目的用攜帶人血小板源性生長(zhǎng)因子-B （platelet-derived growth factor-B, PDGF-B）基因的真核表達(dá)質(zhì)粒EX-A0380-M03轉(zhuǎn)染Beagle犬牙齦成纖維細(xì)胞,復(fù)合脫細(xì)胞真皮基質(zhì)（acellular dermal matrix, ADM）體外構(gòu)建組織工程化復(fù)合物,移植修復(fù)犬慢性Ⅱ。根分叉病變,探討hPDGF-B基因修飾的牙齦成纖維細(xì)胞在牙周組織再生中的作用,為基因治療與組織工程聯(lián)合應(yīng)用于牙周組織缺損再生治療奠定基礎(chǔ)。方法1.借助改良組織塊法+半消化法分離培養(yǎng)Beagle犬牙齦成纖維細(xì)胞,手術(shù)、免疫細(xì)胞化學(xué)以及堿性磷酸酶法確定細(xì)胞來源;2.觀察DMEM、RPMI1640兩種培養(yǎng)液對(duì)Beagle犬牙齦成纖維細(xì)胞體外生物學(xué)活性的影響;3.轉(zhuǎn)化、擴(kuò)增、鑒定攜帶hPDGF-B基因的質(zhì)粒EX-A0380-M03,并利用脂質(zhì)體將其轉(zhuǎn)入Beagle犬牙齦成纖維細(xì)胞;RT-PCR、免疫細(xì)胞化學(xué)染色、ELISA以及Western Blot檢測(cè)目的基因的轉(zhuǎn)錄和表達(dá)。4.體外基因轉(zhuǎn)染后,觀察細(xì)胞形態(tài)變化,MTT及流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞增殖和凋亡的情況。Realtime PCR法... 

【文章來源】：福建醫(yī)科大學(xué)福建省

【文章頁數(shù)】：119 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

刮治及用藥后Beagle犬牙周組織狀況

邊緣銳利，大量上皮細(xì)胞游出，占據(jù)組上皮細(xì)胞成鵝卵石樣排列（×100）角蛋白免疫組織化學(xué)染色染色陽性，胞漿著棕色；角蛋白染色陰性，胞染色陽性，胞漿內(nèi)著棕色（×200）；B：角蛋白染

A：DMEM 組（×200）；B：RMPI 1640 組（×200）圖 2-1 兩種培養(yǎng)液培養(yǎng) Beagle 犬牙齦成纖維細(xì)胞鏡下的形態(tài)3. MTT 法檢測(cè)兩種培養(yǎng)液培養(yǎng)下細(xì)胞的增殖曲線。MTT法測(cè)量增殖曲線00.10.20.30.40.50.60.71 2 3 4 5 6 7 8天D值ODMEMRPMI1640

【參考文獻(xiàn)】：
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博士論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：3266986