目的研究BMP2和BMP4對小鼠ALC（ameloblast-lineage cell）內牙釉質基質蛋白酶中基質金屬蛋白酶20（matrix metalloproteinase 20,MMP20）和激肽釋放酶4（kallikrein 4,KLK4）表達的調控作用。方法在ALC細胞系中加入BMP2和BMP4重組蛋白,利用免疫印跡實驗和熒光定量PCR檢測BMP通路信號分子和牙釉質基質蛋白酶的表達變化。同期,在另一組ALC細胞系中加入BMP通路抑制劑（Dorsomorphin）,檢測牙釉質基質蛋白酶的表達情況。結果在BMP2和BMP4蛋白的作用下,ALC細胞中BMP通路的經典通路（Smad1/5/8）和非經典通路（p38）的表達顯著增強,同時MMP20和KLK4的基因表達也有明顯上調。同期添加Dorsomorphin的ALC細胞中BMP通路的經典通路的表達明顯下降,而非經典通路的表達變化不大,同時MMP20和KLK4的基因表達也有明顯的下調趨勢。在另一組實驗中添加BMP抑制劑的處理組則表現(xiàn)出MMP20和KLK4蛋白表達的下調,而使用BMP2和BMP4對抑制劑組進行處理的挽救組則表現(xiàn)出MMP2... 

【文章來源】：口腔醫(yī)學. 2020,40(09)

【文章頁數】：5 頁

【部分圖文】：

Western blot檢測BMP2和BMP4誘導的ALC中 Smad1/5/8和p38的磷酸化變化

圖1 Western blot檢測BMP2和BMP4誘導的ALC中 Smad1/5/8和p38的磷酸化變化2.2 牙釉質基質蛋白酶MMP20和KLK4的變化

Real-time PCR的結果顯示,與對照組相比,BMP蛋白刺激12 h后,MMP20和KLK4的基因表達明顯升高(P<0.01,圖3);與對照組相比,抑制劑處理12 h后,Real-time PCR的結果顯示MMP20和KLK4的基因表達明顯下降,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.01,圖3)。該結果表明BMP2和BMP4重組蛋白能夠正向調控MMP20、KLK4基因的表達,抑制劑Dorsomorphin可以負向調控MMP20、KLK4基因的表達,據此我們可以認為:BMP通路,尤其是Smad依賴性通路對MMP20、KLK4基因的表達具有至關重要的作用。2.3 BMP蛋白的挽救作用

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Making a tooth:growth factors,transcription factors,and stem cells[J]. Yan Ding ZHANG1,2, Zhi CHEN1, Yi Qiang SONG3, Chao LIU2, Yi Ping CHEN2,3,* 1College of Stomatology, Wuhan University, Wuhan 430072, China 2College of Bioengineering, Fujian Normal University, Fuzhou 350007, China 3Division of Developmental Biology, Department of Cell and Molecular Biology, Tulane University, New Orleans, LA 70118, USA.  Cell Research. 2005(05)



本文編號：3238755