本研究的目的在于探討成對(duì)盒基因Pax9的功能,實(shí)驗(yàn)從Pax9的亞細(xì)胞定位入手研究了Pax9表達(dá)改變對(duì)細(xì)胞生物學(xué)行為的影響及可能調(diào)控機(jī)制。 實(shí)驗(yàn)以PCR-重組的方法構(gòu)建了GFP-Pax9融合蛋白真核表達(dá)載體pEGFP-Pax9(GenBank^TM檢索號(hào):DQ022572),重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染不同物種來(lái)源的哺乳動(dòng)物細(xì)胞CHO、Cos7后在核酸水平（RT-PCR）和蛋白質(zhì)水平（Western Blot和免疫組織化學(xué)）檢測(cè)細(xì)胞與亞細(xì)胞水平Pax9的表達(dá),證實(shí)了GFP-Pax9融合蛋白的形成;研究用直接熒光（GFP-Pax9融合蛋白）和間接熒光（熒光標(biāo)記Pax9抗體）兩種方式明確標(biāo)明Pax9在細(xì)胞中的作用位置為細(xì)胞核;以不同物種來(lái)源的細(xì)胞進(jìn)行研究未發(fā)現(xiàn)差異結(jié)果表明Pax9的作用極為保守。 在不表達(dá)Pax9的細(xì)胞系Cos7中瞬時(shí)表達(dá)Pax9,以CellTiter 96^?Aqueous one solution cell prol iferation assay檢測(cè)Pax9—過(guò)性表達(dá)對(duì)細(xì)胞生物學(xué)行為的影響,流式細(xì)胞儀分析了Pax9表達(dá)對(duì)細(xì)胞周期的改變... 

【文章來(lái)源】：武漢大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：151 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
引言
實(shí)驗(yàn)流程
正文
文獻(xiàn)綜述
實(shí)驗(yàn)研究
    實(shí)驗(yàn)一 綠色熒光蛋白-成對(duì)盒基因Pax9融合蛋白真核表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建、表達(dá)及Pax9亞細(xì)胞定位
    實(shí)驗(yàn)二 Pax9瞬時(shí)表達(dá)對(duì)細(xì)胞生物學(xué)行為的影響及信號(hào)路徑探討
    實(shí)驗(yàn)三 綠色熒光蛋白-成對(duì)盒基因Pax9融合蛋白慢病毒質(zhì)粒的構(gòu)建及Pax9穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞的篩選
    實(shí)驗(yàn)四 不同方法表達(dá)Pax9 siRNA及其干擾能力初步比較
附錄
個(gè)人簡(jiǎn)歷
后記


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]2例多數(shù)牙先天缺失患兒及其父母的Pax9基因突變檢測(cè)[J]. 袁林天,文玲英,楊富生,羅亞寧,姚元慶,樊淑梅,劉勇.  牙體牙髓牙周病學(xué)雜志. 2004(03)



本文編號(hào)：3204920