發(fā)布時(shí)間：2021-01-23 07:28

　　目的通過建立SD大鼠根尖周炎以及牙髓血運(yùn)重建模型,比較Ca（OH）₂、MTA、MTA-Angules以及IRoot-BP Plus四種材料對(duì)于SD大鼠年輕恒牙根尖周炎行血運(yùn)重建中bFGF、Nrf2及TNF-α,VEGF表達(dá)的影響,為臨床上年輕恒牙根尖周炎患者的治療提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。材料與方法本實(shí)驗(yàn)分為兩個(gè)部分:第一部分:SD大鼠上頜第一磨牙根尖周炎模型的建立:隨機(jī)選取12只剛斷奶的3周齡SD大鼠,6只12顆上頜第一磨牙作為實(shí)驗(yàn)組,另外6只12顆牙作為對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)組從冠部開髓,揭凈髓室頂后于髓腔內(nèi)涂抹內(nèi)毒素并開放髓腔,置于口腔環(huán)境1周。6只對(duì)照組大鼠即刻脫頸處死,實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物于髓腔暴露1周后處死,分離上頜骨組織。實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組動(dòng)物脫頸處死,分離上頜骨,固定24h,使用Micro-CT成像系統(tǒng)進(jìn)行影像學(xué)檢測(cè),逐個(gè)對(duì)于實(shí)驗(yàn)所需的標(biāo)本進(jìn)行斷層以及三維重建掃描。掃描結(jié)束后將標(biāo)本制作切片進(jìn)行HE染色以及免疫組化染色檢測(cè)bFGF、Nrf2的表達(dá)情況。提取根尖周及根管內(nèi)組織總RNA,Real Time PCR方法檢測(cè)炎癥因子TNF-α表達(dá)情況,對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。第二部分:SD大鼠上... 

【文章來源】：華北理工大學(xué)河北省

【文章頁(yè)數(shù)】：60 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

大鼠的牽拉和固定

圖 1 大鼠的牽拉和固定 圖 2 將內(nèi)毒素涂抹于開放的髓腔中Fig.1 Anesthesia and fixation of rats Fig.2 Endotoxin is applied to the pulp cavity andopened directly to the oral environment4）標(biāo)本的制取術(shù)后 1 周處死實(shí)驗(yàn)組 6 只大鼠，解剖分離上頜骨 12 顆第一磨牙，置于固定液中固定，A2 組作為對(duì)照組。（1）標(biāo)本的獲取及固定實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行脫頸處死，剪斷咀嚼肌，分離上頜骨，去除多余軟組織，置于固定液中固定 48h，然后再標(biāo)記各個(gè)標(biāo)本。（2）Micro-CT 成像系統(tǒng)斷層掃描條件的設(shè)定掃描條件為：電流 500mA、電壓 80KV、功率 50W。使用 Micro-CT 成像系統(tǒng)對(duì)標(biāo)本進(jìn)行斷層掃描后三維重建成像。校正 CT 值，使用小視野成像掃描，預(yù)掃完成后逐漸縮小掃描范圍，觀察標(biāo)本位置，每掃描一個(gè)上頜骨標(biāo)本平均耗時(shí) 15-25min。首先將標(biāo)本放置于直徑合適的圓柱形泡沫的中央，牙體長(zhǎng)軸與管長(zhǎng)軸平行

圖 3 上頜骨標(biāo)本Fig.3 Maxillary specimen總 RNA產(chǎn)品說明書進(jìn)行，將樣本的 RNA 采用 TRNzol 總冷研缽，把組織放入研缽，進(jìn)行研磨，待組織研狀組織中加入 Trizol 并在室溫條件下保存 5 分鐘管中加入氯仿 0.3ml，后充分震蕩離心管使內(nèi)容物心管在室溫條件下放置 6-15 分鐘。管置于 12000 rpm 條件下高速離心 20 分鐘，離心相（吸 75%)，將其移入另一新離心管中（注意勿）。移入新管后,在新管內(nèi)加入與離心管內(nèi)容物相的異丙醇,并將兩種物質(zhì)充分混勻，混勻后將該離上述離心管置于 12000 rpm 條件下高速離心 20 分

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號(hào)：2994819