miR-23a和miR-30a對炎性環(huán)境下成骨細胞生物學活性的影響研究
發(fā)布時間：2021-01-15 14:30
牙周炎是危害最廣泛的慢性炎性骨吸收性疾病。目前，臨床上治療牙周病的常用方法是基礎治療、藥物治療及手術治療等，但均難以獲得理想的牙周骨組織再生修復。骨代謝平衡是由成骨細胞和破骨細胞協(xié)同完成的。在炎性環(huán)境下，成骨細胞功能受抑是骨代謝失衡的關鍵環(huán)節(jié)。有大量研究證實炎癥因子可通過不同信號通路調控成骨細胞分化，而miRNA的發(fā)現(xiàn)使研究目光著眼于轉錄后水平的調控。miRNA是一類進化上高度保守的長度約22nt的內源性小分子RNA，參與轉錄后水平的基因調控。它與很多生命過程和某些疾病的發(fā)生發(fā)展均有緊密聯(lián)系。目前研究認為某些miRNA的表達改變與牙周炎的發(fā)生相關。此外，成骨細胞的分化過程也與miRNA有關。然而到目前為止，國內外學者的研究只是停留于發(fā)現(xiàn)和報道參與調控牙周炎疾病發(fā)生發(fā)展的特定miRNA分子群；以及調控骨分化成熟的特定miRNA分子群。但對共同調節(jié)著牙周炎和骨分化的分子：miR-23a和miR-30a，以及它們對炎性微環(huán)境下成骨細胞生物學功能的調控作用和對牙周炎性骨缺失發(fā)生機制的研究尚未見報道�；谝陨涎芯勘尘埃狙芯客ㄟ^建立大鼠牙周炎動物模型及LPS刺激成骨細胞模擬體外炎性微環(huán)境，探討在...
【文章來源】：中國人民解放軍空軍軍醫(yī)大學陜西省 211工程院校
【文章頁數(shù)】：59 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
PDLCs細胞形態(tài)（A：原代細胞；B：第四代PDLCs）
圖 2 PDLCs 細胞形態(tài)（A：原代細胞；B：第四代 PDL細胞 MC3T3-E1 成骨分化能力檢測細胞 MC3T3-E1 傳代生長良好，平均 2-3 天即可再次傳代（液誘導 21 天后茜素紅染色及誘導 7 天后 ALP 染色，結果顯化誘導后有大量礦化結節(jié)產生（圖 3B）；ALP 染色顯示該細圖 3C）。Real-time PCR 檢測結果顯示，MC3T3-E1 細胞經成Runx2、OCN 表達均較對照組增加（圖 3D），差異有統(tǒng)計學意說明實驗所用細胞系分化能力好，能夠滿足后續(xù)實驗研究需A BA B
第四軍醫(yī)大學碩士學位論文2.5 統(tǒng)計學分析采用 SPSS14.0 統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析。兩組樣本間比較采用 t 檢驗；三組及上比較時采用單因素方差分析。P<0.05 認為有統(tǒng)計學意義。3 結果3.1 轉染效率檢測轉染 miR-23a 和 miR-30a 的 mimic 和 inhibitor 后，細胞形態(tài)無明顯改變。熒倒置顯微鏡觀察 Cy-3 標記的 siRNAnegative control 可見約有 80%的細胞內轉入且中在胞漿區(qū)。Real-time PCR 結果顯示，轉染 miR-23a 和 miR-30a 的 mimic 后，其達量分別升高近 800 和 1000 倍左右。而轉染 miR-23a 和 miR-30a 的 inhibitor 后，表達量分別降低約 5 和 3 倍。AB
【參考文獻】：
期刊論文
[1]Comparison of microRNA profiles of human periodontal diseased and healthy gingival tissues[J]. Yu-feng Xie1, Rong Shu1*, Shao-yun Jiang1, Da-li Liu1, Xiu-li Zhang2 1Department of Periodontology, Shanghai Ninth People’s Hospital Affiliated Shanghai Jiao Tong University School of Medicine, Shanghai 200011, China; 2Shanghai Research Institute of Stomatology, Shanghai Ninth People’s Hospital Affiliated Shanghai Jiao Tong University School of Medicine, Shanghai 200011, China. International Journal of Oral Science. 2011(03)
