目的:研究鞣花酸對變異鏈球菌的體外抑菌作用及可能機制,為其防治齲病的應(yīng)用提供實驗依據(jù)。方法:以復(fù)方氯己定含漱液為陽性對照、5%二甲基亞砜（DMSO）溶液為陰性對照,采用打孔法抑菌試驗測定抑菌圈直徑考察50、25、12.5、6.25、3.125、1.562 5 mg/mL鞣花酸對變異鏈球菌的抑菌效果,并采用微量稀釋法測定其對變異鏈球菌的最低抑菌濃度（MIC）和最低殺菌濃度（MBC）。以5%DMSO溶液為陰性對照,采用結(jié)晶紫染色法測定1/8MIC、1/4MIC、1/2MIC、MIC鞣花酸對變異鏈球菌生物膜形成的影響,并在熒光染色后通過激光掃描共聚焦顯微鏡觀察1/2MIC鞣花酸作用后生物膜的結(jié)構(gòu)變化;分別采用苯酚硫酸法和還原型輔酶Ⅰ氧化法考察1/8MIC、1/4MIC、1/2MIC、MIC鞣花酸對變異鏈球菌細(xì)胞外多糖（EPS）的抑制率和細(xì)胞外基質(zhì)中乳酸脫氫酶（LDH）活力的影響。結(jié)果:12.5～50 mg/mL鞣花酸對變異鏈球菌產(chǎn)生了直徑均大于15 mm的抑菌圈,50 mg/mL鞣花酸作用下抑菌圈直徑與復(fù)方氯己定含漱液相當(dāng)。鞣花酸對變異鏈球菌的MIC、MBC分別為12.5、25 mg/mL。... 

【文章來源】：中國藥房. 2020,31(05)北大核心

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【部分圖文】：

細(xì)菌生物膜存活率測定結(jié)果

染色結(jié)果顯示，陰性對照組中細(xì)胞互相黏附聚集形成團塊，主要呈綠色熒光，表示多為活菌，細(xì)菌生物膜結(jié)構(gòu)完整。鞣花酸組中，多呈紅色熒光，表明經(jīng)1/2MIC鞣花酸干預(yù)后細(xì)胞多為死菌，生物膜結(jié)構(gòu)被破壞。變異鏈球菌生物膜激光共聚焦掃描圖見圖2。3.5 細(xì)菌中EPS生成抑制率測定結(jié)果

圖3 EPS的生成抑制率測定結(jié)果本研究通過打孔法抑菌圈試驗測定抑菌圈直徑，來初步判定鞣花酸對變異鏈球菌的抑制作用。結(jié)果顯示，12.5～50 mg/mL鞣花酸對變異鏈球菌產(chǎn)生了抑菌圈，且抑菌圈直徑>15 mm。研究中選用復(fù)方氯己定含漱液為陽性對照藥，該藥品中每500 mL中含葡萄糖酸氯己定0.6 g、甲硝唑0.1 g，為口腔常用的抑菌消炎藥[19]。本研究選用微量稀釋法測定了鞣花酸對變異鏈球菌的MIC，試驗中以刃天青顯色進行MIC的終點判定，最終得到了鞣花酸對變異鏈球菌的MIC、MBC分別為12.5、25 mg/mL，該方法比直接觀察法更加客觀、靈敏。另外，試驗結(jié)果顯示，3.125～25 mg/mL鞣花酸對變異鏈球菌的生物膜產(chǎn)生了抑制作用，且1/2MIC濃度的鞣花酸可破壞細(xì)菌生物膜結(jié)構(gòu)。通過以上試驗結(jié)果可知，鞣花酸不僅可以抑制浮游細(xì)菌的生長，還能抑制細(xì)菌生物膜的形成。

【參考文獻】：
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本文編號：3107623