發(fā)布時間：2021-03-24 13:41

　　骨質疏松會降低口腔種植體初期穩(wěn)定性和延遲骨結合,影響種植成功率。淫羊藿苷（ICA）具有骨誘導性,可促進骨、血管生成,抑制骨質吸收,治療骨質疏松效果明確,無毒副作用。將ICA加載在鈦（Ti）種植體表面,可以促進種植體周圍骨組織生成,實現(xiàn)早期骨結合。目的:研究不同濃度ICA對MC3T3-E1成骨細胞的作用效果;在此基礎上分別構建二氧化鈦（TiO₂）納米管（NT）負載ICA并加蓋聚乳酸-羥基乙酸共聚物（PLGA）涂層和綠色環(huán)保的鈦表面經(jīng)相轉變溶菌酶（PTL）預處理并以層層自組裝方式加載ICA的涂層,對兩種改性試樣進行表征,研究藥物釋放規(guī)律,通過體外實驗觀察試樣對MC3T3-E1成骨細胞生物活性的作用效果。通過體內實驗研究TiO₂納米管負載ICA并加蓋PLGA涂層在正常大鼠體內骨結合的影響;進一步探討鈦表面經(jīng)PTL預處理并以層層自組裝方式加載ICA涂層的鈦種植體對正常大鼠和骨質疏松大鼠體內骨結合的影響。方法:1、采用含不同濃度ICA的培養(yǎng)基培養(yǎng)MC3T3-E1成骨細胞。通過倒置相差顯微鏡觀察細胞的鋪展情況;細胞計數(shù)實驗（CCK-8）、堿性磷酸酶檢測（... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學天津市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：152 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

不同濃度ICA刺激1d后MC3T3-E1成骨細胞的形態(tài)

醫(yī)科大學博士學位論文 一、淫羊藿苷對成骨細胞的作用Figure 1-1 Morphology of MC3T3-E1 cells stimulated by different concentrations of icarii 1 day. (A) 0mol/L; (B) 10-5mol/L; (C) 10-6mol/L; (D) 10-7mol/L; (E) 10-8mol/L; (F) 10-9mol/.2 細胞增殖活性檢測MC3T3-E1 成骨細胞的成熟經(jīng)歷了增殖，分化，礦化三個階段。CCK-8 分檢測 ICA 濃度為 0、10-5、10-6、10-7、10-8和 10-9mol/L 的培養(yǎng)基在培養(yǎng)細胞 和 7d 后對細胞活力的影響。CCK 檢測結果（圖 1-2）顯示，與對照組相比本經(jīng)過不同濃度的 ICA 處理后 MC3T3-E1 成骨細胞的活性呈增強趨勢，且具劑量依賴性。細胞培養(yǎng) 3d 后，各組差異性較小，說明前 3d 細胞增長速度較。培養(yǎng) 7d 后，各組與對照組相比，均顯示出較高的細胞增殖，且低濃度 IC10-7-10-9mol/L）表現(xiàn)出更好的細胞增殖活性，但與高濃度 ICA 組沒有統(tǒng)計學異。

醫(yī)科大學博士學位論文 一、淫羊藿苷對成骨細胞的作用10-9mol/L. The data are expressed as the means ±standard deviations (n = 3). * indicates astatistical significance compared to the Ti group. (P<0.05)3 堿性磷酸酶活性檢測ALP 是成骨細胞早期分化的標志之一。采用 ALP 試劑盒分別檢測 ICA 濃度、10-5、10-6、10-7、10-8和 10-9mol/L 條件下，細胞培養(yǎng) 7d 和 14d 后的細胞情況。結果（圖 1-3）顯示，對照組在 7d 時 ALP 數(shù)值較低，14d 組的 ALP與 7d 組相差不大，差異無統(tǒng)計學意義。與對照組相比，不同濃度的 ICA 處在培養(yǎng) 7d 后 ALP 表現(xiàn)出較對照組明顯增強的趨勢。培養(yǎng) 14d 后，各實驗組LP 的數(shù)值有所降低，但不同濃度的 ICA 處理組的 ALP 活性依舊高于對照進一步分析發(fā)現(xiàn)，在第 7 天和 14 天時，ICA 濃度為 10-5mol/L 和 10-6mol/L別表現(xiàn)出較其他濃度的 ICA 組 ALP 活性增強更為明顯。上述結果提示，高（10-5-10-6mol/L）ICA 促進分化的效果更佳。

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3097826