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二氧化鈦納米管負載米諾環(huán)素對成骨細胞和施萬細胞生物學(xué)行為影響的實驗研究

發(fā)布時間:2021-04-19 21:33
  鈦(Ti)金屬被廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,其良好的機械性能和生物安全性為種植體提供了“骨整合”的基礎(chǔ),納米結(jié)構(gòu)的鈦表面改性又進一步促進了種植體的“骨整合”。然而,與天然牙相比種植體周圍缺乏牙周膜及其終末機械感受器,理論上缺乏與天然牙相似的感知能力,但有研究發(fā)現(xiàn)種植體和假肢患者均具有很好的肢體運動控制能力、本體感覺和神經(jīng)反饋,并由此提出了“骨感知”理論。由于這種感知能力弱,患者易忽略過大咬合力的存在,造成過度載荷并引起種植體周圍骨質(zhì)吸收、顳下頜關(guān)節(jié)病甚至種植體的折斷,最終導(dǎo)致種植失敗。因此研究種植體植入后周圍神經(jīng)的再生具有重要的臨床意義。通過自組裝的方法在純鈦表面構(gòu)建二氧化鈦(TiO2)納米管管狀結(jié)構(gòu)能夠獲得較大的比表面積,其與骨組織的彈性模量較為接近且對成骨細胞的增殖及分化具有促進作用,利用TiO2納米管以上的兩種性能,有望為種植體的“骨整合”和“骨感知”的研究提供新的思路和選擇。此外,施萬細胞在周圍神經(jīng)的修復(fù)和再生過程中發(fā)揮了重要的生物學(xué)作用,是周圍神經(jīng)系統(tǒng)中最為主要的膠質(zhì)細胞。對施萬細胞的增殖、遷移、分泌等相關(guān)生物學(xué)行為進行研究,對于種植體... 

【文章來源】:吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:139 頁

【學(xué)位級別】:博士

【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
緒論
2)納米管的研究進展">    1、二氧化鈦(TiO2)納米管的研究進展
2納米管制備的研究進展">        1.1 TiO2納米管制備的研究進展
2納米管對成骨的影響">        1.2 TiO2納米管對成骨的影響
2納米管的載藥性能研究">        1.3 TiO2納米管的載藥性能研究
    2、種植體“骨感知”的研究進展
    3、周圍神經(jīng)再生的機制
    4、不同鈦表面對施萬細胞的影響
    5、
        5.1 營養(yǎng)神經(jīng)的藥物
        5.2 神經(jīng)營養(yǎng)因子
        5.3 免疫抑制劑
        5.4 米諾環(huán)素
2納米管的制備及表征">第一章 TiO2納米管的制備及表征
    1.1 材料
        1.1.1 主要試劑
        1.1.2 主要設(shè)備
        1.1.3 主要軟件
    1.2 二氧化鈦納米管的制備
        1.2.1 鈦片預(yù)處理
        1.2.2 陽極氧化法制備過程
2納米管的表征">    1.3 TiO2納米管的表征
        1.3.1 體視顯微鏡(Stereoscopic Microscope,SM)分析
        1.3.2 掃描電子顯微鏡(Scanning Electron Microscope,SEM)分析
        1.3.3 X射線衍射(X-ray diffraction,XRD)分析
        1.3.4 接觸角及表面能分析
        1.3.5 統(tǒng)計分析
    1.4 實驗結(jié)果
        1.4.1 體式顯微鏡結(jié)果
        1.4.2 掃描電子顯微鏡觀察結(jié)果
        1.4.3 X射線衍射物象分析
        1.4.4 接觸角觀察結(jié)果
    1.5 討論
    1.6 小結(jié)
2納米管負載米諾環(huán)素的載藥及緩釋分析">第二章 TiO2納米管負載米諾環(huán)素的載藥及緩釋分析
    2.1 材料
        2.1.1 儀器和耗材
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 主要軟件
    2.2 方法
        2.2.1 負載米諾環(huán)素溶液
        2.2.2 藥物的體外釋放
    2.3 結(jié)果
        2.3.1 載藥率
        2.3.2 元素分析
        2.3.3 米諾環(huán)素的體外釋放
    2.4 討論
    2.5 小結(jié)
2納米管載米諾環(huán)素對成骨細胞活性的影響">第三章 TiO2納米管載米諾環(huán)素對成骨細胞活性的影響
    3.1 材料
        3.1.1 主要儀器和設(shè)備
        3.1.2 主要試劑
        3.1.3 實驗細胞
        3.1.4 主要軟件
    3.2 方法
        3.2.1 樣品制備及分組
        3.2.2 細胞培養(yǎng)
        3.2.3 細胞粘附檢測
        3.2.4 細胞增殖檢測
        3.2.5 細胞內(nèi)堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性檢測
        3.2.6 細胞膠原分泌檢測
        3.2.7 細胞外基質(zhì)礦化檢測
        3.2.8 成骨相關(guān)基因表達水平
    3.3 結(jié)果
        3.3.1 細胞黏附
        3.3.2 細胞增殖
        3.3.3 堿性磷酸酶活性鑒定
        3.3.4 細胞膠原分泌檢測
        3.3.5 細胞外基質(zhì)分析
        3.3.6 成骨相關(guān)基因檢測
    3.4 討論
    3.5 小結(jié)
2納米管載米諾環(huán)素對施萬細胞生物行為的影響">第四章 TiO2納米管載米諾環(huán)素對施萬細胞生物行為的影響
    4.1 材料
        4.1.1 儀器和耗材
        4.1.2 主要試劑
        4.1.3 主要軟件
        4.1.4 實驗細胞
    4.2 方法
        4.2.1 施萬細胞的培養(yǎng)
        4.2.2 施萬細胞在形態(tài)觀察
        4.2.3 CCK-8檢測細胞增殖情況
        4.2.4 流式細胞儀檢測細胞活性
        4.2.5 RT-qPCR檢測NGF及GDNF mRNA表達情況
        4.2.6 Western blot檢測蛋白表達情況
    4.3 結(jié)果
        4.3.1 施萬細胞形態(tài)觀察
        4.3.2 CCK-8檢測細胞增殖情況
        4.3.3 流式細胞檢測細胞活性
        4.3.4 NGF及GDNFmRNA表達情況
        4.3.5 NGF及GDNF蛋白表達情況
    4.4 討論
    4.5 小結(jié)
2納米管載米諾環(huán)素對施萬細胞遷移影響">第五章 TiO2納米管載米諾環(huán)素對施萬細胞遷移影響
    5.1 材料
        5.1.1 儀器設(shè)備
        5.1.2 主要試劑
        5.1.3 主要軟件
        5.1.4 實驗細胞
    5.2 方法
        5.2.1 細胞培養(yǎng)
        5.2.2 細胞劃痕實驗
        5.2.3 Western blot檢測整合素β1及其下游信號分子的表達
        5.2.4 細胞轉(zhuǎn)染
        5.2.5 RT-PCR驗證整合素β1沉默情況
        5.2.6 Western blot驗證整合素β1沉默情況
        5.2.7 Transwell檢測細胞遷移
    5.3 結(jié)果
2納米管載米諾環(huán)素對施萬細胞遷移的影響">        5.3.1 TiO2納米管載米諾環(huán)素對施萬細胞遷移的影響
        5.3.2 Western-blot檢測施萬細胞integrinβ1及其下游分子的表達
        5.3.3 整合素β1基因沉默情況
        5.3.4 Transwell檢測Integrinβ1沉默后藥物對施旺細胞的遷移能力的作用
    5.4 討論
    5.5 小結(jié)
參考文獻
全文結(jié)論
作者簡介及在學(xué)期間所取得的科研成果
致謝


