口腔鱗狀細(xì)胞癌是口腔頜面部最常見的惡性腫瘤,嚴(yán)重危害人類健康。已有研究表明,口腔鱗癌患者免疫功能低下,且與病變的發(fā)展和預(yù)后密切相關(guān),因此通過免疫治療來提高患者生存率已成為目前的一個(gè)研究熱點(diǎn)。目的：探討MICA-NKG2D信號(hào)通路關(guān)鍵分子在口腔鱗癌發(fā)生發(fā)展過程中的表達(dá)及其臨床意義。建立MICA穩(wěn)定過表達(dá)的口腔鱗癌細(xì)胞系,通過體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)研究MICA過表達(dá)對(duì)NK及CTL細(xì)胞NKG2D的表達(dá)及細(xì)胞毒作用的影響,以期為利用MICA-NKG2D信號(hào)通路作為口腔鱗癌的免疫治療靶標(biāo)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法：1.實(shí)時(shí)定量PCR和免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)口腔鱗癌組織標(biāo)本mMICA mRNA及蛋白的表達(dá),ELISA與流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)口腔鱗癌患者血清中sMICA及外周血PBMC中NKG2D的表達(dá),采用SPSS16.0軟件統(tǒng)計(jì),分析其與口腔鱗癌患者臨床病理參數(shù)的關(guān)系。2.PCR技術(shù)擴(kuò)增pCMV-SPORT6-MICA中編碼MICA基因全長(zhǎng)的cDNA序列,重組至有綠色熒光蛋白標(biāo)記的真核表達(dá)載體pEGFP-N1,構(gòu)建最終表達(dá)載體pEGFP-N1-MICA,脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染Tca8113-Tb細(xì)胞,G418篩選,熒光顯微鏡下觀察綠色... 

【文章來源】：中南大學(xué)湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

正常口腔粘膜中NnCA的定位(sPx100);B.高倍鏡強(qiáng)陽1免疫組織化學(xué)檢測(cè)MICA的表達(dá):Mi以定位于細(xì)胞膜與細(xì)胞質(zhì)(sPx400):C、D、E、E癌旁組織呱以陰性、弱陽性、、強(qiáng)陽性表墩sPxZoo):o、H、I、J.高分化口腔鱗癌組織樹以陰性、弱陽性、陽性、性下陽性表達(dá)(sPx20o)K、L、M.中分化口腔鱗癌組織呱eA弱陽性、陽性、強(qiáng)陽性表達(dá)(sPxZoo)

1.4討論正常情況下皿CA組織分布局限，主要表達(dá)于胸腺和胃腸道上皮。本研究結(jié)發(fā)現(xiàn)，正常口腔粘膜瓏CA呈陽性表達(dá)，主要定位于棘層，而角化層和基底層表達(dá)較少，考慮原因?yàn)榭谇徽衬づc胃腸粘膜同屬消化道上皮，組織發(fā)生相同。最研究表明，MICA表達(dá)上調(diào)可能是細(xì)胞處于應(yīng)激狀態(tài)的標(biāo)志，熱休克、感染、癥等均可使誦CA表達(dá)上調(diào)[l7一‘”l�？谇徽衬ぶ苯优c食物、口腔內(nèi)細(xì)菌相接觸，咀嚼、攪拌食物可能伴發(fā)粘膜的微損傷，因而我們推測(cè)口腔粘膜MICA陽性表可能是細(xì)胞針對(duì)這些刺激所產(chǎn)生的一種免疫應(yīng)答。MICA在癌旁組織中的表達(dá)位情況與正常粘膜類似，但表達(dá)強(qiáng)度有所增加。其可能的原因是，多數(shù)口腔癌者口腔環(huán)境不良，有咀嚼擯榔、抽煙、飲酒等不良嗜好，因而口腔癌患者的癌

1.4討論正常情況下皿CA組織分布局限，主要表達(dá)于胸腺和胃腸道上皮。本研究結(jié)發(fā)現(xiàn)，正�？谇徽衬き嘋A呈陽性表達(dá)，主要定位于棘層，而角化層和基底層表達(dá)較少，考慮原因?yàn)榭谇徽衬づc胃腸粘膜同屬消化道上皮，組織發(fā)生相同。最研究表明，MICA表達(dá)上調(diào)可能是細(xì)胞處于應(yīng)激狀態(tài)的標(biāo)志，熱休克、感染、癥等均可使誦CA表達(dá)上調(diào)[l7一‘”l�？谇徽衬ぶ苯优c食物、口腔內(nèi)細(xì)菌相接觸，咀嚼、攪拌食物可能伴發(fā)粘膜的微損傷，因而我們推測(cè)口腔粘膜MICA陽性表可能是細(xì)胞針對(duì)這些刺激所產(chǎn)生的一種免疫應(yīng)答。MICA在癌旁組織中的表達(dá)位情況與正常粘膜類似，但表達(dá)強(qiáng)度有所增加。其可能的原因是，多數(shù)口腔癌者口腔環(huán)境不良，有咀嚼擯榔、抽煙、飲酒等不良嗜好，因而口腔癌患者的癌

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]大鼠舌鱗狀細(xì)胞癌外周血淋巴細(xì)胞亞群的變化及其與腫瘤的關(guān)系[J]. 蔣燦華,葉冬霞,陳萬濤,周曉健,張志愿,邱蔚六.  中華口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2005(06)
[2]舌鱗癌SD大鼠血清中Th1/Th2漂移與腫瘤進(jìn)展的關(guān)系[J]. 蔣燦華,葉冬霞,陳萬濤,周曉健,張志愿,邱蔚六.  中國(guó)口腔頜面外科雜志. 2005(03)
[3]卵巢腫瘤患者外周血NK細(xì)胞受體NKG2A、NKG2D及NK活性檢測(cè)的臨床意義[J]. 劉敏,孔北華,曲迅.  現(xiàn)代免疫學(xué). 2005(03)
[4]膜型分泌型MICA對(duì)NK細(xì)胞受體NKG2D的相反調(diào)節(jié)效應(yīng)及其對(duì)NK細(xì)胞受體譜的影響[J]. 張彩,馮進(jìn)波,王郡甫,許曉群,張建,田志剛.  中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志. 2004(02)
[5]NK細(xì)胞受體識(shí)別的多樣性[J]. 田志剛,魏海明.  中國(guó)免疫學(xué)雜志. 2004(01)
[6]口腔鱗癌細(xì)胞系HLAI類分子異常表達(dá)及其機(jī)制探討[J]. 唐秋莎,張建瓊,祁兵,沈傳來,魯曉萱,鮑海遜,Soldano Ferrone,Xinhui Wang,謝維.  上海免疫學(xué)雜志. 2003(04)



本文編號(hào)：3317626