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miR-218-5p在人牙周膜干細(xì)胞成骨分化早期的功能和機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間:2021-06-28 06:45
  研究背景人牙周膜干細(xì)胞(human periodontal stem cells,hPDLSCs)來(lái)源于牙周膜,屬于間充質(zhì)來(lái)源的成體干細(xì)胞,其具有分化為組織中特定的功能相關(guān)性細(xì)胞的多向分化能力和在生命體內(nèi)能夠增殖并形成組織從而維持自身的數(shù)量,在體外可以克隆性生長(zhǎng)的自我更新能力。當(dāng)牙周損傷導(dǎo)致牙槽骨缺損后,具有成骨潛能的hPDLSCs遷移至缺損區(qū)并分化為成骨細(xì)胞,從而修復(fù)牙槽骨的缺損。hPDLSCs的成骨潛能在牙周組織的自我更新以及牙周病變組織的修復(fù)與再生過(guò)程中發(fā)揮了重要作用,但目前仍未能夠具體闡明hPDLSCs的成骨分化機(jī)制,有待進(jìn)一步的探索。MicroRNA(miRNA,微小RNA)是一類內(nèi)源性非編碼蛋白質(zhì)的微小RNA,廣泛存在于自然界多種真核生物體內(nèi),可通過(guò)降解靶基因、抑制靶基因翻譯或兩種方式結(jié)合的作用方式發(fā)揮抑制mRNA表達(dá)的功能。目前已有研究表明,miRNA對(duì)干細(xì)胞的未分化性及自我更新能力的維持有重要意義。同時(shí),已有研究發(fā)現(xiàn),miRNA具有調(diào)控hPDLSCs成骨分化的功能。在成骨分化過(guò)程中,特定基因嚴(yán)格按照特定的順序激活與關(guān)閉,控制著成骨分化的不同階段。而成骨分化的早期將決定未... 

【文章來(lái)源】:南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁(yè)數(shù)】:83 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

miR-218-5p在人牙周膜干細(xì)胞成骨分化早期的功能和機(jī)制研究


圖1-1人牙周膜干細(xì)胞生物學(xué)特性測(cè)定??A:B:?80%hPDLSCsC:

表面標(biāo)記物,流式細(xì)胞儀檢測(cè),細(xì)胞生長(zhǎng),長(zhǎng)趨勢(shì)


培養(yǎng)至5?d前生長(zhǎng)較緩慢,自5?d至9?d細(xì)胞生長(zhǎng)較快,進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,9?d后生??長(zhǎng)趨勢(shì)減緩,細(xì)胞生長(zhǎng)曲線近似倒“S”形,說(shuō)明細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好,符合細(xì)胞??生長(zhǎng)周期規(guī)律。如圖1-2。??^?2.5-??〇?2.0-?//??1-??c?1-0-?y??■S??〇?0.5-??<?^?n??〇?〇■?I?i?t?t?I?i?^?.k??0?123456789?10?11?12??Time(Days)??圖l-3?CCK8法檢測(cè)人PDLSCs生長(zhǎng)曲線??Fig.?I?-3?hPDLSCs?growth?curve?was?assesed?by?CCK8?assay.??14??

序列,過(guò)表達(dá),測(cè)序,慢病毒


2.結(jié)果??2.1?rniR-218-5p過(guò)表達(dá)及抑制表達(dá)慢病毒的構(gòu)建??2.1.1?miR-218-5P過(guò)表達(dá)慢病毒陽(yáng)性克隆的測(cè)序結(jié)果??測(cè)序圖的對(duì)應(yīng)序列如圖:??TTTTTGGCTTTTTTGTTAGACGAAGCT?丁?GGGCTGCAGGTCGACTCTAGAGGATCCCCG??GGTACCGGGTTTCCAGAACGTCTGTAGCTTTTCTCCTCCTTCCCTCCATTTTCCTCTTG??GTCTTACCTTTGGCCTAGTGGTTGGTGTAGTGATAATGTAGCGAGATTTTCTGTTGTGCT??TGATCTAACCATGTGGTTGCGAGGTATGAGTAAAACATGGTTCCGTCAAGCACCATGG??AACGTCACGCAGCTTTCTACAGCATGACAAGCTGCTGAGGCTTAAATCAGGATTTTCC??TGTCTCTTTCTACAAAATCAAAATGAAAAAAGAGGGCTTTTTAGGCATCTCCGAGCTA??GCCTGTGGAATGTGTGTCAGTTAGGGTGTGGAAAGTCCCCAGGCTCCCCAGCAGGCA??GAAGTATGCAAAGCATGCATCTCAATTAGTCAGCAACCAGGTGTGGAAAGTCCCCAGG??CTCCCCAGCAGGCA??

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]miRNA-143靶向MACC1抑制宮頸癌細(xì)胞侵襲[J]. 許常娟,鄧丹玲,丁彥青,廖雯婷.  中國(guó)腫瘤臨床. 2015(18)
[2]牙源性干細(xì)胞的研究進(jìn)展[J]. 張琳琳,安瑩,陳發(fā)明,金巖.  實(shí)用口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2015(03)
[3]人牙周膜干細(xì)胞的分離培養(yǎng)及體外誘導(dǎo)分化研究[J]. 徐斌,徐婕,劉宏偉.  口腔醫(yī)學(xué)研究. 2011(08)
[4]改良法分離培養(yǎng)人牙周膜干細(xì)胞[J]. 申濤,;劬,簡(jiǎn)從相,楊彥春,周繼祥.  華西口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2011(01)
[5]人牙周膜細(xì)胞群多向分化潛能的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 劉娟,趙紅宇,軒東英,謝寶儀,章錦才.  華西口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2010(02)

博士論文
[1]MiR-503調(diào)控破骨細(xì)胞分化及其在絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥中作用機(jī)制[D]. 謝亙青.中南大學(xué) 2013



本文編號(hào):3253831

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