本研究的目的在于探討成對盒基因Pax9的功能,實驗從Pax9的亞細胞定位入手研究了Pax9表達改變對細胞生物學(xué)行為的影響及可能調(diào)控機制。 實驗以PCR-重組的方法構(gòu)建了GFP-Pax9融合蛋白真核表達載體pEGFP-Pax9(GenBank^TM檢索號:DQ022572),重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染不同物種來源的哺乳動物細胞CHO、Cos7后在核酸水平（RT-PCR）和蛋白質(zhì)水平（Western Blot和免疫組織化學(xué)）檢測細胞與亞細胞水平Pax9的表達,證實了GFP-Pax9融合蛋白的形成;研究用直接熒光（GFP-Pax9融合蛋白）和間接熒光（熒光標記Pax9抗體）兩種方式明確標明Pax9在細胞中的作用位置為細胞核;以不同物種來源的細胞進行研究未發(fā)現(xiàn)差異結(jié)果表明Pax9的作用極為保守。 在不表達Pax9的細胞系Cos7中瞬時表達Pax9,以CellTiter 96^?Aqueous one solution cell prol iferation assay檢測Pax9—過性表達對細胞生物學(xué)行為的影響,流式細胞儀分析了Pax9表達對細胞周期的改變... 

【文章來源】：武漢大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：151 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
引言
實驗流程
正文
文獻綜述
實驗研究
    實驗一 綠色熒光蛋白-成對盒基因Pax9融合蛋白真核表達質(zhì)粒的構(gòu)建、表達及Pax9亞細胞定位
    實驗二 Pax9瞬時表達對細胞生物學(xué)行為的影響及信號路徑探討
    實驗三 綠色熒光蛋白-成對盒基因Pax9融合蛋白慢病毒質(zhì)粒的構(gòu)建及Pax9穩(wěn)定表達細胞的篩選
    實驗四 不同方法表達Pax9 siRNA及其干擾能力初步比較
附錄
個人簡歷
后記


【參考文獻】：
期刊論文
[1]2例多數(shù)牙先天缺失患兒及其父母的Pax9基因突變檢測[J]. 袁林天,文玲英,楊富生,羅亞寧,姚元慶,樊淑梅,劉勇.  牙體牙髓牙周病學(xué)雜志. 2004(03)



本文編號：3204920