發(fā)布時間：2021-03-17 22:36

　　目的明確果蠅裸露角蛋白2（Nkd2）在大鼠下頜第一磨牙牙本質(zhì)發(fā)育過程中表達(dá)。方法取出生后1d、3d、5d、7d、9d的SD乳鼠下頜骨制作石蠟切片免疫組化染色,倒置顯微鏡觀測Nkd2在大鼠牙胚中的表達(dá);體外培養(yǎng)大鼠牙乳頭細(xì)胞并采用細(xì)胞免疫組化染色進(jìn)行組織來源鑒定,誘導(dǎo)其成牙本質(zhì)向分化后茜素紅染色,熒光定量RT-qPCR和Western blot檢測Nkd2在此過程中的表達(dá)變化趨勢。結(jié)果免疫組織化學(xué)染色顯示Nkd2在牙乳頭、成牙本質(zhì)細(xì)胞層和成釉細(xì)胞和牙囊中均陽性,在牙本質(zhì)形成早期的成牙本質(zhì)細(xì)胞層中強表達(dá),隨后減弱。Nkd2在大鼠牙乳頭細(xì)胞中的表達(dá)呈陽性,礦化誘導(dǎo)4周后茜素紅染色顯示有礦化結(jié)節(jié)形成。熒光定量RT-qPCR和Western blot檢測顯示礦化誘導(dǎo)培養(yǎng)過程中Nkd2的表達(dá)呈先上調(diào)后下調(diào)趨勢。結(jié)論 Nkd2在大鼠牙胚組織中的表達(dá)分布具有時空特異性,體外大鼠牙乳頭細(xì)胞誘導(dǎo)成牙本質(zhì)細(xì)胞向分化過程中,Nkd2表達(dá)呈先上調(diào)后下調(diào)的趨勢,推測Nkd2可能在牙本質(zhì)形成早期發(fā)揮作用。 

【文章來源】：現(xiàn)代口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2020,34(04)

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

a出生后1-5天大鼠牙胚免疫組織化學(xué)染色

圖1 a出生后1-5天大鼠牙胚免疫組織化學(xué)染色第三代大鼠牙乳頭細(xì)胞（圖1-2A）體外培養(yǎng)至80%聯(lián)合進(jìn)行免疫組化染色。細(xì)胞呈波形蛋白陽性（圖2B）和角蛋白陰性（圖2C），表明其組織來源為間充質(zhì)，證明獲得了純化的大鼠牙乳頭細(xì)胞。Nkd2在體外培養(yǎng)的P3代大鼠牙乳頭細(xì)胞中呈弱陽性表達(dá)，主要分布于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)（圖2D）。

第三代大鼠牙乳頭細(xì)胞（圖1-2A）體外培養(yǎng)至80%聯(lián)合進(jìn)行免疫組化染色。細(xì)胞呈波形蛋白陽性（圖2B）和角蛋白陰性（圖2C），表明其組織來源為間充質(zhì)，證明獲得了純化的大鼠牙乳頭細(xì)胞。Nkd2在體外培養(yǎng)的P3代大鼠牙乳頭細(xì)胞中呈弱陽性表達(dá)，主要分布于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)（圖2D）。體外培養(yǎng)的第三代大鼠牙乳頭細(xì)胞生長至80%聯(lián)合后礦化誘導(dǎo)液中連續(xù)培養(yǎng)4周，茜素紅染色顯示有礦化結(jié)節(jié)形成，表明牙乳頭細(xì)胞已向成牙本質(zhì)細(xì)胞方向分化（圖3）。


本文編號：3087834