發(fā)布時(shí)間：2021-08-01 13:44

　　目的探討miR-214對(duì)于牙囊細(xì)胞（dental follicle cells,DFCs）成骨分化的影響。方法雙向差速傳代法體外培養(yǎng)提純牙囊細(xì)胞,以未轉(zhuǎn)染的DFCs為對(duì)照（DFCs組）,通過(guò)向DFCs中轉(zhuǎn)染miR-214-3p mimics（miR-214 mimics組）或miR-214-3p inhibitor（miR-214 inhibitor組）分別上調(diào)和下調(diào)DFCs中的miR-214的表達(dá)。成骨誘導(dǎo)7 d,qRT-PCR檢測(cè)miR-214表達(dá)及相關(guān)成骨基因堿性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）、骨粘連蛋白（osteonectin,OSN）、成骨相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子2（runt-related transcription factor-2,RUNX-2）的mRNA表達(dá),免疫蛋白印跡檢測(cè)各組RUNX-2、β-catenin蛋白表達(dá);成骨誘導(dǎo)14 d茜素紅染色觀察礦化結(jié)節(jié)形成的情況。結(jié)果骨誘導(dǎo)7d,相較DFCs組,miR-214 mimics組miR-214的表達(dá)上調(diào),miR-214 mimics組成骨相關(guān)基因ALP、OSN及RUNX-2的mRNA表達(dá)均低于DFCs... 

【文章來(lái)源】：口腔疾病防治. 2020,28(03)

【文章頁(yè)數(shù)】：7 頁(yè)

【部分圖文】：

原代DFCs及經(jīng)雙向差速傳代法提純至第三代的DFCs

經(jīng)q RT-PCR檢測(cè)，轉(zhuǎn)染1 d,miR-214 inhibitor組miR-214表達(dá)受抑制，較正常DFCs下降43倍（P<0.01),miR-214 mimics組表達(dá)上調(diào)41倍（P<0.01）；轉(zhuǎn)染2 d及轉(zhuǎn)染3 d,miR-214的轉(zhuǎn)染效果逐漸弱化（P<0.05）（圖2）。2.2.2 成骨誘導(dǎo)后miR-214的表達(dá)

miR-214 mimics組，成骨相關(guān)基因ALP、OSN及RUNX-2的mRNA表達(dá)均低于正常DFCs組，但僅ALP在兩組的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），而miR-214inhibitor組成骨相關(guān)基因OSN及RUNX-2、ALP的mRNA表達(dá)均高于DFCs組，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）（圖4）。圖4 轉(zhuǎn)染mi R-214 mimics及mi R-214 inhibitor并成骨誘導(dǎo)7 d ALP、OSN、RUNX-2 m RNA表達(dá)情況

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]miR對(duì)骨質(zhì)疏松骨代謝信號(hào)通路影響的研究進(jìn)展[J]. 宋敏,鞏彥龍,劉濤,董萬(wàn)濤,李清林,孫定平,周靈通.  中國(guó)骨質(zhì)疏松雜志. 2016(09)
[2]雙向差速法純化大鼠牙囊細(xì)胞[J]. 王麗萍,李伯琦,鐵曉敏,王琪,劉奕杉.  口腔疾病防治. 2016(03)
[3]中國(guó)25392名兒童與青少年錯(cuò)畸形患病率的調(diào)查[J]. 傅民魁,張丁,王邦康,鄧燕,王佛漢,葉湘玉.  中華口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2002(05)



本文編號(hào)：3315632