背景和目的牙周炎是發(fā)生在牙周組織的感染性疾病,菌斑微生物為牙周炎發(fā)生的始動因素,宿主免疫反應(yīng)為牙周組織破壞的主要因素。巨噬細(xì)胞可以分化為促炎狀態(tài)的M1型和抗炎狀態(tài)的M2型,當(dāng)巨噬細(xì)胞被募集到牙周組織中時,其分化狀態(tài)受環(huán)境刺激的影響,在細(xì)菌脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）和/或干擾素-γ（interferon,IFN-γ）誘導(dǎo)下,巨噬細(xì)胞分化為促炎狀態(tài)的M1型,促進(jìn)宿主炎性反應(yīng)以抵抗細(xì)菌和病毒,并分泌促炎因子,最終導(dǎo)致牙周組織破壞;相反,IL-4和/或IL-13誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞分化為抗炎狀態(tài)的M2型,發(fā)揮抗炎和促進(jìn)組織愈合的功能,并分泌抗炎因子,促進(jìn)組織的修復(fù)愈合。多項(xiàng)研究證實(shí),顆粒蛋白酶前體（progranulin,PGRN）為TNF受體競爭性拮抗劑,在免疫調(diào)節(jié)和抗炎中發(fā)揮重要作用。我們先前研究證實(shí)發(fā)現(xiàn)牙周炎患者齦溝液中PGRN較正常齦溝液含量升高;體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)PGRN促進(jìn)牙周膜干細(xì)胞的成骨分化;重組PGRN可減輕大鼠實(shí)驗(yàn)性牙周炎炎癥反應(yīng)及牙槽骨吸收,促進(jìn)牙周骨缺損的再生。但其在巨噬細(xì)胞極化過程中的調(diào)控作用及其機(jī)制尚不清楚。本研究旨在探討PGRN在巨噬細(xì)胞M1向極化中... 

【文章來源】：山東大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１．ＲＡＷ２６４．７巨噻細(xì)胞培養(yǎng)

?山東大學(xué)碩士學(xué)位論文???ｑＲＴ－ＰＣＲ技術(shù)檢測ＲＡＷ２６４．７細(xì)胞經(jīng)過含或不含有１００?ｎｇ／ｍｌ?Ｐ．ｇ－ＬＰＳ培養(yǎng)??基誘導(dǎo)２４?ｈ后ＴＮＦ－ａ和ｉＮＯＳ?ｍＲＮＡ的表達(dá)。與對照組相比，１００?ｎｇ／ｍｌ?Ｐ．ｇ－??ＬＰＳ組ＴＮＦ－ａ和ｉＮＯＳｍＲＮＡ表達(dá)顯著增高（圖１－２Ｃ）。??（３）?Ｍｌ型巨噬細(xì)胞高表達(dá)ＴＮＦ－ａ和ｉＮＯＳ蛋白??Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔ技術(shù)檢測ＲＡＷ２６４．７細(xì)胞經(jīng)過含或不含有１００?ｎｇ／ｍｌ?Ｐ．ｇ－ＬＰＳ??培養(yǎng)基誘導(dǎo)２４?ｈ后ＴＮＦ－ａ和ｉＮＯＳ蛋白的表達(dá)。與對照組相比，１００?ｎｇ／ｍｌ?Ｐ．ｇ－??ＬＰＳ組ＴＮＦ－ａ和ｉＮＯＳ蛋白的表達(dá)顯著增高（圖１－２?Ｄ，Ｅ）。??（４）?Ｍｌ型Ｅ噬細(xì)胞ＴＮＦ－ａ分泌增多??ＥＬＩＳＡ技術(shù)檢測ＲＡＷ２６４．７細(xì)胞經(jīng)過含或不含有１００?ｎｇ／ｍｌ?Ｐ．ｇ－ＬＰＳ培養(yǎng)基??誘導(dǎo)２４?ｈ后ＴＮＦ－ｃｔ的分泌。與對照組相比，１００?ｎｇ／ｍｌ?Ｐ．ｇ－ＬＰＳ組ＴＮＦ－ａ的分泌??顯著增高（圖１－２?Ｆ）。??Ａ?Ｂ?Ｃ?ｑ－ＰＣＲ??（Ａ??＜Ｕ??〇?１００１?—｜?ａ，?６〇＇?■?ＮＣ?…??〇?８０．?＂５?２?５〇?ＬＰＳ（１００?ｎｇ／ｍｌ）??Ａ?１?＾?＾?＾?３〇ｌ??Ａ?Ｍ?４〇－??…’一?：—Ｓｉ?：：??ｉ?〇ＵＰ——．＾?ｉ°?＾＿＿??ＮＣ?ＬＰＳ（１００?ｎｇ／ｍｌ）?★?＾?｜?ｙ??／?＾?＃??Ｄ?Ｅ?＾?Ｆ??一?ｋＤａ?Ｓ?ＷＢ?？?ＥＵＳＡ??ｆｌｖ?２８?｜?〇）?？§］??——?ｍ?ｎｃ?ｋ?〇６１?—??ＴＮＦ

