本文關(guān)鍵詞：IL-17對破骨細胞MMP-9表達水平的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:檢測白介素-17(Interleukin-17,IL-17)對破骨細胞細胞基質(zhì)金屬蛋白酶-9(Matrix metalloproteinase-9,MMP-9)表達水平的影響,為研究IL-17在正畸力致牙根吸收過程中的作用提供參考。方法:對小鼠單核/巨噬系細胞RAW264.7進行破骨細胞誘導(dǎo),并通過抗酒石酸酸性磷酸酶(Tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)染色鑒定破骨細胞誘導(dǎo)成功。本實驗分為實驗組和對照組,實驗組在培養(yǎng)液中加入梯度濃度0.1、1.0、10和100 ng/m L的IL-17,依次設(shè)為a組、b組、c組和d組,對照組不加IL-17。采用酶聯(lián)免疫吸附測定(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法檢測破骨細胞誘導(dǎo)第3 d、4 d和5 d時培養(yǎng)液中MMP-9蛋白的表達水平,采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈式反應(yīng)(Reverse-Transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)法檢測破骨細胞誘導(dǎo)第3 d、4 d和5 d時培養(yǎng)液中MMP-9m RNA的表達水平,并對檢測結(jié)果進行統(tǒng)計學(xué)分析。結(jié)果:1、破骨細胞TRAP染色:RAW264.7細胞誘導(dǎo)培養(yǎng)3~5 d后,可見TRAP染色陽性細胞,體積大,多核(核≥3個),細胞核呈紫藍色,胞漿中抗酒石酸酸性磷酸酶活性部位呈紫紅色顆粒。2、ELISA檢測:在破骨細胞誘導(dǎo)第3 d時,與對照組比較,d組MMP-9的蛋白表達水平升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);在破骨細胞誘導(dǎo)第4 d和第5 d時,與對照組比較,b組、c組和d組MMP-9的蛋白表達水平升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。c組的MMP-9蛋白表達水平均高于b組,d組的MMP-9蛋白表達水平均高于c組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。3、RT-PCR檢測:在破骨細胞誘導(dǎo)第3 d、4 d和5 d時,與對照組比較,a組、b組、c組和d組的MMP-9 m RNA表達水平均升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。同一時間下的各實驗組間比較均有統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。各組在破骨細胞誘導(dǎo)第5 d時的MMP-9 m RNA表達水平均高于第3 d和第4 d,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:IL-17可以促進破骨細胞MMP-9表達,且促進作用隨著IL-17濃度的增加而增強。提示IL-17對破骨細胞的調(diào)控作用除直接促進破骨細胞的分化和作為核因子κB受體活化因子配體(Receptor activator of nuclear factor-κB ligand,RANKL)的誘導(dǎo)劑以外,還可能通過促進MMP-9表達,進而影響破骨細胞的遷移和增強其降解骨基質(zhì)的能力來實現(xiàn)。
【關(guān)鍵詞】：白介素-17 基質(zhì)金屬蛋白酶-9 RAW264.7
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R783.5
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-11
• 中英文對照表11-12
• 第1章 緒論12-18
• 1.1 研究背景12-17
• 1.1.1 正畸致牙根吸收的研究進展12-14
• 1.1.2 IL-17與正畸炎性根吸收的相關(guān)性14-15
• 1.1.3 MMP-9 與正畸炎性根吸收的相關(guān)性15-17
• 1.2 立題依據(jù)及研究目的17-18
• 第2章 實驗材料與方法18-28
• 2.1 實驗材料18-19
• 2.1.1 主要材料和試劑18-19
• 2.1.2 主要儀器及設(shè)備19
• 2.2 實驗方法19-28
• 2.2.1 RAW264.7 細胞的培養(yǎng)方法19-21
• 2.2.2 破骨細胞的誘導(dǎo)21
• 2.2.3 破骨細胞TRAP染色21-22
• 2.2.4 ELISA法檢測MMP-9 蛋白的表達水平22-24
• 2.2.5 RT-PCR法檢測MMP-9 mRNA的表達水平24-27
• 2.2.6 統(tǒng)計學(xué)分析27-28
• 第3章 實驗結(jié)果28-33
• 3.1 破骨細胞TRAP染色28
• 3.2 ELISA檢測MMP-9 蛋白的表達水平28-30
• 3.3 RT-PCR檢測MMP-9 mRNA的表達水平30-33
• 第4章 討論33-41
• 4.1 實驗材料及方法的選擇33-35
• 4.1.1 小鼠單核/巨噬系細胞RAW264.733
• 4.1.2 破骨細胞的誘導(dǎo)33-34
• 4.1.3 破骨細胞MMP-9 蛋白和mRNA表達水平的測定時間34-35
• 4.2 實驗結(jié)果分析35-38
• 4.2.1 IL-17對破骨細胞MMP-9 蛋白和mRNA表達水平的影響35-37
• 4.2.2 破骨細胞MMP-9 mRNA和蛋白表達的差異性37-38
• 4.3 IL-17在正畸牙根吸收過程中的可能作用機制38-40
• 4.4 總結(jié)40-41
• 第5章 結(jié)論41-42
• 參考文獻42-51
• 作者簡介及在讀期間成果51-52
• 致謝52-53

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 仝錫帥;顧建紅;王東;陳陽;卞建春;劉宗平;;Ca~(2+)信號對1α,25-(OH)_2D_3調(diào)控破骨細胞形成及骨吸收活性的影響[J];營養(yǎng)學(xué)報;2015年05期

2 付應(yīng)霄;顧建紅;王怡;袁燕;劉學(xué)忠;卞建春;劉宗平;;RAW264.7細胞分化為破骨細胞的凋亡觀察[J];揚州大學(xué)學(xué)報(農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版);2015年01期

3 范瑞賢;李曉智;;白細胞介素-17與正畸牙根吸收相關(guān)性研究進展[J];現(xiàn)代口腔醫(yī)學(xué)雜志;2013年03期

4 董強;夏茜;馬洪;王永;;維生素D_3聯(lián)合地塞米松誘導(dǎo)大鼠破骨細胞的體外培養(yǎng)[J];貴陽醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2012年05期

5 劉鑫;向?qū)W熔;范小平;楊光玉;李亞奇;;人牙髓中基質(zhì)金屬蛋白酶-9受正畸力作用影響的初步分析[J];重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2009年08期

6 黃曉斌;孫元明;李雨民;楊福軍;;破骨細胞分化成熟因子及其信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路[J];中國骨質(zhì)疏松雜志;2007年11期

7 莊麗;白玉興;;基質(zhì)金屬蛋白酶在正畸源性牙根吸收中的作用[J];北京口腔醫(yī)學(xué);2007年05期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 張yN;牙齦卟啉單胞菌脂多糖對成骨細胞—破骨細胞間EphB4-ephrinB2雙向傳導(dǎo)信號的影響[D];吉林大學(xué);2013年

2 韓光紅;不同正畸力值對牙髓活力、Fos和MMP-9蛋白表達變化作用的實驗研究[D];吉林大學(xué);2012年

3 張凡;白細胞介素17促進成骨細胞誘導(dǎo)破骨樣細胞分化的作用和機制[D];山東大學(xué);2010年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 羅俊;細胞因子IL-17A在牙根吸收過程中表達的實驗研究[D];南昌大學(xué);2012年

2 張錦蘋;正畸力對齦溝液中白介素-17表達影響的研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2011年

  本文關(guān)鍵詞：IL-17對破骨細胞MMP-9表達水平的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：328513