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miR-23a和miR-30a對(duì)炎性環(huán)境下成骨細(xì)胞生物學(xué)活性的影響研究

發(fā)布時(shí)間:2021-01-15 14:30
  牙周炎是危害最廣泛的慢性炎性骨吸收性疾病。目前,臨床上治療牙周病的常用方法是基礎(chǔ)治療、藥物治療及手術(shù)治療等,但均難以獲得理想的牙周骨組織再生修復(fù)。骨代謝平衡是由成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞協(xié)同完成的。在炎性環(huán)境下,成骨細(xì)胞功能受抑是骨代謝失衡的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。有大量研究證實(shí)炎癥因子可通過(guò)不同信號(hào)通路調(diào)控成骨細(xì)胞分化,而miRNA的發(fā)現(xiàn)使研究目光著眼于轉(zhuǎn)錄后水平的調(diào)控。miRNA是一類進(jìn)化上高度保守的長(zhǎng)度約22nt的內(nèi)源性小分子RNA,參與轉(zhuǎn)錄后水平的基因調(diào)控。它與很多生命過(guò)程和某些疾病的發(fā)生發(fā)展均有緊密聯(lián)系。目前研究認(rèn)為某些miRNA的表達(dá)改變與牙周炎的發(fā)生相關(guān)。此外,成骨細(xì)胞的分化過(guò)程也與miRNA有關(guān)。然而到目前為止,國(guó)內(nèi)外學(xué)者的研究只是停留于發(fā)現(xiàn)和報(bào)道參與調(diào)控牙周炎疾病發(fā)生發(fā)展的特定miRNA分子群;以及調(diào)控骨分化成熟的特定miRNA分子群。但對(duì)共同調(diào)節(jié)著牙周炎和骨分化的分子:miR-23a和miR-30a,以及它們對(duì)炎性微環(huán)境下成骨細(xì)胞生物學(xué)功能的調(diào)控作用和對(duì)牙周炎性骨缺失發(fā)生機(jī)制的研究尚未見報(bào)道;谝陨涎芯勘尘,本研究通過(guò)建立大鼠牙周炎動(dòng)物模型及LPS刺激成骨細(xì)胞模擬體外炎性微環(huán)境,探討在... 

【文章來(lái)源】:中國(guó)人民解放軍空軍軍醫(yī)大學(xué)陜西省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】:59 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

miR-23a和miR-30a對(duì)炎性環(huán)境下成骨細(xì)胞生物學(xué)活性的影響研究


PDLCs細(xì)胞形態(tài)(A:原代細(xì)胞;B:第四代PDLCs)

成骨細(xì)胞,分化能力,形態(tài),細(xì)胞


圖 2 PDLCs 細(xì)胞形態(tài)(A:原代細(xì)胞;B:第四代 PDL細(xì)胞 MC3T3-E1 成骨分化能力檢測(cè)細(xì)胞 MC3T3-E1 傳代生長(zhǎng)良好,平均 2-3 天即可再次傳代(液誘導(dǎo) 21 天后茜素紅染色及誘導(dǎo) 7 天后 ALP 染色,結(jié)果顯化誘導(dǎo)后有大量礦化結(jié)節(jié)產(chǎn)生(圖 3B);ALP 染色顯示該細(xì)圖 3C)。Real-time PCR 檢測(cè)結(jié)果顯示,MC3T3-E1 細(xì)胞經(jīng)成Runx2、OCN 表達(dá)均較對(duì)照組增加(圖 3D),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意說(shuō)明實(shí)驗(yàn)所用細(xì)胞系分化能力好,能夠滿足后續(xù)實(shí)驗(yàn)研究需A BA B

轉(zhuǎn)染效率,轉(zhuǎn)染率,轉(zhuǎn)染細(xì)胞,熒光顯微鏡


第四軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用 SPSS14.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。兩組樣本間比較采用 t 檢驗(yàn);三組及上比較時(shí)采用單因素方差分析。P<0.05 認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3 結(jié)果3.1 轉(zhuǎn)染效率檢測(cè)轉(zhuǎn)染 miR-23a 和 miR-30a 的 mimic 和 inhibitor 后,細(xì)胞形態(tài)無(wú)明顯改變。熒倒置顯微鏡觀察 Cy-3 標(biāo)記的 siRNAnegative control 可見約有 80%的細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)入且中在胞漿區(qū)。Real-time PCR 結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)染 miR-23a 和 miR-30a 的 mimic 后,其達(dá)量分別升高近 800 和 1000 倍左右。而轉(zhuǎn)染 miR-23a 和 miR-30a 的 inhibitor 后,表達(dá)量分別降低約 5 和 3 倍。AB

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Comparison of microRNA profiles of human periodontal diseased and healthy gingival tissues[J]. Yu-feng Xie1, Rong Shu1*, Shao-yun Jiang1, Da-li Liu1, Xiu-li Zhang2 1Department of Periodontology, Shanghai Ninth People’s Hospital Affiliated Shanghai Jiao Tong University School of Medicine, Shanghai 200011, China; 2Shanghai Research Institute of Stomatology, Shanghai Ninth People’s Hospital Affiliated Shanghai Jiao Tong University School of Medicine, Shanghai 200011, China.  International Journal of Oral Science. 2011(03)
[2]miRNA對(duì)免疫和炎癥反應(yīng)的調(diào)節(jié)功能[J]. 謝玉峰,束蓉.  口腔醫(yī)學(xué)研究. 2011(06)
[3]成年人牙周炎流行因素的研究[J]. 趙雪,劉靜波,王宏巖,孫尚敏,潘亞萍.  口腔醫(yī)學(xué)研究. 2006(06)
[4]細(xì)胞因子與溶骨增強(qiáng)[J]. 童安莉,陳璐璐,丁桂芝.  中國(guó)骨質(zhì)疏松雜志. 2000(02)



本文編號(hào):2979032

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