[2]miRNA對免疫和炎癥反應的調節(jié)功能[J]. 謝玉峰,束蓉. 口腔醫(yī)學研究. 2011(06)
[3]成年人牙周炎流行因素的研究[J]. 趙雪,劉靜波,王宏巖,孫尚敏,潘亞萍. 口腔醫(yī)學研究. 2006(06)
[4]細胞因子與溶骨增強[J]. 童安莉,陳璐璐,丁桂芝. 中國骨質疏松雜志. 2000(02)
本文編號：2979032
【文章來源】：中國人民解放軍空軍軍醫(yī)大學陜西省 211工程院校
【文章頁數(shù)】：59 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
PDLCs細胞形態(tài)（A：原代細胞；B：第四代PDLCs）
圖 2 PDLCs 細胞形態(tài)（A：原代細胞；B：第四代 PDL細胞 MC3T3-E1 成骨分化能力檢測細胞 MC3T3-E1 傳代生長良好，平均 2-3 天即可再次傳代（液誘導 21 天后茜素紅染色及誘導 7 天后 ALP 染色，結果顯化誘導后有大量礦化結節(jié)產生（圖 3B）；ALP 染色顯示該細圖 3C）。Real-time PCR 檢測結果顯示，MC3T3-E1 細胞經成Runx2、OCN 表達均較對照組增加（圖 3D），差異有統(tǒng)計學意說明實驗所用細胞系分化能力好，能夠滿足后續(xù)實驗研究需A BA B
第四軍醫(yī)大學碩士學位論文2.5 統(tǒng)計學分析采用 SPSS14.0 統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析。兩組樣本間比較采用 t 檢驗；三組及上比較時采用單因素方差分析。P<0.05 認為有統(tǒng)計學意義。3 結果3.1 轉染效率檢測轉染 miR-23a 和 miR-30a 的 mimic 和 inhibitor 后，細胞形態(tài)無明顯改變。熒倒置顯微鏡觀察 Cy-3 標記的 siRNAnegative control 可見約有 80%的細胞內轉入且中在胞漿區(qū)。Real-time PCR 結果顯示，轉染 miR-23a 和 miR-30a 的 mimic 后，其達量分別升高近 800 和 1000 倍左右。而轉染 miR-23a 和 miR-30a 的 inhibitor 后，表達量分別降低約 5 和 3 倍。AB
【參考文獻】：
期刊論文
[1]Comparison of microRNA profiles of human periodontal diseased and healthy gingival tissues[J]. Yu-feng Xie1, Rong Shu1*, Shao-yun Jiang1, Da-li Liu1, Xiu-li Zhang2 1Department of Periodontology, Shanghai Ninth People’s Hospital Affiliated Shanghai Jiao Tong University School of Medicine, Shanghai 200011, China; 2Shanghai Research Institute of Stomatology, Shanghai Ninth People’s Hospital Affiliated Shanghai Jiao Tong University School of Medicine, Shanghai 200011, China. International Journal of Oral Science. 2011(03)
[2]miRNA對免疫和炎癥反應的調節(jié)功能[J]. 謝玉峰,束蓉. 口腔醫(yī)學研究. 2011(06)
[3]成年人牙周炎流行因素的研究[J]. 趙雪,劉靜波,王宏巖,孫尚敏,潘亞萍. 口腔醫(yī)學研究. 2006(06)
[4]細胞因子與溶骨增強[J]. 童安莉,陳璐璐,丁桂芝. 中國骨質疏松雜志. 2000(02)
本文編號：2979032
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