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不同濃度D-纈氨酸對小鼠成纖維細胞L929增殖和凋亡的影響

發(fā)布時間:2021-09-23 01:40
  背景與目的:種植體周圍炎和種植體周圍黏膜炎作為一種常見的種植并發(fā)癥,已備受臨床醫(yī)生關注。眾所周知,導致種植體周圍炎發(fā)生的始動因素是種植體頸部菌斑生物膜的積聚。因此,如何有效的清除和控制菌斑則是治療的關鍵所在。近年來多種研究表明D型氨基酸(右旋氨基酸)在抑菌和破壞生物膜方面表現出良好的潛力,有望應用于控制生物膜的感染。本課題為國家自然基金中的部分研究內容,課題組前期實驗已證實特定濃度(50-150mM)下的D-纈氨酸(D-valine,D-val)能有效抑制牙齦卟啉單胞菌生物膜的形成,有望將其應用于控制生物膜感染的治療。但關于該濃度下的D-纈氨酸的細胞毒性作用及安全濃度范圍還未見有明確的報道。因此,明確其生物安全性并篩選出安全濃度范圍的D-纈氨酸,為其可能作為抑制生物膜形成或/和分散已形成的生物膜的制劑,治療種植體周圍炎具有重要意義。方法:1、培養(yǎng)小鼠成纖維L929細胞,組織學觀察細胞形態(tài)及生長狀態(tài),繪制生長曲線。2、實驗組分別加入不同濃度的D-val,對照組加入等體積的DMEM培養(yǎng)液。分別在第1、3、5天采用CCK-8法檢測不同濃度的D-val對成纖維細胞L929增殖活性的影響。3、實... 

【文章來源】:吉林大學吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數】:50 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

不同濃度D-纈氨酸對小鼠成纖維細胞L929增殖和凋亡的影響


圖3.1.BL929細胞生長曲線??

細胞生長曲線,細胞,培養(yǎng)瓶,細胞密度


3.?1A)。培養(yǎng)第5天后,測定不同接種濃度下細胞的吸光度值,繪制生??長曲線。可見當細胞密度大于6000/孔時,吸光度值開始下降,當細胞??密度為6000時吸光度值達到最高峰(圖3.?1B)。??_??圖3.1.A培養(yǎng)瓶內貼壁生長的細胞(x20?)??2.5-1?L929?cell?growth?curve??!?;:??I1。-?z??0.5-??0.0?'?■i?'?i?i??????2000?4000?6000?8000?10000??dentisty(cells/well)??圖3.1.BL929細胞生長曲線??14??

結果分析,對照組,雙標記,比例


不同濃度D-val培養(yǎng)5天后的L929細胞,經AnnexinV-FITC/PI??雙標記后,進行流式細胞儀檢測。結果表明:對照組的成纖維細胞凋??亡比例為5.?77%土0.81?(圖3.3A),與對照組相比,150mM組的細胞??凋亡比例低于對照組,約為3.59%±0.91(圖3.3C),結果具有統(tǒng)計學??差異(P<〇.?〇5)。125、100、75、50mM組中細胞的早期凋亡率分別為??4.?33%±0.?85,?4.?01%±0.83,?4.?27%±0.88,?3.?92%±1.01?(圖?3.3C-F),??與對照組相比較凋亡率有所減低,但結果均無統(tǒng)計學意義(P>〇.?05)。??rr?????°:?0.44?6.29?'?0.72?16.70??☆?崩義.?,?丨桑導....??…,,,4?'i…:r-'1???Annexin-V-FITC?Annexin-V-FITC??3.?3?A?對照組


本文編號:3404772

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