目的檢測成纖維細(xì)胞生長因子受體樣蛋白1（FGFRL1）在口腔鱗狀細(xì)胞癌（OSCC）中的表達(dá)情況,并探究其在OSCC細(xì)胞增殖和遷移中的作用。方法利用Western blot檢測FGFRL1蛋白在OSCC組織、癌旁正常組織、OSCC細(xì)胞株及正常上皮細(xì)胞中的表達(dá);通過FGFRL1小干擾RNA（siRNA）干擾HN4細(xì)胞,影響FGFRL1蛋白的表達(dá),利用CCK-8及Ki67實(shí)驗(yàn)檢測FGFRL1對腫瘤細(xì)胞增殖能力的影響;細(xì)胞劃痕及Transwell實(shí)驗(yàn)檢測FGFRL1對腫瘤細(xì)胞遷移能力的影響;利用Western blot檢測其對上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）相關(guān)指標(biāo)蛋白的影響。結(jié)果 FGFRL1蛋白在OSCC組織中的表達(dá)量高于癌旁正常組織（t=2.820,P=0.047 8）;FGFRL1蛋白在OSCC細(xì)胞系中的表達(dá)量高于在HOK細(xì)胞中的表達(dá)量。實(shí)時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（qRT-PCR）結(jié)果顯示,FGFRL1 RNA在HOK細(xì)胞中的表達(dá)量低于在OSCC細(xì)胞系中的表達(dá)量。將FGFRL1 siRNA轉(zhuǎn)染的HN4細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)組,NC siRNA處理的HN4細(xì)胞作為對照組。Ki67免疫熒光試驗(yàn)結(jié)果顯示,實(shí)驗(yàn)組... 

【文章來源】：華西口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2020,38(05)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：8 頁

【部分圖文】：

蛋白質(zhì)印跡法檢測FGFRL1的表達(dá)

FGFRL1蛋白在OSCC細(xì)胞系中的表達(dá)量高于在HOK細(xì)胞中的表達(dá)量（圖1）。q RT-PCR結(jié)果顯示，F(xiàn)GFRL1 RNA在HOK細(xì)胞中的表達(dá)量（1.000±0.260 3）低于在OSCC細(xì)胞系中的表達(dá)量[其中HN4細(xì)胞中的表達(dá)量（7.938±0.890 9)(P=0.001 7),CAl27細(xì)胞中的表達(dá)量（7.346±0.531 6)(P=0.000 4),KB細(xì)胞中的表達(dá)量（4.849±0.496 5)(P=0.002 4),SCC9細(xì)胞中的表達(dá)量（7.272±0.387 0)(P=0.000 8)],HOK與各組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。免疫熒光顯示FGFRL1蛋白在HN4細(xì)胞的細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)中均有表達(dá)（圖2）。2.3 經(jīng)FGFRL1 si RNA處理后，F(xiàn)GFRL1蛋白在HN4?細(xì)胞中的表達(dá)情況

將FGFRL1 si RNA轉(zhuǎn)染的HN4細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)組，將NC si RNA處理的HN4細(xì)胞作為對照組。Ki67免疫熒光試驗(yàn)檢測細(xì)胞增殖活力，48 h時，實(shí)驗(yàn)組和對照組細(xì)胞增殖活力分別為56.86±1.629、58.52±1.473,2組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=0.756,P=0.478 1);72 h時，實(shí)驗(yàn)組和對照組細(xì)胞增殖活力分別為36.32±1.250、39.82±3.097,2組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=1.050,P=0.334 2）（圖4）。CCK-8實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞增殖活力，24 h時，實(shí)驗(yàn)組和對照組細(xì)胞增殖活力分別為1.071±0.022 8、1.034±0.007 4,2組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=1.525,P=0.165 7);48 h時，實(shí)驗(yàn)組和對照組細(xì)胞增殖活力分別為1.642±0.027 4、1.593±0.063 6,2組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=0.702,P=0.502 6);72 h時，實(shí)驗(yàn)組和對照組細(xì)胞增殖活力分別為1.818±0.056 7、1.767±0.046 3,2組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=0.688,P=0.510 7）。圖4 轉(zhuǎn)染后72 h,2組細(xì)胞Ki67免疫熒光檢測結(jié)果熒光顯微鏡×100


本文編號：3285679