目的:比較不同正畸加力時(shí)間牙槽骨壓力側(cè)破骨細(xì)胞數(shù)和MMP-9表達(dá)水平,探討骨質(zhì)疏松對(duì)正畸力作用下骨代謝的影響。方法:取6月齡雌性Wistar大鼠50只,隨機(jī)分為去勢(shì)組和對(duì)照組（每組25只）。去勢(shì)組大鼠切除雙側(cè)卵巢建立骨質(zhì)疏松模型。術(shù)后6個(gè)月,于兩組大鼠上頜雙側(cè)磨牙與中切牙之間安裝矯治器,并施以0.49 N的拉力。分別于加力后0、5、7、10、14 d取材,免疫組化及抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色法檢測(cè)各組大鼠上頜第一磨牙壓力側(cè)牙周組織中MMP-9表達(dá)水平及破骨細(xì)胞數(shù)。結(jié)果:去勢(shì)組和對(duì)照組大鼠移動(dòng)牙齒壓力側(cè)MMP-9表達(dá)水平及破骨細(xì)胞數(shù)均隨加力時(shí)間延長而增加,加力7 d時(shí)達(dá)到高峰,10 d后逐漸降低;相同加力時(shí)間點(diǎn)內(nèi)兩組相比,去勢(shì)組MMP-9的表達(dá)和破骨細(xì)胞數(shù)均高于對(duì)照組,除加力14 d時(shí)兩組破骨胞數(shù)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）外,其他差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論:骨質(zhì)疏松狀態(tài)下大鼠正畸移動(dòng)牙齒壓力側(cè)牙槽骨吸收活動(dòng)增強(qiáng)。 

【文章來源】：牙體牙髓牙周病學(xué)雜志. 2013,23(07)北大核心

【文章頁數(shù)】：4 頁

【部分圖文】：

去卵巢手術(shù)

?0只6月齡Wistar大鼠(雌性，體質(zhì)量260g左右)(河北醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供)，適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后，戊巴比妥鈉腹腔注射(2．2mL/500g)麻醉，隨機(jī)分為去勢(shì)組和對(duì)照組，每組25只。去勢(shì)組大鼠切除雙側(cè)卵巢，以造成雌激素缺乏的骨質(zhì)疏松實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型;對(duì)照組大鼠只切除卵巢周圍的小塊脂肪組織，不切除雙側(cè)卵巢(圖1)，然后分籠飼養(yǎng)，自由飲水和攝食。術(shù)后6個(gè)月分別在所有大鼠的雙側(cè)上頜第一磨牙與中切牙之間安裝鈦鎳螺旋彈簧，打開彈簧使其產(chǎn)生約0．49N的拉力，牽引上頜第一磨牙向近中移動(dòng)，建立正畸牙齒移動(dòng)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?圖2)。圖1去卵巢手術(shù)圖2正畸加力矯治器的安裝1．2取材和標(biāo)本制備分別于正畸加力后0(不加力)、5、7、10、14d各時(shí)間點(diǎn)，從兩組大鼠中各隨機(jī)抽取5只大鼠，40g/L多聚甲醛心臟灌注處死;解剖出各大鼠的雙側(cè)上頜骨并切取包括第一磨牙及其牙周組織的骨段。置于40g/L多聚甲醛固定液中固定72h。固定后的所有標(biāo)本經(jīng)EDTA液脫鈣至可以用大頭針輕松刺透牙齒后，石蠟包埋，平行于第一磨牙長軸沿近、遠(yuǎn)中向制作5μm厚的切片。1．3HE染色觀察取各組各時(shí)間點(diǎn)組織切片，HE染色后光學(xué)顯微鏡下觀察壓力側(cè)組織變化情況。1．4TＲAP染色觀察破骨細(xì)胞數(shù)量取各組各時(shí)間點(diǎn)石蠟切片脫蠟至水，浸于固定液中30s后，置于新鮮配制的TＲAP染液(sigma公司，美國)中37℃避光孵育1h;蘇木素復(fù)染，光學(xué)顯微鏡下進(jìn)行破骨細(xì)胞計(jì)數(shù)。1．5免疫組化染色檢測(cè)MMP－9表達(dá)取各組各時(shí)間點(diǎn)石蠟切片脫蠟至水，滴加胰蛋白酶消化液(1∶3)37℃孵育15min進(jìn)行抗原修復(fù);PBS沖洗3次(每次5min)，滴加MMP－9多克隆抗體(1∶100，北京中杉)，37℃孵育1．5h;采用山羊超敏兩步法免疫組化試劑盒(北京中杉)按說明書進(jìn)行MMP－9免疫組化染色，以PBS代替一抗作為陰性對(duì)?

