目的：研究7-脫氫膽固醇還原酶基因（Dhcr7）在小鼠胚胎腭突發(fā)育中的表達(dá)及表達(dá)量變化,Dhcr7表達(dá)下調(diào)對腭突發(fā)育融合的影響,及Dhcr7在腭突發(fā)育中參與的音猬因子（Shh）信號通路的研究。方法：1：取E13.5、E14.5和E15.5天的小鼠胚胎的腭突,免疫組織化學(xué)觀察Dhcr7蛋白在腭突中的表達(dá)定位,逆轉(zhuǎn)錄式聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)法檢測Dhcr7mRNA的表達(dá)變化,Western blot法檢測Dhcr7蛋白的表達(dá)變化。2：構(gòu)建抑制Dhcr7基因表達(dá)的siRNA重組腺病毒載體。取E13.5天的腭突進(jìn)行體外培養(yǎng),隨機(jī)分為正常對照組、陰性對照腺病毒組和siDhcr7-腺病毒組,培養(yǎng)48h后分別固定和提取總RNA、總蛋白,進(jìn)行組織染色、掃描電鏡和RT-PCR、WB分析,siDhcr7-腺病毒組于48h后更換培養(yǎng)基隨機(jī)分為四組分別添加Ong/ml、200ng/ml、400ng/ml和600ng/ml濃度的膽固醇,繼續(xù)培養(yǎng)72h后固定,SEM和組織染色觀察融合情況。3：取E13.5天腭突進(jìn)行培養(yǎng),分為空白對照組、siDhcr7-腺病毒組和Dhcr7抑制后加膽固醇組,前兩組于培養(yǎng)48后更換不含膽固醇... 

【文章來源】：青島大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
引言
第一部分 Dhcr7在小鼠胚胎腭突發(fā)育中的表達(dá)及表達(dá)量變化
    1、目的
    2、材料和方法
    3、結(jié)果
    4、討論
第二部分 腺病毒載體介導(dǎo)的RNA干擾抑制體外培養(yǎng)腭突Dhcr7表達(dá)的研究
    1、目的
    2、材料和方法
    3、結(jié)果
    4、討論
第三部分 體外腭突培養(yǎng)Dhcr7沉默對Shh信號通路影響的研究
    1、目的
    2、材料和方法
    3、結(jié)果
    4、討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    綜述參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
附錄
致謝



本文編號：3225655