變形鏈球菌耐氟菌株中耐酸相關(guān)基因ccpA突變的檢測
發(fā)布時(shí)間:2021-04-29 08:44
齲病是一種由口腔中以細(xì)菌為主多種因素復(fù)合作用所導(dǎo)致的牙齒硬組織慢性進(jìn)行性破壞性病損,表現(xiàn)為無機(jī)質(zhì)的脫礦和有機(jī)質(zhì)的分解。隨著病程的發(fā)展而有一色澤變化到形成實(shí)質(zhì)性病損的演變過程。一般平均齲患率可在50%左右,是口腔最主要的常見病,也是人類最普遍的疾病之一。致齲的多種因素,主要包括細(xì)菌和牙菌斑、食物以及牙齒所處的環(huán)境等。牙菌斑中的致齲細(xì)菌是齲的主要病原菌。變形鏈球菌是最重要的致齲菌,是齲病的始發(fā)因素。變形鏈球菌為革蘭染色陽性的球菌,是口腔天然菌群中占比例最大的鏈球菌屬中的一種。經(jīng)反復(fù)研究證實(shí),變形鏈球菌可以造成嚙齒類動(dòng)物和靈長類動(dòng)物實(shí)驗(yàn)性齲的動(dòng)物模型,同時(shí)也有證據(jù)表明該菌與人類齲病密切相關(guān)。變形鏈球菌有強(qiáng)的致齲性主要取決于其產(chǎn)酸性和耐酸性。在菌斑中生存的變形鏈球菌能迅速發(fā)酵多種碳水化合物產(chǎn)生多量酸,可使局部pH下降至5.5以下。變形鏈球菌耐酸性強(qiáng),在pH4.5時(shí)仍能繼續(xù)生活并產(chǎn)酸。變形鏈球菌不僅是冠部齲病的主要致病菌,也是根部齲的主要致病菌。目前應(yīng)用分子生物學(xué)技術(shù)已經(jīng)分離并克隆出多個(gè)與變鏈耐酸性相關(guān)的基因,其中包括ccpA。氟可以有效防齲,已得到世界公認(rèn)。有調(diào)查表明,長期堅(jiān)持使用含氟牙膏,可...
【文章來源】:吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:38 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
ABSTRACT
第一章 引言
第二章 實(shí)驗(yàn)
2.1 材料
2.1.1 儀器
2.1.2 細(xì)菌與質(zhì)粒
2.1.3 培養(yǎng)基與試劑
2.2 方法
2.2.1 變形鏈球菌耐氟菌株 UA159-FR 的誘導(dǎo)
2.2.2 變形鏈球菌耐氟菌株 UA159-FR 基因組的提取
2.2.3 引物設(shè)計(jì)
2.2.4 PCR 反應(yīng)
2.2.5 PCR 產(chǎn)物電泳鑒定
2.2.6 凝膠回收試劑盒回收 PCR 產(chǎn)物
2.2.7 PCR 產(chǎn)物與 PMD18-T 載體連接
2.2.8 制備大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞
2.2.9 連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化至大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞
2.2.10 提取重組質(zhì)粒
2.2.11 重組質(zhì)粒 PCR 及 PCR 產(chǎn)物鑒定
2.2.12 測序
2.2.13 該實(shí)驗(yàn)重復(fù)三次
2.3 結(jié)果
2.3.1 變形鏈球菌耐氟菌株培養(yǎng)
2.3.2 ccpA PCR 產(chǎn)物
2.3.3 重組質(zhì)粒的提取與鑒定
2.3.4 分析測序結(jié)果
2.3.5 附圖
第三章 討論
3.1 變形鏈球菌及其耐氟菌株研究的意義
3.2 變形鏈球菌耐氟菌株耐酸相關(guān)基因 CCPA 的研究意義
3.3 基因突變的研究意義
第四章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
導(dǎo)師簡介
作者簡介
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]不同齲敏感者口腔變形鏈球菌基因型與產(chǎn)酸性之間的關(guān)系[J]. 李偉,賀新蘭,胡紅梅,張錚輝,王蔚,周鵬,湯洪,劉興容. 第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2008(06)
[2]變形鏈球菌臨床分離株乳酸脫氫酶遺傳多態(tài)性研究[J]. 楊德琴,劉天佳,李頌,亓慶國,莊姮,劉建國. 四川大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2006(05)
[3]變形鏈球菌耐氟菌株與親代菌株質(zhì)子移位膜ATP酶活性的比較[J]. 盛江筠,黃正蔚,劉正. 上?谇会t(yī)學(xué). 2005(01)
[4]變形鏈球菌耐氟菌株、遠(yuǎn)緣鏈球菌耐氟菌株與親代菌株基因組AP-PCR的比較[J]. 朱怡玲,吳補(bǔ)領(lǐng),孟艷玲,蘇凌云,王敬. 牙體牙髓牙周病學(xué)雜志. 2004(07)
[5]氟鉬酸銨影響變形鏈球菌粘附性的研究[J]. 馬宏,李玉晶. 實(shí)用口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2004(03)
[6]變形鏈球菌、遠(yuǎn)緣鏈球菌耐氟菌株與親代菌株基因組REA的比較分析[J]. 朱怡玲,吳補(bǔ)領(lǐng),孟艷玲,蘇凌云,王敬. 臨床口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2003(11)
[7]變形鏈球菌(血清型C)臨床分離株AP-PCR基因分型[J]. 黃曉晶,劉天佳,陳國弟,辛軍平,陳舟. 中華口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2001(04)
