長鏈非編碼RNA MALAT1在慢性牙周炎中的作用及調(diào)控機(jī)制的研究
發(fā)布時間:2021-05-15 11:49
目的:前期基因芯片結(jié)果發(fā)現(xiàn):長鏈非編碼RNA(long non-coding RNA,lncRNA)肺腺癌轉(zhuǎn)移相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子1(metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript1,MALAT1)在慢性牙周炎炎癥牙齦組織中的表達(dá)與健康牙齦組織相比存在差異,表明其可能在慢性牙周炎的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮一定作用。本研究旨在驗證不同狀態(tài)人牙齦組織中MALAT1的表達(dá)差異;生物信息學(xué)分析MALAT1的靶位點后,探索人牙齦成纖維細(xì)胞(human gingival fibroblasts,HGFs)中MALAT1對炎性細(xì)胞因子的調(diào)節(jié)通路,為闡明慢性牙周炎的發(fā)病機(jī)制和尋求慢性牙周炎的治療新靶點提供依據(jù)。方法:1.患者知情同意后,獲取牙周健康人群及慢性牙周炎患者的牙齦組織,提取總RNA,利用實時熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(real time polymerase chain reaction,real time PCR)檢測不同來源的牙齦組織中MALAT1的表達(dá)水平,分析MALAT1與慢性牙周炎之間的關(guān)系。2.生物信息學(xué)分析發(fā)現(xiàn),小分子RNA(microRNA...
【文章來源】:天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校
【文章頁數(shù)】:88 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
縮略語/符號說明
前言
研究現(xiàn)狀、成果
研究目的、方法
一、MALAT1在不同狀態(tài)牙齦組織中的表達(dá)
1.1 對象和方法
1.1.1 主要設(shè)備和儀器
1.1.2 主要試劑
1.1.3 主要試劑的配制
1.1.4 研究對象和方法
1.2 結(jié)果
1.2.1 納入健康及慢性牙周炎志愿者的一般情況分析
1.2.2 real time PCR檢測MALAT1的表達(dá)水平
1.3 討論
1.4 小結(jié)
二、體外細(xì)胞檢測MALAT1的靶位點和結(jié)合方式
2.1 對象和方法
2.1.1 主要設(shè)備和儀器
2.1.2 主要試劑
2.1.3 主要試劑的配制
2.1.4 研究對象和方法
2.2 結(jié)果
2.2.1 HGFs的培養(yǎng)
2.2.2 RT-PCR檢測MALAT1和miR-20a在細(xì)胞水平的表達(dá)
2.2.3 雙熒光素報告基因?qū)嶒灆z測MALAT1與miR-20a的結(jié)合
2.2.4 雙熒光素報告基因?qū)嶒灆z測miR-20a與TLR4的結(jié)合
2.2.5 MALAT1/mi R-20a/TLR4/Ago2 復(fù)合體的調(diào)控作用
2.3 討論
2.4 小結(jié)
三、P.g LPS或E.coli LPS刺激對人牙齦成纖維細(xì)胞中MALAT1、miR-20a、TLR4及炎性細(xì)胞因子表達(dá)的影響
3.1 對象和方法
3.1.1 主要設(shè)備和儀器
3.1.2 主要試劑
3.1.3 主要試劑的配制
3.1.4 研究對象和方法
3.2 結(jié)果
3.2.1 LPS對HGFs中MALAT1、miR-20a和TLR4表達(dá)水平的影響
3.2.2 LPS對HGFs中炎性細(xì)胞因子m RNA表達(dá)水平的影響
3.3 討論
3.4 小結(jié)
四、HGFs中MALAT1對炎癥細(xì)胞因子表達(dá)的調(diào)節(jié)作用
4.1 對象和方法
4.1.1 主要設(shè)備和儀器
4.1.2 主要實驗試劑
4.1.3 主要試劑的配制
4.1.4 研究對象和方法
4.2 結(jié)果
4.2.1 HGFs中轉(zhuǎn)染試劑的轉(zhuǎn)染效率
4.2.2 HGFs中si-MALAT1、miR-20a mimics及sno-MALAT1的效率
4.2.3 si-MALAT1對HGFs中miR-20a及炎性細(xì)胞因子表達(dá)水平的影響
4.2.4 sno-MALAT1對HGFs中miR-20a及炎性細(xì)胞因子表達(dá)水平的影響
4.2.5 miR-20a mimics對HGFs中MALAT1及炎性細(xì)胞因子表達(dá)水平的影響
4.2.6 LPS刺激下改變MALAT1或miR-20 水平對TLR4表達(dá)水平的影響
4.3 討論
4.4 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說明
