【目的】:原代培養(yǎng)人牙周膜成纖維細胞,建立人牙周膜成纖維細胞的體外模型;觀察在不同濃度組的IL-1β干預下,腫瘤壞死因子受體相關因子6（TRAF6）在人牙周膜成纖維細胞中的表達狀況,為細胞因子網絡對細胞功能的調控提供新資料�！痉椒ā�:利用組織塊培養(yǎng)法對人牙周膜成纖維細胞進行體外分離培養(yǎng),并對其進行形態(tài)學及免疫組織化學鑒定。選取5～8代生長穩(wěn)定的人牙周膜成纖維細胞,分別以0ng/ml、0.1ng/ml、0.5ng/ml、1ng/ml、5ng/ml、10ng/ml的IL-1β對細胞進行干預,采用逆轉錄多聚酶鏈反應法及免疫組織化學方法檢測TRAF6在細胞中的表達狀況,利用計算機圖像分析系統(tǒng)對檢測結果進行圖像及數據的采集,并對實驗數據采用單因素方差分析法進行統(tǒng)計分析,觀察TRAF6在不同濃度的IL-1β干預下在細胞中的定位及表達特點�！窘Y果】:（1）人牙周膜成纖維細胞培養(yǎng)并傳代成功,5代后細胞生長穩(wěn)定,倒置顯微鏡下觀察,細胞為星形或長梭形,為典型的成纖維樣細胞形態(tài);免疫組織化學染色觀察,細胞抗波形絲蛋白染色陽性,抗角蛋白染色陰性,符合人牙周膜成纖維細胞的生物學特性。（2）RT-PCR及免疫組化... 

【文章來源】：山西醫(yī)科大學山西省

【文章頁數】：47 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

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山西醫(yī)科大學碩上學位論文.‘，‘J萬..民竹幾、，’;.雄、、圖7圖8圖3:HPLFS以組織塊為中心呈束狀生長 x100;圖4:傳代后，HPLFs散在生長x50;圖5:波形蛋自免疫組織化學染色陽性 x100;圖6:波形絲蛋白免疫組織化學染色陽性，表現為胞漿陽性表達的顆粒x400;圖7:復蘇后的細胞旱成纖維樣細胞形態(tài)xl00;圖8:復蘇后的細胞波形絲蛋自免疫組織化學染色陽性 x100。 Figure3:theHPLFsgrowaseenteroftissueblockX100:Figure4:AfterPassage， HpLFsseatteredgrowth X50;Figures:theHPLFsshowsaPositivereactiontovimentinbyimmunohistoehemiealmethodXl00: Figure6:theHPLFsshowsaPositivereactiontovimentinbyimmunohistochemiealmethod，Positive PerformaneeineytoPlasmicX400:Figure7:Reeoveryeellswerefibroblast一 likeeellsform.X100;Figures: Afterthereeovery， eellsshowPositivereactiontovimentinbyimmunohistochemiealmethodX100.4細胞生長曲線的繪定:圖 6:HPLFS的細胞生長曲線 Figure6:ThegrowthcurveofHPLFsHPLFs生長曲線‘‘一一--山~~~~今今丫丫才 -...廠廠 廠 ///// ///// /////~~~一\冷/一 /// lll{l{11118︻了‘︵匕勻一 43Q自 O0C01曰 00000劃QO2O 4O6O80100120140時間(h)5細胞的凍存與復蘇:復蘇后的細胞24h內貼壁延展并開始生長，生長狀態(tài)穩(wěn)定

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：2997659