒性

?■?１０ｐｍｏｔ／Ｌ??ｉｌｉｉａｕｉ?ｌｌｉＬｕ??圖３．?３成骨基因在ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１細(xì)胞中的表達(dá)。??Ａ：在第１，４和７天，１０?｜＿ｉｍｏｌ／Ｌ組Ｒｕｎｘ２的表達(dá)顯著增加。Ｂ：第１天和第４天，??１０?ｐｍｏｌ／Ｌ組的０ＣＮ表達(dá)較低，但第７天則較高。Ｃ：在第１，４和７天，１０?ｐｍｏｌ／Ｌ??組ＡＬＰ的表達(dá)增加，僅在第１天有顯著性差異。Ｄ：?１０?ｐｍｏｌ／Ｌ組中Ｃｏｌｌａｌ的表??達(dá)增加。第１天和第４天存在顯著性差異。（＊ｐ＜０．０５）??１７??

一?■?Ｉ??圖３．?２堿性磷酸酶活性和茜素紅染色（４０ｘ）??Ａ：在第１，４和７天的ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１細(xì)胞的堿性磷酸酶活性。Ｂ：由茜素紅染色的鈣??結(jié)節(jié)，洗脫后染液的吸光度值（６２０?ｎｍ）大小。在第１４天，各組之間沒有顯著??性差異。在第２１天和第２８天，丨０?ｐｍｏｌ／Ｌ組的吸光度值顯著增加。Ｃ：在光學(xué)??顯微鏡下觀察，發(fā)現(xiàn)在第２１天和第２８天，１０?Ｍｍｏｌ／Ｌ組可見更多的鈣結(jié)節(jié)。（＊??ｐ＜０．０５）??Ａ?ＲＵｎｘ２?Ｂ?ＯＣＮ??Ｂ?ｅ??ｌ１５］?■?Ｃｏｎｔｒｏｌ?ｌ３］?＊?■Ｃｏｎｔｒｏｌ??Ｉ．?＊?ｍ?１〇Ｍｍ〇ｌ／Ｌ?■?１〇Ｍｍ〇ｌ／Ｌ??卜?｜?ｒ??ｊｊｊ．Ｊ?Ｊ?ｌｉｉｔｉｕｌ??０?＇６?ｎ６?＾?令??Ｃ?ＡＬＰ?Ｄ?Ｃｏｌ１ａ１??｜?今?？?■?Ｃｏｎｔｒｏｌ?Ｊ４＊?ａ?■?Ｃｏｎｔｒｏｌ??｜?３．?ｊ?■?１〇Ｍｍ〇ｌ／ＬＳ?ｙ?■?■?１０ｐｍｏｔ／Ｌ??ｉｌｉｉａｕｉ?ｌｌｉＬｕ??圖３．?３成骨基因在ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１細(xì)胞中的表達(dá)。??Ａ：在第１，４和７天，１０?｜＿ｉｍｏｌ／Ｌ組Ｒｕｎｘ２的表達(dá)顯著增加。Ｂ：第１天和第４天，??１０?ｐｍｏｌ／Ｌ組的０ＣＮ表達(dá)較低，但第７天則較高。Ｃ：在第１，４和７天，１０?ｐｍｏｌ／Ｌ??組ＡＬＰ的表達(dá)增加，僅在第１天有顯著性差異。Ｄ：?１０?ｐｍｏｌ／Ｌ組中Ｃｏｌｌａｌ的表??達(dá)增


本文編號(hào)：3435407