靶向Survivin基因RNA干擾抑制人腺樣囊性癌細(xì)胞生長(zhǎng)的實(shí)驗(yàn)研究
發(fā)布時(shí)間:2021-03-06 23:03
目的:涎腺腺樣囊性癌(salivary adenoid cystic carcinoma,SACC),是一種涎腺惡性腫瘤。其特點(diǎn)是惡性程度高,侵襲性強(qiáng),易復(fù)發(fā)、易早期轉(zhuǎn)移,且對(duì)放療、化療不敏感,手術(shù)治療難以根除。因此,尋求有效的輔助性治療手段非常必要。腫瘤基因治療已成為最引人矚目的研究領(lǐng)域,是繼手術(shù)、放療、化療之后的又一種治療模式。本研究采用RNA干擾技術(shù)阻斷凋亡抑制因子Survivin在腺樣囊性癌細(xì)胞中的表達(dá),觀察其對(duì)于ACC細(xì)胞生物學(xué)行為的影響,并對(duì)其作用機(jī)制作初步探討。方法:本實(shí)驗(yàn)針對(duì)Survivin mRNA設(shè)計(jì)和構(gòu)建特異性的siRNA重組干擾質(zhì)粒;采用脂質(zhì)體介導(dǎo)法轉(zhuǎn)染人腺樣囊性癌細(xì)胞株ACC-2,以Western Blot和RT-PCR法檢測(cè)Survivin siRNA對(duì)ACC-2細(xì)胞Survivin和Caspase-3表達(dá)的變化;并應(yīng)用MTT法檢測(cè)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的ACC-2細(xì)胞株增殖的變化;采用透射電鏡技術(shù)、TUNEL法和流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡,觀察細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)改變以及細(xì)胞周期的變化。結(jié)果:1、經(jīng)上海生工生物工程技術(shù)有限公司測(cè)序,成功獲得重組克隆測(cè)序結(jié)果,結(jié)果表明,成功構(gòu)建靶點(diǎn)...
【文章來(lái)源】:中國(guó)人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學(xué)重慶市
【文章頁(yè)數(shù)】:63 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
Survivin蛋白電泳圖
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Survivin基因在人涎腺腺樣囊性癌中的表達(dá)[J]. 肖胤,楊軍,肖林,王濤. 臨床口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2007(04)
[2]Downregulation of survivin by RNAi inhibits growth of human gastric carcinoma cells[J]. Guo-Ying Miao, Qi-Ming Lu, Xiu-Lan Zhang, Department of Digestion, The People’s Hospital of Gansu Province, Lanzhou 730000, Gansu Province, China. World Journal of Gastroenterology. 2007(08)
本文編號(hào):3067981
【文章來(lái)源】:中國(guó)人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學(xué)重慶市
【文章頁(yè)數(shù)】:63 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
Survivin蛋白電泳圖
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Survivin基因在人涎腺腺樣囊性癌中的表達(dá)[J]. 肖胤,楊軍,肖林,王濤. 臨床口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2007(04)
[2]Downregulation of survivin by RNAi inhibits growth of human gastric carcinoma cells[J]. Guo-Ying Miao, Qi-Ming Lu, Xiu-Lan Zhang, Department of Digestion, The People’s Hospital of Gansu Province, Lanzhou 730000, Gansu Province, China. World Journal of Gastroenterology. 2007(08)
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