發(fā)布時(shí)間：2021-05-31 21:27

　　目的：分離培養(yǎng)人牙周膜內(nèi)Malassez上皮剩余細(xì)胞,探討一種簡(jiǎn)便、原代培養(yǎng)成功率高、可重復(fù)性好的細(xì)胞培養(yǎng)方法,為進(jìn)一步在體外研究Malassez上皮剩余細(xì)胞的生物學(xué)特性及功能提供實(shí)驗(yàn)條件。方法：選取12～25歲青少年因正畸拔除的前磨牙,采用組織塊培養(yǎng)法和酶消化法進(jìn)行牙周膜細(xì)胞原代培養(yǎng)。先使用含血清的DMEM培養(yǎng)液培養(yǎng),當(dāng)細(xì)胞融合達(dá)50%左右時(shí),對(duì)Malassez上皮剩余細(xì)胞進(jìn)行選擇性培養(yǎng),按比例逐漸減少培養(yǎng)液中血清含量,同時(shí)增加細(xì)胞生長(zhǎng)所需的因子,直到完全使用無(wú)血清培養(yǎng)基。采用形態(tài)學(xué)觀察、免疫組化方法鑒定其來(lái)源,并繪制生長(zhǎng)曲線。結(jié)果：（1）分離下的牙周膜,在經(jīng)過(guò)初期含血清培養(yǎng)基的組織塊培養(yǎng)后,5-16天可見組織塊周圍有細(xì)胞爬出,大部分是成纖維細(xì)胞,細(xì)胞形態(tài)呈長(zhǎng)梭形,其間有部分多角形或“鋪路石”樣細(xì)胞,為上皮細(xì)胞,胞漿均勻,輪廓清晰。（2）酶消化法培養(yǎng)的牙周膜細(xì)胞,在12小時(shí)后即有細(xì)胞的貼壁變形,2-3天后大部分細(xì)胞貼壁生長(zhǎng),所得細(xì)胞大部分也是成纖維細(xì)胞,含少量上皮細(xì)胞,成纖維細(xì)胞和上皮細(xì)胞的形態(tài)學(xué)特征與組織塊法培養(yǎng)的相似。（3）經(jīng)過(guò)12-24天牙周膜細(xì)胞原代培養(yǎng),細(xì)胞融合可達(dá)50%左... 

【文章來(lái)源】：新疆醫(yī)科大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū)

【文章頁(yè)數(shù)】：49 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

消化后的細(xì)胞呈懸浮狀，12h后個(gè)別貼壁細(xì)胞開始伸展變形(x100)

48h后大多數(shù)細(xì)胞貼壁變形(xioo}

纖維細(xì)胞呈長(zhǎng)梭形，放射狀排列;ERM細(xì)胞(箭頭所示)呈扁平多角形(xl00)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]三種方法原代培養(yǎng)人牙周膜細(xì)胞[J]. 蔣俊強(qiáng),王忠朝,黎春暉,蔡煒.  中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù). 2010(23)
[2]不同年齡供體人牙周膜細(xì)胞原代培養(yǎng)成功率的比較[J]. 閆嘉晴,林崇韜,孫營(yíng)營(yíng).  吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2010(01)
[3]牙周膜細(xì)胞體外培養(yǎng)技術(shù)的發(fā)展及應(yīng)用[J]. 舒丹,楊四維.  口腔醫(yī)學(xué). 2008(07)
[4]人體口腔粘膜上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)和鑒定[J]. 陳文,李森愷,史宏道,李養(yǎng)群,蔣華,賈文英,祝君梅.  現(xiàn)代口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2005(05)



本文編號(hào)：3209004