目的在我國,癌癥在口腔頜面部惡性腫瘤中更為常見,肉瘤較少見。在癌癥中又以口腔鱗狀細(xì)胞癌（oral squamous cell carcinoma,OSCC）是最多見的,一般占80%以上,其惡性程度較高,區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移常常發(fā)生,晚期發(fā)生的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移嚴(yán)重威脅著人類的健康�，F(xiàn)臨床常規(guī)治療就是腫瘤的放化療加手術(shù)治療,但放療和化療的副作用較為明顯,大范圍的手術(shù)切除可造成組織缺損,而且由于OSCC較容易發(fā)生轉(zhuǎn)移這一特點(diǎn),導(dǎo)致復(fù)發(fā)率居高不下,患者的五年生存率僅為50%左右,所以尋找更加有效的治療方法刻不容緩。近年來,定點(diǎn)分子靶向治療受到越來越多的關(guān)注,并且大量研究已報(bào)道電壓門控鈉離子通道（voltage-gated sodium channels,VGSC）在多種癌癥中高表達(dá),不論是通過特異性藥物阻斷VGSC功能還是特異性降低其表達(dá)都可有效降低腫瘤的侵襲和增殖,這提示VGSC可能是癌癥治療的新靶點(diǎn)。在對不同亞型的VGSC的研究中發(fā)現(xiàn),不同癌癥中發(fā)揮主要作用的VGSC亞型各不相同,課題組前期研究發(fā)現(xiàn),Nav1.5亞型與OSCC的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān),表明它可能成為治療OSCC的潛在靶點(diǎn)。但對其更深層次的分子... 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

免疫組化法檢測Nav1.5蛋白的表達(dá)（×100）

安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文4.2 HSC-3 細(xì)胞株中 Nav1.5 的表達(dá)定位為了確定在選定的細(xì)胞系 HSC-3 中 Nav1.5 的表達(dá)，使用免疫熒光技術(shù)通過激光共聚焦顯微鏡觀察細(xì)胞中的熒光染色。 高倍鏡下清楚觀察到在細(xì)胞核外可見熒光標(biāo)記的 Nav1.5 呈紅色均勻分布， DAPI 把胞核染成藍(lán)色，大致呈橢圓形，核質(zhì)比較大，表明 HSC-3 細(xì)胞株中 Nav1.5 呈陽性表達(dá)，且主要定位在細(xì)胞核外，見圖 2。

圖 3 轉(zhuǎn)染效率檢測A：轉(zhuǎn)染 FAM 標(biāo)記 siRNA 明場鏡下；B：明場同一視野下熒光鏡下（×200）Figure 3 Transfection efficiency testA: Transfection of FAM-labeled siRNA under bright field mirror; B: Bright field underthe same field of view under fluoroscopy (×200)4.3.2 siRNA 沉默效率的檢測基因沉默是否成功，最后還是要看目的基因所編碼產(chǎn)物是否表達(dá)下降，因此，使用 qRT- PCR 和 Western 印跡分別從 mRNA 和蛋白質(zhì)水平檢測相應(yīng)產(chǎn)物的表達(dá)水平。 從而來鑒定 siRNA 的沉默效率，進(jìn)而篩選出沉默效率最佳的 siRNA 片段用于進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)研究。 qRT- PCR 結(jié)果顯示，與未轉(zhuǎn)染組（CON 組）相比，用 3 種

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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