綜述 長鏈非編碼RNA MALAT1的研究進(jìn)展
綜述參考文獻(xiàn)
致謝
個人簡歷
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]慢性牙周炎齦溝液中趨化因子白細(xì)胞介素-8水平Meta分析[J]. 馮萍珍,保森竹. 中國實用口腔科雜志. 2017(11)
[2]IL-1β、IL-6、IL-10在慢性牙周炎不同臨床階段的免疫調(diào)節(jié)作用[J]. 莫麗妮,林旭征. 包頭醫(yī)學(xué)院學(xué)報. 2017(10)
[3]Toll樣受體mRNA水平與牙齦炎癥相關(guān)性研究[J]. 宋立婷,劉麗偉,鄧嘉胤,朱東望,蔣少云. 牙體牙髓牙周病學(xué)雜志. 2016(06)
[4]miR-20a對人炎癥牙周膜干細(xì)胞成骨分化能力的影響[J]. 楊倩娟,劉文佳,常文悅,郭曉睿,王紅,陳琦,陸群. 實用口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2016(02)
[5]牙周基礎(chǔ)治療對牙周炎患者齦溝液和血清IL-6、IL-8和PAF水平的影響[J]. 趙靚,曹遠(yuǎn). 實用臨床醫(yī)藥雜志. 2015(19)
[6]牙齦卟啉單胞菌脂多糖對人牙齦成纖維細(xì)胞炎癥刺激作用的研究[J]. 魏叢叢,蔣少云,鄧嘉胤. 天津醫(yī)藥. 2013(05)
[7]Comparison of microRNA profiles of human periodontal diseased and healthy gingival tissues[J]. Yu-feng Xie1, Rong Shu1*, Shao-yun Jiang1, Da-li Liu1, Xiu-li Zhang2 1Department of Periodontology, Shanghai Ninth People’s Hospital Affiliated Shanghai Jiao Tong University School of Medicine, Shanghai 200011, China; 2Shanghai Research Institute of Stomatology, Shanghai Ninth People’s Hospital Affiliated Shanghai Jiao Tong University School of Medicine, Shanghai 200011, China. International Journal of Oral Science. 2011(03)
[8]TNF-α、IL-1β及IL-6與糖尿病及牙周炎之間的關(guān)系[J]. 吳瑩瑩,劉洪臣. 中華老年口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2011(02)
[9]慢性牙周炎治療前后患牙齦溝液中IL-8和TNF-α水平變化比較[J]. 朱治宇,劉國勤. 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2010(11)
[10]非編碼基因MALAT1功能性序列真核表達(dá)載體的構(gòu)建及其在SW620細(xì)胞中的表達(dá)[J]. 楊敏慧,王雙雙,王曉燕,徐川,李祖國. 熱帶醫(yī)學(xué)雜志. 2010(03)
本文編號:3187581
【文章來源】:天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校
【文章頁數(shù)】:88 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
縮略語/符號說明
前言
研究現(xiàn)狀、成果
研究目的、方法
一、MALAT1在不同狀態(tài)牙齦組織中的表達(dá)
1.1 對象和方法
1.1.1 主要設(shè)備和儀器
1.1.2 主要試劑
1.1.3 主要試劑的配制
1.1.4 研究對象和方法
1.2 結(jié)果
1.2.1 納入健康及慢性牙周炎志愿者的一般情況分析
1.2.2 real time PCR檢測MALAT1的表達(dá)水平
1.3 討論
1.4 小結(jié)
二、體外細(xì)胞檢測MALAT1的靶位點和結(jié)合方式
2.1 對象和方法
2.1.1 主要設(shè)備和儀器
2.1.2 主要試劑
2.1.3 主要試劑的配制
2.1.4 研究對象和方法
2.2 結(jié)果
2.2.1 HGFs的培養(yǎng)
2.2.2 RT-PCR檢測MALAT1和miR-20a在細(xì)胞水平的表達(dá)
2.2.3 雙熒光素報告基因?qū)嶒灆z測MALAT1與miR-20a的結(jié)合
2.2.4 雙熒光素報告基因?qū)嶒灆z測miR-20a與TLR4的結(jié)合
2.2.5 MALAT1/mi R-20a/TLR4/Ago2 復(fù)合體的調(diào)控作用
2.3 討論
2.4 小結(jié)
三、P.g LPS或E.coli LPS刺激對人牙齦成纖維細(xì)胞中MALAT1、miR-20a、TLR4及炎性細(xì)胞因子表達(dá)的影響
