目的:探討沉默DNA解螺旋酶RECQ1基因?qū)谇击[癌細(xì)胞增殖、遷移及上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）的影響。方法:體外培養(yǎng)人正�？谇唤琴|(zhì)上皮HOK細(xì)胞、口腔鱗癌Cal27細(xì)胞,采用實時定量RT-PCR與Western Blot檢測RECQ1 mRNA及蛋白表達(dá)水平。采用RNA干擾法靶向沉默Cal27細(xì)胞RECQ1基因,實驗分為5組:si-RECQ1組（si-RECQ1轉(zhuǎn)染至Cal27細(xì)胞）、si-RECQ1+轉(zhuǎn)化生長因子β1（TGF-β1）組（RECQ1沉默后加入TGF-β1）、si-NC組、TGF-β1組及空白對照組。采用CCK-8法檢測各組細(xì)胞增殖抑制率,Transwell法檢測細(xì)胞侵襲能力,細(xì)胞劃痕實驗檢測細(xì)胞遷移能力,采用實時定量RT-PCR與Western Blot檢測RECQ1及上皮性鈣黏附蛋白（E-cadherin）、N鈣黏附蛋白（N-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）等EMT相關(guān)蛋白表達(dá)。結(jié)果:與HOK細(xì)胞相比,Cal27細(xì)胞RECQ1 mRNA及蛋白表達(dá)水平均顯著升高（P<0.05）;與空白對照組、si-NC組相比,si-RECQ1組Cal27細(xì)胞中RECQ... 

【文章來源】：口腔生物醫(yī)學(xué). 2020,11(02)

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

細(xì)胞劃痕實驗結(jié)果(×200)

Western Blot及實時定量RT-PCR結(jié)果顯示:與人正�？谇唤琴|(zhì)上皮細(xì)胞HOK相比，口腔鱗癌細(xì)胞Cal27中RECQ1 m RNA及蛋白表達(dá)水平均顯著升高(P<0.05，圖1)。2.2 RECQ1沉默效果

CCK-8法檢測結(jié)果顯示:隨著培養(yǎng)時間的延長，si-RECQ1組Cal27細(xì)胞增殖抑制率逐漸升高，空白對照組、si-NC組、si-RECQ1+TGF-β1組Cal27細(xì)胞增殖抑制率在12 h后呈現(xiàn)平穩(wěn)趨勢，TGF-β1組12h后呈現(xiàn)下降的趨勢。與空白對照組、si-NC組比較，si-RECQ1組各時間點Cal27細(xì)胞增殖抑制率均呈現(xiàn)升高趨勢(P<0.05);與si-RECQ1+TGF-β1組比較，TGF-β1組各時間點Cal27細(xì)胞增殖抑制率顯著降低(P<0.05);其余各組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05，圖3)。圖3 RECQ1沉默對Cal27細(xì)胞增殖能力的影響

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3319886