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miR-218-5p在人牙周膜干細胞成骨分化早期的功能和機制研究

發(fā)布時間:2021-06-28 06:45
  研究背景人牙周膜干細胞(human periodontal stem cells,hPDLSCs)來源于牙周膜,屬于間充質(zhì)來源的成體干細胞,其具有分化為組織中特定的功能相關性細胞的多向分化能力和在生命體內(nèi)能夠增殖并形成組織從而維持自身的數(shù)量,在體外可以克隆性生長的自我更新能力。當牙周損傷導致牙槽骨缺損后,具有成骨潛能的hPDLSCs遷移至缺損區(qū)并分化為成骨細胞,從而修復牙槽骨的缺損。hPDLSCs的成骨潛能在牙周組織的自我更新以及牙周病變組織的修復與再生過程中發(fā)揮了重要作用,但目前仍未能夠具體闡明hPDLSCs的成骨分化機制,有待進一步的探索。MicroRNA(miRNA,微小RNA)是一類內(nèi)源性非編碼蛋白質(zhì)的微小RNA,廣泛存在于自然界多種真核生物體內(nèi),可通過降解靶基因、抑制靶基因翻譯或兩種方式結(jié)合的作用方式發(fā)揮抑制mRNA表達的功能。目前已有研究表明,miRNA對干細胞的未分化性及自我更新能力的維持有重要意義。同時,已有研究發(fā)現(xiàn),miRNA具有調(diào)控hPDLSCs成骨分化的功能。在成骨分化過程中,特定基因嚴格按照特定的順序激活與關閉,控制著成骨分化的不同階段。而成骨分化的早期將決定未... 

【文章來源】:南方醫(yī)科大學廣東省

【文章頁數(shù)】:83 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

miR-218-5p在人牙周膜干細胞成骨分化早期的功能和機制研究


圖1-1人牙周膜干細胞生物學特性測定??A:B:?80%hPDLSCsC:

表面標記物,流式細胞儀檢測,細胞生長,長趨勢


培養(yǎng)至5?d前生長較緩慢,自5?d至9?d細胞生長較快,進入對數(shù)生長期,9?d后生??長趨勢減緩,細胞生長曲線近似倒“S”形,說明細胞生長狀態(tài)良好,符合細胞??生長周期規(guī)律。如圖1-2。??^?2.5-??〇?2.0-?//??1-??c?1-0-?y??■S??〇?0.5-??<?^?n??〇?〇■?I?i?t?t?I?i?^?.k??0?123456789?10?11?12??Time(Days)??圖l-3?CCK8法檢測人PDLSCs生長曲線??Fig.?I?-3?hPDLSCs?growth?curve?was?assesed?by?CCK8?assay.??14??

序列,過表達,測序,慢病毒


2.結(jié)果??2.1?rniR-218-5p過表達及抑制表達慢病毒的構建??2.1.1?miR-218-5P過表達慢病毒陽性克隆的測序結(jié)果??測序圖的對應序列如圖:??TTTTTGGCTTTTTTGTTAGACGAAGCT?丁?GGGCTGCAGGTCGACTCTAGAGGATCCCCG??GGTACCGGGTTTCCAGAACGTCTGTAGCTTTTCTCCTCCTTCCCTCCATTTTCCTCTTG??GTCTTACCTTTGGCCTAGTGGTTGGTGTAGTGATAATGTAGCGAGATTTTCTGTTGTGCT??TGATCTAACCATGTGGTTGCGAGGTATGAGTAAAACATGGTTCCGTCAAGCACCATGG??AACGTCACGCAGCTTTCTACAGCATGACAAGCTGCTGAGGCTTAAATCAGGATTTTCC??TGTCTCTTTCTACAAAATCAAAATGAAAAAAGAGGGCTTTTTAGGCATCTCCGAGCTA??GCCTGTGGAATGTGTGTCAGTTAGGGTGTGGAAAGTCCCCAGGCTCCCCAGCAGGCA??GAAGTATGCAAAGCATGCATCTCAATTAGTCAGCAACCAGGTGTGGAAAGTCCCCAGG??CTCCCCAGCAGGCA??

【參考文獻】:
期刊論文
[1]miRNA-143靶向MACC1抑制宮頸癌細胞侵襲[J]. 許常娟,鄧丹玲,丁彥青,廖雯婷.  中國腫瘤臨床. 2015(18)
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[3]人牙周膜干細胞的分離培養(yǎng)及體外誘導分化研究[J]. 徐斌,徐婕,劉宏偉.  口腔醫(yī)學研究. 2011(08)
[4]改良法分離培養(yǎng)人牙周膜干細胞[J]. 申濤,;劬,簡從相,楊彥春,周繼祥.  華西口腔醫(yī)學雜志. 2011(01)
[5]人牙周膜細胞群多向分化潛能的實驗研究[J]. 劉娟,趙紅宇,軒東英,謝寶儀,章錦才.  華西口腔醫(yī)學雜志. 2010(02)

博士論文
[1]MiR-503調(diào)控破骨細胞分化及其在絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥中作用機制[D]. 謝亙青.中南大學 2013



本文編號:3253831

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