【目的】:原代培養(yǎng)人牙周膜成纖維細(xì)胞,建立人牙周膜成纖維細(xì)胞的體外模型;觀察在不同濃度組的IL-1β干預(yù)下,腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6（TRAF6）在人牙周膜成纖維細(xì)胞中的表達(dá)狀況,為細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)對(duì)細(xì)胞功能的調(diào)控提供新資料�！痉椒ā�:利用組織塊培養(yǎng)法對(duì)人牙周膜成纖維細(xì)胞進(jìn)行體外分離培養(yǎng),并對(duì)其進(jìn)行形態(tài)學(xué)及免疫組織化學(xué)鑒定。選取5～8代生長(zhǎng)穩(wěn)定的人牙周膜成纖維細(xì)胞,分別以0ng/ml、0.1ng/ml、0.5ng/ml、1ng/ml、5ng/ml、10ng/ml的IL-1β對(duì)細(xì)胞進(jìn)行干預(yù),采用逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)法及免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)TRAF6在細(xì)胞中的表達(dá)狀況,利用計(jì)算機(jī)圖像分析系統(tǒng)對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行圖像及數(shù)據(jù)的采集,并對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用單因素方差分析法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,觀察TRAF6在不同濃度的IL-1β干預(yù)下在細(xì)胞中的定位及表達(dá)特點(diǎn)�！窘Y(jié)果】:（1）人牙周膜成纖維細(xì)胞培養(yǎng)并傳代成功,5代后細(xì)胞生長(zhǎng)穩(wěn)定,倒置顯微鏡下觀察,細(xì)胞為星形或長(zhǎng)梭形,為典型的成纖維樣細(xì)胞形態(tài);免疫組織化學(xué)染色觀察,細(xì)胞抗波形絲蛋白染色陽(yáng)性,抗角蛋白染色陰性,符合人牙周膜成纖維細(xì)胞的生物學(xué)特性。（2）RT-PCR及免疫組化... 

【文章來(lái)源】：山西醫(yī)科大學(xué)山西省

【文章頁(yè)數(shù)】：47 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

;圖6;

山西醫(yī)科大學(xué)碩上學(xué)位論文.‘，‘J萬(wàn)..民竹幾、，’;.雄、、圖7圖8圖3:HPLFS以組織塊為中心呈束狀生長(zhǎng) x100;圖4:傳代后，HPLFs散在生長(zhǎng)x50;圖5:波形蛋自免疫組織化學(xué)染色陽(yáng)性 x100;圖6:波形絲蛋白免疫組織化學(xué)染色陽(yáng)性，表現(xiàn)為胞漿陽(yáng)性表達(dá)的顆粒x400;圖7:復(fù)蘇后的細(xì)胞旱成纖維樣細(xì)胞形態(tài)xl00;圖8:復(fù)蘇后的細(xì)胞波形絲蛋自免疫組織化學(xué)染色陽(yáng)性 x100。 Figure3:theHPLFsgrowaseenteroftissueblockX100:Figure4:AfterPassage， HpLFsseatteredgrowth X50;Figures:theHPLFsshowsaPositivereactiontovimentinbyimmunohistoehemiealmethodXl00: Figure6:theHPLFsshowsaPositivereactiontovimentinbyimmunohistochemiealmethod，Positive PerformaneeineytoPlasmicX400:Figure7:Reeoveryeellswerefibroblast一 likeeellsform.X100;Figures: Afterthereeovery， eellsshowPositivereactiontovimentinbyimmunohistochemiealmethodX100.4細(xì)胞生長(zhǎng)曲線的繪定:圖 6:HPLFS的細(xì)胞生長(zhǎng)曲線 Figure6:ThegrowthcurveofHPLFsHPLFs生長(zhǎng)曲線‘‘一一--山~~~~今今丫丫才 -...廠廠 廠 ///// ///// /////~~~一\冷/一 /// lll{l{11118︻了‘︵匕勻一 43Q自 O0C01曰 00000劃QO2O 4O6O80100120140時(shí)間(h)5細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇:復(fù)蘇后的細(xì)胞24h內(nèi)貼壁延展并開始生長(zhǎng)，生長(zhǎng)狀態(tài)穩(wěn)定

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]TRAF6在犬乳恒牙替換階段的表達(dá)[J]. 張娜,楊富生,王麗芳.  臨床口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2007(04)
[2]人牙周膜細(xì)胞體外培養(yǎng)和機(jī)械壓力模型構(gòu)建[J]. 張建興,黃生高,鐘孝歡,熊培穎.  口腔醫(yī)學(xué)研究. 2006(01)
[3]TRAF6在大鼠牙胚發(fā)育過(guò)程中的表達(dá)[J]. 李霞,肖明振,余擎,趙守亮,朱明慧,汪衛(wèi)國(guó),李鋒.  實(shí)用口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2005(01)
[4]牙周組織工程研究進(jìn)展[J]. 陳發(fā)明,吳織芬,金巖.  中華口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2004(06)
[5]酶消化組織塊法原代培養(yǎng)人牙周膜成纖維細(xì)胞的初步研究[J]. 湯楚華,施生根,牛忠英,黨平,鄭燕華,史亮.  中華醫(yī)學(xué)雜志. 2004(08)
[6]原代人牙周膜成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)及培養(yǎng)方法的改進(jìn)[J]. 張明珠,雷雅燕,劉曉,朱紅,歐炯光.  昆明醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2004(01)
[7]IL-1β對(duì)人牙周膜成纖維細(xì)胞的增殖和堿性磷酸酶活性的影響[J]. 隋曉梅,王健平.  口腔醫(yī)學(xué)研究. 2003(05)
[8]人牙周膜成纖維細(xì)胞原代培養(yǎng)的研究[J]. 胡軍,陳新民,麻健豐.  現(xiàn)代口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2002(02)
[9]IL-1β在成人牙周炎患者牙齦組織中表達(dá)[J]. 尹麗媛,劉純義,何安光.  解剖科學(xué)進(jìn)展. 2002(01)
[10]白介素1信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)研究進(jìn)展[J]. 郭甫坤,吳曙光.  國(guó)外醫(yī)學(xué)(分子生物學(xué)分冊(cè)). 2001(01)



本文編號(hào)：2997659