與對(duì)照組相比，去勢(shì)組加力后牙周組織變化更明顯，骨小梁變薄變少，且排列稀松;骨髓腔增大，其中可見大量炎性細(xì)胞浸潤，牙槽骨表面可見大量骨吸收陷窩(圖3b);加力10d和14d時(shí)，出現(xiàn)玻璃樣變組織。a．對(duì)照組b．去勢(shì)組圖3加力7d時(shí)HE染色觀察(×200)2．2各組移動(dòng)牙齒壓力側(cè)破骨細(xì)胞數(shù)比較TＲAP染色顯示，去勢(shì)組和對(duì)照組大鼠移動(dòng)牙齒壓力側(cè)牙周組織中TＲAP染色呈陽性的破骨細(xì)胞數(shù)量均隨加力時(shí)間延長而增多，7d時(shí)達(dá)到高峰，10d后逐漸減少;在相同加力時(shí)間點(diǎn)上去勢(shì)組破骨細(xì)胞數(shù)均多于對(duì)照組(除14d外)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0．05)(表1、圖4)。表1各組大鼠移動(dòng)牙壓力側(cè)牙周組織中破骨細(xì)胞數(shù)比較(n=10，x珋±s)加力時(shí)間(d)對(duì)照組去勢(shì)組tP02．50±1．274．60±0．97－4．1630．00053．90±1．208．20±1．55－6．9450．00077．50±1．0812．30±1．83－7．1470．000105．20±1．327．50±1．08－4．2710．000144．00±0．824．10±0．74－0．2870．777a．對(duì)照組b．去勢(shì)組圖4加力7d時(shí)破骨細(xì)胞TＲAP染色觀察(×400)2．3各組移動(dòng)牙齒壓力側(cè)MMP－9表達(dá)情況免疫組化結(jié)果顯示，MMP－9陽性著色為棕黃色，主要位于牙周膜成纖維細(xì)胞和破骨細(xì)胞的胞漿中(圖5)。半定量分析顯示，未加力(0d)時(shí)對(duì)照組和去勢(shì)組大鼠牙周組織中MMP－9的表達(dá)均較低，隨著加力時(shí)間延長，對(duì)照組和去勢(shì)組大鼠移動(dòng)牙壓力側(cè)牙周組織中MMP－9的表達(dá)均逐漸增強(qiáng)，7d達(dá)到高峰，10d后逐漸降低，在相同加力時(shí)間點(diǎn)上去勢(shì)組牙周組織中MMP－9表達(dá)均高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0．05)(表2)。表2MMP－9在各組大鼠移動(dòng)牙壓力側(cè)牙周組織中的MMP－9表達(dá)水平比較(n=10，M±Q)加力時(shí)間(d)對(duì)照組去勢(shì)組ZP00．06678±0．008000．08597±0．01836－3．0990．00250．12501±0．

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]正畸牙移動(dòng)的組織學(xué)改變[J]. 仝毅.  國外醫(yī)學(xué).口腔醫(yī)學(xué)分冊(cè). 1987(05)

碩士論文
[1]雌激素對(duì)破骨細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶mRNA表達(dá)的影響[D]. 葉凡.東南大學(xué) 2005



本文編號(hào)：3363971