【參考文獻】:
期刊論文
[1]鈦種植體羥基磷灰石和神經(jīng)生長因子復(fù)合涂層的制備及緩釋性能研究[J]. 張鵬,管紅雨,鐘小君.  廣東牙病防治. 2014(05)
[2]牙種植體周圍骨內(nèi)神經(jīng)感受功能的初步研究[J]. 喬士沖,呂曉飛,莊龍飛,姜煥煥,張志勇,賴紅昌.  上?谇会t(yī)學(xué). 2011(02)
[3]促進周圍神經(jīng)再生的藥物研究進展[J]. 喜杰,敖強.  內(nèi)蒙古民族大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2010(01)
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[8]口腔種植修復(fù)臨床效果十年回顧研究[J]. 林野,李健慧,邱立新,邸萍,胡秀蓮,王興.  中華口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2006(03)
[9]NGF和bFGF聯(lián)合治療大鼠坐骨神經(jīng)損傷的實驗研究[J]. 梁崇禮,趙穩(wěn)興.  中國比較醫(yī)學(xué)雜志. 2003(03)

博士論文
[1]二氧化鈦納米管成骨和抗菌的基礎(chǔ)性研究[D]. 許志強.福建醫(yī)科大學(xué) 2016

碩士論文
[1]靜壓力對PLGA-膠原支架上牙齦成纖維細胞整合素α5和整合素β1表達的影響[D]. 陳志興.廣西醫(yī)科大學(xué) 2017
[2]不同純鈦表面形貌對神經(jīng)細胞生物學(xué)行為影響的研究[D]. 尹程程.吉林大學(xué) 2016
[3]不同種植體表面形貌對神經(jīng)再生影響的初步研究[D]. 李保勝.吉林大學(xué) 2013
[4]生物材料微圖形生物活性表面對細胞生長行為的調(diào)控研究[D]. 聶煜東.重慶大學(xué) 2012



本文編號:3148350

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