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CCL2在大鼠實驗性牙周炎中的表達(dá)的研究

發(fā)布時間:2021-04-20 12:18
  目的 通過牙齦卟啉單胞菌脂多糖刺激+正畸絲結(jié)扎建立大鼠實驗性牙周炎模型,建模成功后去除結(jié)扎絲并進(jìn)行基礎(chǔ)治療,取大鼠外周血、牙齦組織及頜骨樣本觀察大鼠實驗性牙周炎基礎(chǔ)治療前后牙齦組織及外周血CCL2、轉(zhuǎn)錄因子c-Jun及IL-1β的表達(dá)變化,分析CCL2、轉(zhuǎn)錄因子c-Jun及IL-1β的含量變化情況與牙周組織炎癥狀態(tài)之間的關(guān)系,進(jìn)一步探討CCL2、轉(zhuǎn)錄因子c-Jun及IL-1β在牙周炎發(fā)病機(jī)制、病情進(jìn)展等方面所起的作用。為探討CCL2、轉(zhuǎn)錄因子c-Jun及IL-1β能否作為反映牙周炎癥狀況的指標(biāo)以及炎性因子的改變與全身系統(tǒng)疾病的發(fā)生可能相關(guān)提供實驗依據(jù)。方法 選取15只純種6周齡雄性清潔級SD大鼠隨機(jī)分為三組:空白對照組(CN組)、實驗性牙周炎組(EP組)、實驗性牙周炎+局部清創(chuàng)治療組(SRP組),每組5只。采用正畸結(jié)扎絲結(jié)扎+P.g Lps注射法建立牙周炎大鼠模型。CN組無任何干預(yù)措施,SRP組予以去除結(jié)扎絲+局部清創(chuàng)治療,每天1次,持續(xù)兩周。分別于建模完成后、建模完成后2周及4周處死CN組、EP組和SRP組大鼠,采集各組大鼠牙齦組織、頜骨樣本及外周血。實驗結(jié)束前由經(jīng)過專業(yè)訓(xùn)練的同一個... 

【文章來源】:天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

【文章頁數(shù)】:58 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
縮略語/符號說明
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
一、對象和方法
    1.1 實驗性牙周炎大鼠模型制備
        1.1.1 主要儀器及材料
        1.1.2 試劑
        1.1.3 實驗動物的選取
        1.1.4 納入標(biāo)準(zhǔn)
        1.1.5 動物分組
        1.1.6 動物模型的建立
        1.1.7 標(biāo)本的留取
        1.1.8 造模成功觀察指標(biāo)
    1.2 組織學(xué)實驗
        1.2.1 儀器和材料
        1.2.2 主要試劑
        1.2.3 制作石蠟切片
        1.2.4 HE染色
        1.2.5 TRAP染色檢測破骨細(xì)胞(OCs)的表達(dá)
        1.2.6 免疫組化(S‐P法)
    1.3 ELISA檢測血清中CCL2及IL‐1β的表達(dá)
        1.3.1 儀器和材料
        1.3.2 試劑
        1.3.3 實驗步驟
    1.4 PCR檢測牙齦及外周血中IL‐1β、CCL2及c‐Jun的表達(dá)
        1.4.1 儀器和材料
        1.4.2 試劑
        1.4.3 總RNA提。═rizol法)
        1.4.4 RNA質(zhì)量檢測
        1.4.5 第一鏈cDNA合成
        1.4.6 PCR產(chǎn)物的檢測
        1.4.7 real‐timePCR檢測
    1.5 統(tǒng)計學(xué)分析
二、結(jié)果
    2.1 牙周指標(biāo)檢測
    2.2 HE染色結(jié)果
    2.3 TRAP染色檢測破骨細(xì)胞(OCs)的表達(dá)
    2.4 免疫組化染色結(jié)果
        2.4.1 牙齦組織中IL‐1β的免疫組化結(jié)果
        2.4.2 牙齦組織中CCL2的免疫組化結(jié)果
        2.4.3 牙齦組織中c‐Jun的免疫組化結(jié)果
    2.5 ELISA檢測結(jié)果
    2.6 PCR檢測結(jié)果
        2.6.1 總RNA樣品純度的測定
        2.6.2 RT‐PCR檢測牙齦組織中c‐Jun、CCL2、IL‐1β的mRNA表達(dá)
        2.6.3 real–timePCR檢測牙齦組織中c‐Jun、CCL2、IL‐1β的mRNA表達(dá)
        2.6.4 real–timePCR檢測外周血白細(xì)胞中c‐Jun、CCL2、IL‐1β的mRNA表達(dá)
三、討論
    1 實驗性牙周炎大鼠模型的建立
    2 CCL2與牙周炎間的關(guān)系
    3 c‐Jun與牙周炎間的關(guān)系
    4 IL‐1β與牙周炎間的關(guān)系
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說明
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
個人簡歷


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]牙周基礎(chǔ)治療前后慢性牙周炎患者齦溝液中β-防御素2及白細(xì)胞介素-1β表達(dá)水平的變化研究[J]. 劉貞敏,李雅靈,牙祖科,陶人川.  廣西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2015(02)
[2]糖尿病牙周病大鼠牙周齦溝液中TNF-α,IL-1β和LPS水平的研究[J]. 姜竹玲,高睿,陳萌萌,李瑩,王祥,張斌.  口腔醫(yī)學(xué)研究. 2014(06)
[3]MCP-1和ICAM-1在大鼠實驗性牙周炎牙周纖維中的表達(dá)[J]. 劉玉三,畢良佳,林江,代佳音,蘇鑫,畢佳銳.  牙體牙髓牙周病學(xué)雜志. 2013(02)
[4]IL-1β對人牙周膜成纖維細(xì)胞OPG、RANKL mRNA表達(dá)的影響[J]. 張?zhí)m,孫琳琳,丁巖,宋健玲.  牙體牙髓牙周病學(xué)雜志. 2012(08)
[5]IL-1β與IL-10mRNA在牙齦組織中的表達(dá)[J]. 秦春平.  臨床口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2012(07)
[6]MCP-1對成骨前體細(xì)胞凋亡及凋亡調(diào)控蛋白Caspase3表達(dá)的影響[J]. 王誼,李松英.  現(xiàn)代口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2010(04)
[7]侵襲性牙周炎患者血漿白細(xì)胞介素-1β和腫瘤壞死因子-α的檢測[J]. 孫曉軍,孟煥新,陳智濱,徐莉,張立,釋棟,馮向輝.  北京大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2008(01)
[8]實驗性牙周炎動物模型的研究進(jìn)展[J]. 宋忠臣,束蓉.  牙體牙髓牙周病學(xué)雜志. 2005(10)
[9]Duffy抗原趨化因子受體抑制人乳腺癌裸鼠移植瘤的生長和肺轉(zhuǎn)移[J]. 王杰,歐周羅,侯意楓,羅建民,陳奕,周晉,沈鎮(zhèn)宙,丁健,邵志敏.  中華醫(yī)學(xué)雜志. 2005(29)
[10]齦溝液中的炎癥調(diào)節(jié)因子——白細(xì)胞介素8[J]. 謝昊,曹采方,馬大龍,孟煥新.  中華口腔醫(yī)學(xué)雜志. 1997(03)

碩士論文
[1]TGF-β1對IL-1β誘導(dǎo)人牙周膜成纖維細(xì)胞分泌HGF影響的研究[D]. 段燕.山西醫(yī)科大學(xué) 2011



本文編號:3149665

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