目的：考察三種巰基蛋白酶（木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶、無花果蛋白酶）水解去磷酸化的牛乳β-酪蛋白（dephosphorylated bovine milk β-casein, β-CN（DP））/茶黃素（theaflavin, TF）復(fù)合膜的效率及水解后殘存膜再次吸附TF的能力。方法：在消散因子石英微天平（quartz crystal microbalance with dissipation, QCM-D）芯片表面自組裝單分子β-CN（DP）膜并在其上吸附TF，建立β-CN（DP）/TF復(fù)合膜。向QCM-D測量池中分別通入木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶、無花果蛋白酶，觀察膜水解的時間（Δt）與頻率改變（ΔF）圖形。運用玻爾茲曼方程對ΔF和Δt進行擬合，求得水解效率（1/C），比較不同酶水解復(fù)合膜的效率之間的差異。通過原子力顯微鏡和接觸角測量儀表征水解前后復(fù)合膜的均方根粗糙度、形貌和親疏水性。對不同酶水解后的殘存膜行再次吸附TF實驗，并與膜首次吸附TF的相關(guān)參數(shù)（Δm、Δh）比較。結(jié)果：弗倫德利希等溫線則更好地描述TF在β-CN（DP）膜表面的吸附行為。三種酶的水解效率為無花果蛋白酶>木瓜蛋... 

【文章來源】：福建醫(yī)科大學(xué)福建省

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

茶黃素結(jié)構(gòu)Fig.1Thestructureoftheaflavin

圖 2 消散因子石英晶體微天平工作原理Fig.2 The operating principle of QCM-D原子力顯微鏡（AFM）的工作原理[34]1986年Binnig等人在掃描隧道顯微鏡（scanning tunneling microscope, STM）的基礎(chǔ)上發(fā)明了新型掃描探針顯微鏡—原子力顯微鏡（atomic force microscope,AFM），它利用原子之間的范德華力來呈現(xiàn)樣品的表面特性，可獲取納米級分辨率的活生物體等表面結(jié)構(gòu)信息。原子力顯微鏡的基本原理是：將一個對微弱力極敏感的微懸臂一端固定，另一端有一微小的針尖，針尖與樣品表面輕輕接觸，由于針尖尖端原子與樣品表面原子間存在極微弱的排斥力，通過在掃描時控制這種力的恒定，帶有針尖的微懸臂將對應(yīng)于針尖與樣品表面原子間作用力的等位面而在垂直于樣品的表面方向起伏運動。利用光學(xué)檢測法或隧道電流檢測法，可測得微懸臂對應(yīng)于掃描各點的位置變化，從而可以獲得樣品表面形貌的信息。它不受樣品是否具有導(dǎo)電性的限制，可以對導(dǎo)體、半導(dǎo)體和絕緣體進行測量，因此 AFM

若樣品表面柔軟而無法承受，則不宜選用接觸模式檢測樣品表成像。非接觸模式探測樣品表面時，懸臂在距離樣品表面上方 5～10 nm 的處振蕩。這時，樣品與針尖之間的相互作用由范德華力控制，通常為 10-12會破壞樣品，也不會被污染針尖，特別適合于研究非剛性物體的表面。敲擊介于接觸模式和非接觸模式之間，懸臂在試樣表面上方以其共振頻率振蕩，僅僅是周期性地短暫地接觸/敲擊樣品表面。這就意味著針尖接觸樣品時所的側(cè)向力被明顯地減小了。因此，當(dāng)檢測非剛性樣品時，AFM 的敲擊模式好的選擇之一。AFM的相位成像技術(shù)可以在納米尺度上獲得樣品表面局域性質(zhì)的豐富，是通過檢測驅(qū)動微懸臂探針振動的信號源的相位角與微懸臂探針實際振動位角之差（即兩者的相移）的變化來成像的。引起相移的因素很多，如樣品分、硬度、粘彈性質(zhì)等。在相位圖中，相同的顏色代表相同的材質(zhì)和高度。原理如圖3所示。

【參考文獻】：
期刊論文
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