miR-214抑制牙囊細胞成骨分化的體外研究
發(fā)布時間:2021-08-01 13:44
目的探討miR-214對于牙囊細胞(dental follicle cells,DFCs)成骨分化的影響。方法雙向差速傳代法體外培養(yǎng)提純牙囊細胞,以未轉(zhuǎn)染的DFCs為對照(DFCs組),通過向DFCs中轉(zhuǎn)染miR-214-3p mimics(miR-214 mimics組)或miR-214-3p inhibitor(miR-214 inhibitor組)分別上調(diào)和下調(diào)DFCs中的miR-214的表達。成骨誘導(dǎo)7 d,qRT-PCR檢測miR-214表達及相關(guān)成骨基因堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、骨粘連蛋白(osteonectin,OSN)、成骨相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子2(runt-related transcription factor-2,RUNX-2)的mRNA表達,免疫蛋白印跡檢測各組RUNX-2、β-catenin蛋白表達;成骨誘導(dǎo)14 d茜素紅染色觀察礦化結(jié)節(jié)形成的情況。結(jié)果骨誘導(dǎo)7d,相較DFCs組,miR-214 mimics組miR-214的表達上調(diào),miR-214 mimics組成骨相關(guān)基因ALP、OSN及RUNX-2的mRNA表達均低于DFCs...
【文章來源】:口腔疾病防治. 2020,28(03)
【文章頁數(shù)】:7 頁
【部分圖文】:
原代DFCs及經(jīng)雙向差速傳代法提純至第三代的DFCs
經(jīng)q RT-PCR檢測,轉(zhuǎn)染1 d,miR-214 inhibitor組miR-214表達受抑制,較正常DFCs下降43倍(P<0.01),miR-214 mimics組表達上調(diào)41倍(P<0.01);轉(zhuǎn)染2 d及轉(zhuǎn)染3 d,miR-214的轉(zhuǎn)染效果逐漸弱化(P<0.05)(圖2)。2.2.2 成骨誘導(dǎo)后miR-214的表達
miR-214 mimics組,成骨相關(guān)基因ALP、OSN及RUNX-2的mRNA表達均低于正常DFCs組,但僅ALP在兩組的差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),而miR-214inhibitor組成骨相關(guān)基因OSN及RUNX-2、ALP的mRNA表達均高于DFCs組,且差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)(圖4)。圖4 轉(zhuǎn)染mi R-214 mimics及mi R-214 inhibitor并成骨誘導(dǎo)7 d ALP、OSN、RUNX-2 m RNA表達情況
【參考文獻】:
期刊論文
[1]miR對骨質(zhì)疏松骨代謝信號通路影響的研究進展[J]. 宋敏,鞏彥龍,劉濤,董萬濤,李清林,孫定平,周靈通. 中國骨質(zhì)疏松雜志. 2016(09)
[2]雙向差速法純化大鼠牙囊細胞[J]. 王麗萍,李伯琦,鐵曉敏,王琪,劉奕杉. 口腔疾病防治. 2016(03)
[3]中國25392名兒童與青少年錯畸形患病率的調(diào)查[J]. 傅民魁,張丁,王邦康,鄧燕,王佛漢,葉湘玉. 中華口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2002(05)
本文編號:3315632
【文章來源】:口腔疾病防治. 2020,28(03)
【文章頁數(shù)】:7 頁
【部分圖文】:
原代DFCs及經(jīng)雙向差速傳代法提純至第三代的DFCs
經(jīng)q RT-PCR檢測,轉(zhuǎn)染1 d,miR-214 inhibitor組miR-214表達受抑制,較正常DFCs下降43倍(P<0.01),miR-214 mimics組表達上調(diào)41倍(P<0.01);轉(zhuǎn)染2 d及轉(zhuǎn)染3 d,miR-214的轉(zhuǎn)染效果逐漸弱化(P<0.05)(圖2)。2.2.2 成骨誘導(dǎo)后miR-214的表達
miR-214 mimics組,成骨相關(guān)基因ALP、OSN及RUNX-2的mRNA表達均低于正常DFCs組,但僅ALP在兩組的差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),而miR-214inhibitor組成骨相關(guān)基因OSN及RUNX-2、ALP的mRNA表達均高于DFCs組,且差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)(圖4)。圖4 轉(zhuǎn)染mi R-214 mimics及mi R-214 inhibitor并成骨誘導(dǎo)7 d ALP、OSN、RUNX-2 m RNA表達情況
【參考文獻】:
期刊論文
[1]miR對骨質(zhì)疏松骨代謝信號通路影響的研究進展[J]. 宋敏,鞏彥龍,劉濤,董萬濤,李清林,孫定平,周靈通. 中國骨質(zhì)疏松雜志. 2016(09)
[2]雙向差速法純化大鼠牙囊細胞[J]. 王麗萍,李伯琦,鐵曉敏,王琪,劉奕杉. 口腔疾病防治. 2016(03)
[3]中國25392名兒童與青少年錯畸形患病率的調(diào)查[J]. 傅民魁,張丁,王邦康,鄧燕,王佛漢,葉湘玉. 中華口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2002(05)
本文編號:3315632
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