本文關(guān)鍵詞：鈦種植體表面固定成骨細(xì)胞特異性識(shí)別多肽的實(shí)驗(yàn)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：在口腔種植的臨床應(yīng)用中,由于鈦基材固有的生物惰性,使其植入體內(nèi)后所需愈合時(shí)間較長(zhǎng),特別是在骨質(zhì)、骨量不良部位的骨結(jié)合效應(yīng)則更難以預(yù)期。為解決上述難題,對(duì)鈦基材表面進(jìn)行改性以獲得生物活性更佳的種植體表面,縮短愈合時(shí)間并提高愈合質(zhì)量,是當(dāng)前該領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。本研究旨在通過(guò)化學(xué)方法,將人成骨細(xì)胞特異性識(shí)別多肽通過(guò)共價(jià)鍵合將其固定在鈦基材表面,并對(duì)其進(jìn)行體外細(xì)胞學(xué)評(píng)價(jià),為鈦種植體表面的生物化修飾提供新的思路和前期實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。具體內(nèi)容如下:第一部分:人成骨細(xì)胞特異性識(shí)別多肽的固定首先使用3-氨丙基膦酸(APP)對(duì)鈦基材進(jìn)行表面處理,膦酸基團(tuán)與TiO2形成共價(jià)鍵合,使鈦基材表面獲得游離氨基;再利用生物素-親和素系統(tǒng),經(jīng)碳二亞胺活化生物素上的羧基形成酰胺鍵,從而將生物素-親和素鏈接在基材表面,最后再通過(guò)生物素-親和素之間的特異性結(jié)合,從而在鈦基材表面成功固定生物素化多肽分子。采用環(huán)境掃描電鏡、傅立葉變換紅外光譜(FTIR)、X射線光電子能譜(XPS)以及免疫熒光對(duì)鈦基材進(jìn)行表征,檢測(cè)其各項(xiàng)性質(zhì)。結(jié)果表明:經(jīng)過(guò)APP處理后的鈦片相比較于光滑鈦片,表面呈現(xiàn)均勻分布的大小、深淺不一的孔狀結(jié)構(gòu),高放大倍數(shù)下顯示該結(jié)構(gòu)為許多孔隙組成,孔徑大小不等,其底部及周壁有微孔,孔徑約1-2μm。同時(shí)結(jié)合FTIR、XPS檢測(cè)表面基團(tuán)成分以及元素比例的變化,可以證實(shí)APP成功構(gòu)建了單分子自組裝層,表面含有游離氨基。最后通過(guò)免疫熒光證實(shí)特異性識(shí)別多肽成功固定在鈦基材表面。第二部分:特異性識(shí)別多肽表面對(duì)人成骨細(xì)胞的生物學(xué)評(píng)價(jià)。將人成骨細(xì)胞接種于光滑鈦片以及多肽修飾的鈦片表面進(jìn)行體外培養(yǎng),利用激光共聚焦顯微鏡觀察成骨細(xì)胞在不同材料表面的粘附形態(tài),并進(jìn)行MTT、堿性磷酸酶(ALP)檢測(cè)。將定量數(shù)據(jù)整理后進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,分析材料對(duì)細(xì)胞的粘附、成骨等生物學(xué)功能的作用。結(jié)果表明:與光滑鈦片比較,多肽修飾鈦片表面人成骨細(xì)胞分布更加密集,形態(tài)呈多邊形,鋪展更為充分,有較多的細(xì)胞偽足。同時(shí)MTT、ALP檢測(cè)顯示成骨細(xì)胞在目的鈦片具有更好的增殖以及成骨能力。結(jié)論:鈦片經(jīng)過(guò)APP處理后,再利用生物素-親和素的特異性結(jié)合可以成功的固定特異性多肽分子,經(jīng)過(guò)細(xì)胞學(xué)檢測(cè),它具有良好的生物學(xué)活性,為牙種植體表面的生物化修飾研究提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】：鈦種植體 3-氨丙基膦酸 生物素-親和素系統(tǒng) 成骨細(xì)胞特異性識(shí)別多肽
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R783
【目錄】：

• 縮略詞表5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 前言11-15
• 材料與方法15
• 第一部分 材料與試劑15-19
• 1.材料與試劑15-16
• 2.儀器與設(shè)備16-17
• 3.試劑的配置方法17-19
• 第二部分 實(shí)驗(yàn)方法19-27
• 1. 人成骨細(xì)胞特異性識(shí)別多肽的固定19-22
• 1.1 實(shí)驗(yàn)方法19-21
• 1.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果21-22
• 2.特異性識(shí)別多肽表面對(duì)人成骨細(xì)胞的生物學(xué)評(píng)價(jià)22-27
• 2.1 試驗(yàn)方法22-25
• 2.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果25-27
• 討論27-33
• 結(jié)論33-34
• 參考文獻(xiàn)34-41
• 附圖41-46
• 附錄 個(gè)人簡(jiǎn)歷46-47
• 致謝47-48
• 綜述48-58
• 參考文獻(xiàn)55-58

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 孔令青;李勇;高洪;嚴(yán)玉霖;;生物素-親和素標(biāo)記技術(shù)[J];動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2008年04期

2 陳卓s，

本文編號(hào)：315014