胞因子的蛋白水平；酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)檢測巨噬細(xì)胞ＴＮＦ－ａ分泌水平變化。具??體操作步驟同第一部分。??結(jié)果??１、ｒＰＧＲＮ逆轉(zhuǎn)Ｐ．ｇ－ＬＰＳ升高的Ｍｌ表型分子表達(dá)或Ｍ１／Ｍ２比例??（１）流式細(xì)胞術(shù)檢測ＲＡＷ２６４．７細(xì)胞Ｍｌ和Ｍ２表面標(biāo)記物ＣＤ８６和ＣＤ２０６的??表達(dá)，與對照組相比，１００?ｎｇ／ｍｌ?Ｐ．ｇ－ＬＰＳ組Ｍ１／Ｍ２表面標(biāo)ｉｉＺ物ＣＤ８６／ＣＤ２０６比??值顯著開高，在此基礎(chǔ)ｈ加入５，?１０，?２０ｎｇ／ｍｌｒＰＧＲＮＣ，ＣＤ８６／ＣＤ２０６的比值??顯著降低。（圖２－１－１）??Ａ〇１?Ｆ６６?Ａ０２?Ａ０３?ＡＤ４??，Ｇａｔｅ?ＦＩ?？?Ｃ，ａｔ＊?Ｐｉ?－？?Ｏａｔｅ?Ｐｉ?＊？?－＞？ｔｅ?Ｆｌ??＾￣ｎ?＇ＰＨ￣￣￣ｉ?二?１?８Ｔ￣１??確，－?ｉ?４?＾＼］￣＇??？＊ｉ?ｒ?Ｌｉ?－?Ｕ?ｉ?Ｉ－１?Ｕ－?Ｉ?：ｉ?ｌＲ?－？ｉ?－？?Ｕ?ｊ?Ｌ＝ｊ??５?ｎ—?ｗ＜ａ－ｉＴｎ＾?ｆ?？—，－ｉ？丨?＿?Ｈ?ｉ—￣ｎ＿?ｉ＿?”《ｒ，》、＿ｉ?氣?ｒｉＷ－Ｗ＾ｗｎｗ－—－ｎＯ＇ｉＡｗ＇??＾?Ｊ?Ｊ?＾?＾?＾?＾??Ａ？（?Ａ?？?＊Ｐ－ｆ?＊?？ｆＣ?＊??ＮＣ?ＬＰＳ?（１００?ｎｇ／ｍｌ）?ＬＰＳ＋ｒＰＧＲＮ?（５?ｎｇ／ｍｌ）??Ａ〇５?Ａ０６?ＢＯ，?Ｂ０２??Ｏａｌ＊?Ｐ１?＂＿：？＊�。�?Ｐ＊?＂？?Ｏａｌｓ?Ｐ１?＊？?＇？ｎ？?Ｐｉ??ｉｒ?——ｎ?＇ｐ７＂！一ｑ?＝「—ｉ）「—ｊ￣＂１??：５｜?－?－?４?４?Ａ??、?ｊ?＂?ｌｆ?Ｉ?ａ＾ｉ???＾??


本文編號：3220998