3.1 對象和方法
3.1.1 主要設(shè)備和儀器
3.1.2 主要試劑
3.1.3 主要試劑的配制
3.1.4 研究對象和方法
3.2 結(jié)果
3.2.1 LPS對HGFs中MALAT1、miR-20a和TLR4表達(dá)水平的影響
3.2.2 LPS對HGFs中炎性細(xì)胞因子m RNA表達(dá)水平的影響
3.3 討論
3.4 小結(jié)
四、HGFs中MALAT1對炎癥細(xì)胞因子表達(dá)的調(diào)節(jié)作用
4.1 對象和方法
4.1.1 主要設(shè)備和儀器
4.1.2 主要實驗試劑
4.1.3 主要試劑的配制
4.1.4 研究對象和方法
4.2 結(jié)果
4.2.1 HGFs中轉(zhuǎn)染試劑的轉(zhuǎn)染效率
4.2.2 HGFs中si-MALAT1、miR-20a mimics及sno-MALAT1的效率
4.2.3 si-MALAT1對HGFs中miR-20a及炎性細(xì)胞因子表達(dá)水平的影響
4.2.4 sno-MALAT1對HGFs中miR-20a及炎性細(xì)胞因子表達(dá)水平的影響
4.2.5 miR-20a mimics對HGFs中MALAT1及炎性細(xì)胞因子表達(dá)水平的影響
4.2.6 LPS刺激下改變MALAT1或miR-20 水平對TLR4表達(dá)水平的影響
4.3 討論
4.4 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說明
綜述 長鏈非編碼RNA MALAT1的研究進(jìn)展
綜述參考文獻(xiàn)
致謝
個人簡歷
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]慢性牙周炎齦溝液中趨化因子白細(xì)胞介素-8水平Meta分析[J]. 馮萍珍,保森竹. 中國實用口腔科雜志. 2017(11)
[2]IL-1β、IL-6、IL-10在慢性牙周炎不同臨床階段的免疫調(diào)節(jié)作用[J]. 莫麗妮,林旭征. 包頭醫(yī)學(xué)院學(xué)報. 2017(10)
[3]Toll樣受體mRNA水平與牙齦炎癥相關(guān)性研究[J]. 宋立婷,劉麗偉,鄧嘉胤,朱東望,蔣少云. 牙體牙髓牙周病學(xué)雜志. 2016(06)
[4]miR-20a對人炎癥牙周膜干細(xì)胞成骨分化能力的影響[J]. 楊倩娟,劉文佳,常文悅,郭曉睿,王紅,陳琦,陸群. 實用口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2016(02)
[5]牙周基礎(chǔ)治療對牙周炎患者齦溝液和血清IL-6、IL-8和PAF水平的影響[J]. 趙靚,曹遠(yuǎn). 實用臨床醫(yī)藥雜志. 2015(19)
[6]牙齦卟啉單胞菌脂多糖對人牙齦成纖維細(xì)胞炎癥刺激作用的研究[J]. 魏叢叢,蔣少云,鄧嘉胤. 天津醫(yī)藥. 2013(05)
[7]Comparison of microRNA profiles of human periodontal diseased and healthy gingival tissues[J]. Yu-feng Xie1, Rong Shu1*, Shao-yun Jiang1, Da-li Liu1, Xiu-li Zhang2 1Department of Periodontology, Shanghai Ninth People’s Hospital Affiliated Shanghai Jiao Tong University School of Medicine, Shanghai 200011, China; 2Shanghai Research Institute of Stomatology, Shanghai Ninth People’s Hospital Affiliated Shanghai Jiao Tong University School of Medicine, Shanghai 200011, China. International Journal of Oral Science. 2011(03)
[8]TNF-α、IL-1β及IL-6與糖尿病及牙周炎之間的關(guān)系[J]. 吳瑩瑩,劉洪臣. 中華老年口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2011(02)
[9]慢性牙周炎治療前后患牙齦溝液中IL-8和TNF-α水平變化比較[J]. 朱治宇,劉國勤. 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2010(11)
[10]非編碼基因MALAT1功能性序列真核表達(dá)載體的構(gòu)建及其在SW620細(xì)胞中的表達(dá)[J]. 楊敏慧,王雙雙,王曉燕,徐川,李祖國. 熱帶醫(yī)學(xué)雜志. 2010(03)
本文編號:3187581
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