目的:體外間接共培養(yǎng)兔牙髓干細(xì)胞（rabbit dental pulp stems cells,rDPSCs）與兔雪旺細(xì)胞（rabbit Schwann cells, rSCs）,研究兩種細(xì)胞對彼此增殖的影響以及rSCs誘導(dǎo)rDPSCs神經(jīng)向分化的可能性。方法:通過Transwell間接共培養(yǎng)系統(tǒng)構(gòu)建rSCs/rDPSCs間接共培養(yǎng)體系,采用MTT法檢測兩種細(xì)胞對彼此增殖的影響;通過免疫熒光染色和Western bolt檢測S-100β和NF-H的表達(dá),研究rSCs誘導(dǎo)rDPSCs神經(jīng)向分化的可能性。結(jié)果:將rDPSCs與rSCs以1∶2比例間接共培養(yǎng)5 d時,rDPSCs能夠促進(jìn)rSCs的增殖（P<0.05）,同時rSCs對rDPSCs的增殖也有明顯的促進(jìn)作用（P<0.05）;在與rSCs間接共培養(yǎng)7 d與14 d后,rDPSCs形態(tài)與神經(jīng)細(xì)胞類似,并表達(dá)S-100β和NF-H,并且14 d時兩種蛋白表達(dá)更高（P<0.01）。結(jié)論:將rDPSCs與rSCs間接共培養(yǎng),5 d時rDPSCs與rSCs能顯著促進(jìn)彼此的增殖,且rSCs能誘導(dǎo)rDPSCs神經(jīng)向分化。 

【文章來源】：口腔醫(yī)學(xué)研究. 2020,36(10)北大核心

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

rDPSCs的培養(yǎng)與鑒定

MTT結(jié)果顯示,rDPSCs與rSCs以1∶2比例間接共培養(yǎng)5 d時,rDPSCs能夠顯著促進(jìn)rSCs的增殖(P<0.05,圖2a);rSCs對rDPSCs的增殖也有明顯的促進(jìn)作用(P<0.05,圖2b)。2.3 與rSCs間接共培養(yǎng)對rDPSCs成神經(jīng)向分化的影響

rSCs細(xì)胞形態(tài)為紡錘形,大部分細(xì)胞為雙極性,少量細(xì)胞呈現(xiàn)多極性(圖3a)。單獨(dú)培養(yǎng)的rDPSCs呈類似成纖維細(xì)胞樣的長梭形(圖3b)。與rSCs共培養(yǎng)7 d時部分rDPSCs出現(xiàn)雙極形態(tài)(圖3c);14 d時大部分細(xì)胞呈雙極或多極形態(tài),產(chǎn)生突起樣結(jié)構(gòu),與神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)相似(圖3d)。圖4 S-100β和NF-H免疫熒光染色。細(xì)胞核用DAPI標(biāo)記為藍(lán)色(×100)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]不同方法提取兔牙髓干細(xì)胞對其生物學(xué)特征的影響[J]. 麥麥提依明·哈力克,張曉麗,陳曉濤,木合塔爾·霍加,艾力麥爾旦·艾尼瓦爾.  中華實(shí)用診斷與治療雜志. 2018(12)
[2]與雪旺細(xì)胞共培養(yǎng)誘導(dǎo)脂肪來源干細(xì)胞向神經(jīng)元樣細(xì)胞分化的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 張振輝,李東,孫凱,李瑞欣,朱祥,陳旭義,徐云強(qiáng).  中國修復(fù)重建外科雜志. 2015(01)
[3]SHH和bFGF體外誘導(dǎo)人牙髓干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞分化的研究[J]. 張智慧,胡偉平,郭陽,曹瀟方,袁夢桐.  口腔醫(yī)學(xué)研究. 2010(05)



本文編號：3049515