[8]變形鏈球菌和遠(yuǎn)緣鏈球菌耐氟菌株DNAG+C含量測定[J]. 盛江筠,劉正. 上?谇会t(yī)學(xué). 2001(01)
[9]變形鏈球菌和遠(yuǎn)緣鏈球菌耐氟菌株粘附能力的體外研究[J]. 盛江筠,劉正. 上?谇会t(yī)學(xué). 2000(03)
[10]變形鏈球菌耐氟菌株的誘導(dǎo)及產(chǎn)酸性的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 盛江筠,劉正. 中華口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2000(02)
本文編號(hào):3167216
【文章來源】:吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:38 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
ABSTRACT
第一章 引言
第二章 實(shí)驗(yàn)
2.1 材料
2.1.1 儀器
2.1.2 細(xì)菌與質(zhì)粒
2.1.3 培養(yǎng)基與試劑
2.2 方法
2.2.1 變形鏈球菌耐氟菌株 UA159-FR 的誘導(dǎo)
2.2.2 變形鏈球菌耐氟菌株 UA159-FR 基因組的提取
2.2.3 引物設(shè)計(jì)
2.2.4 PCR 反應(yīng)
2.2.5 PCR 產(chǎn)物電泳鑒定
2.2.6 凝膠回收試劑盒回收 PCR 產(chǎn)物
2.2.7 PCR 產(chǎn)物與 PMD18-T 載體連接
2.2.8 制備大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞
2.2.9 連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化至大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞
2.2.10 提取重組質(zhì)粒
2.2.11 重組質(zhì)粒 PCR 及 PCR 產(chǎn)物鑒定
2.2.12 測序
2.2.13 該實(shí)驗(yàn)重復(fù)三次
2.3 結(jié)果
2.3.1 變形鏈球菌耐氟菌株培養(yǎng)
2.3.2 ccpA PCR 產(chǎn)物
2.3.3 重組質(zhì)粒的提取與鑒定
2.3.4 分析測序結(jié)果
2.3.5 附圖
第三章 討論
3.1 變形鏈球菌及其耐氟菌株研究的意義
3.2 變形鏈球菌耐氟菌株耐酸相關(guān)基因 CCPA 的研究意義
3.3 基因突變的研究意義
第四章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
導(dǎo)師簡介
作者簡介
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]不同齲敏感者口腔變形鏈球菌基因型與產(chǎn)酸性之間的關(guān)系[J]. 李偉,賀新蘭,胡紅梅,張錚輝,王蔚,周鵬,湯洪,劉興容. 第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2008(06)
[2]變形鏈球菌臨床分離株乳酸脫氫酶遺傳多態(tài)性研究[J]. 楊德琴,劉天佳,李頌,亓慶國,莊姮,劉建國. 四川大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2006(05)
[3]變形鏈球菌耐氟菌株與親代菌株質(zhì)子移位膜ATP酶活性的比較[J]. 盛江筠,黃正蔚,劉正. 上?谇会t(yī)學(xué). 2005(01)
[4]變形鏈球菌耐氟菌株、遠(yuǎn)緣鏈球菌耐氟菌株與親代菌株基因組AP-PCR的比較[J]. 朱怡玲,吳補(bǔ)領(lǐng),孟艷玲,蘇凌云,王敬. 牙體牙髓牙周病學(xué)雜志. 2004(07)
[5]氟鉬酸銨影響變形鏈球菌粘附性的研究[J]. 馬宏,李玉晶. 實(shí)用口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2004(03)
[6]變形鏈球菌、遠(yuǎn)緣鏈球菌耐氟菌株與親代菌株基因組REA的比較分析[J]. 朱怡玲,吳補(bǔ)領(lǐng),孟艷玲,蘇凌云,王敬. 臨床口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2003(11)
[7]變形鏈球菌(血清型C)臨床分離株AP-PCR基因分型[J]. 黃曉晶,劉天佳,陳國弟,辛軍平,陳舟. 中華口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2001(04)
[8]變形鏈球菌和遠(yuǎn)緣鏈球菌耐氟菌株DNAG+C含量測定[J]. 盛江筠,劉正. 上?谇会t(yī)學(xué). 2001(01)
[9]變形鏈球菌和遠(yuǎn)緣鏈球菌耐氟菌株粘附能力的體外研究[J]. 盛江筠,劉正. 上?谇会t(yī)學(xué). 2000(03)
[10]變形鏈球菌耐氟菌株的誘導(dǎo)及產(chǎn)酸性的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 盛江筠,劉正. 中華口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2000(02)
本文編號(hào):3167216
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