目的：①體外建立人牙齦成纖維細(xì)胞模型,為研究細(xì)胞因子對(duì)人牙齦成纖維細(xì)胞功能的調(diào)控作用提供實(shí)驗(yàn)條件。②觀察IL-1β和LPS干預(yù)人牙齦成纖維細(xì)胞后TRAF6的表達(dá)狀況,為豐富細(xì)胞因子對(duì)牙齦組織的調(diào)控作用提供理論依據(jù)。方法：①采用原代組織塊方法對(duì)人牙齦成纖維細(xì)胞進(jìn)行分離、培養(yǎng),用免疫組織化學(xué)的方法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行抗波形絲蛋白和抗角蛋白抗體鑒定,確定其來源；觀察人牙齦成纖維細(xì)胞的生物學(xué)特性,繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線觀察細(xì)胞的增值規(guī)律,建立穩(wěn)定的人牙齦成纖維細(xì)胞體外模型。②選取成功培養(yǎng)的3～8代細(xì)胞,制作細(xì)胞爬片,以O(shè)ng/ml、0.1ng/ml、0.5ng/ml、1ng/ml、5ng/ml、10ng/ml的IL-1β及0μg/ ml、0.1μg/ml、1μg/ml、10μg/ml、50μg/ml、100μg/ml的LPS分別對(duì)人牙齦成纖維細(xì)胞進(jìn)行干預(yù),24小時(shí)后觀察干預(yù)后人牙齦成纖維細(xì)胞形態(tài)學(xué)的變化,并采用免疫組織化學(xué)的方法檢測(cè)TRAF6在各組細(xì)胞中的表達(dá),利用醫(yī)學(xué)圖像分析系統(tǒng)對(duì)結(jié)果進(jìn)行圖像分析和數(shù)據(jù)收集,采用單因素方差分析法,對(duì)經(jīng)IL-1β及LPS刺激人牙齦成纖維細(xì)胞后TRAF6在細(xì)胞中的表達(dá)特征進(jìn)行統(tǒng)... 

【文章來源】：山西醫(yī)科大學(xué)山西省

【文章頁(yè)數(shù)】：60 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

TRAF家族結(jié)構(gòu)示意圖

成纖維細(xì)胞和角質(zhì)細(xì)胞的增生及組織重建;在中樞、食欲不振;在心血管系統(tǒng)中，IL一1與血管擴(kuò)張、、中性粒細(xì)胞外滲相關(guān);此外，IL一1在抗感染免疫及。IL一1的生物學(xué)活性主要由IL一lp發(fā)揮，IL一lp是具，存在于跟溝液中，參與牙周免疫破壞。面相應(yīng)受體結(jié)合引發(fā)一系列信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，其中涉及多轉(zhuǎn)錄因子。有文獻(xiàn)報(bào)道，IL一1主要通過轉(zhuǎn)錄因子核一1(妙一1)發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)[30，3‘l。近年來研究發(fā)現(xiàn)的AK(IL一1受體相關(guān)激酶)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑;②離子通3)激酶信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑;④JAK一S飛’AI，信號(hào)通路。在組路發(fā)揮效用，其中TRAF6參與了IRAK途徑的信點(diǎn)。IL一1與LPS參與共同的下游信號(hào)通路，均可激通路，因此本實(shí)驗(yàn)選擇IL一lp與LPS作為干預(yù)因子，織中的調(diào)控作用進(jìn)行探討。

利用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，P<0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。通過統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果顯示:TRAF6的胞漿染色強(qiáng)度隨IL一lp干預(yù)濃度的增加有增強(qiáng)趨勢(shì)(圖18)。表1:TRAF6在HGFs中蛋白表達(dá)的光密度值變化(n=10) Tablel:Theehangeof0DdataoftheTRAF6ProteinexPressioninHGFs(n=10)實(shí)驗(yàn)分組IL一lp干預(yù)濃度(ng/m1)光密度(萬士s)對(duì)照組實(shí)驗(yàn)組 0.510 0.11士0.007 0.15士0.012*# 0.19士0.010*# 0.20士0.008*井 0.24士0.010*并 0.27士0.011*材248

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]內(nèi)毒素對(duì)牙齦成纖維細(xì)胞增殖活性及分泌基質(zhì)金屬蛋白酶的影響[J]. 于艷玲,許麗華,王俊霞,尤紅煜,楊冬茹.  現(xiàn)代口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2010(01)
[2]中藥補(bǔ)腎固齒丸對(duì)牙周炎治療作用機(jī)制的探討[J]. 顧明,趙蕾,高靂,董偉,吳亞菲,李曉玉,劉豫蓉.  北京口腔醫(yī)學(xué). 2009(03)
[3]IL-1β作用于人牙周膜成纖維細(xì)胞后TRAF6蛋白表達(dá)的研究[J]. 任娟,孫克勤,李霞,李衛(wèi)星,程玨,王翔宇.  現(xiàn)代口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2009(01)
[4]胞內(nèi)接頭蛋白TRAFs家族[J]. 張萬巧,王建.  生命科學(xué). 2008(04)
[5]鋅指蛋白A20及ABINs對(duì)NF-κB的負(fù)反饋調(diào)節(jié)[J]. 范宏光,劉瑩,楊晨輝,張祥建.  腦與神經(jīng)疾病雜志. 2008(04)
[6]IL-1β干預(yù)后人牙周膜成纖維細(xì)胞中TRAF6的基因表達(dá)研究[J]. 李霞,任娟,孫克勤,王翔宇,葛學(xué)軍,李衛(wèi)星,羅曉晉.  臨床口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2008(06)
[7]人牙周膜細(xì)胞和牙齦成纖維細(xì)胞生物學(xué)活性的研究[J]. 王琨,許彥枝,朱曚曚.  牙體牙髓牙周病學(xué)雜志. 2008(06)
[8]牙周病的研究進(jìn)展[J]. 王珊.  中國(guó)醫(yī)藥指南. 2008(09)
[9]脂多糖介導(dǎo)的人牙周膜成纖維細(xì)胞損傷過程中TRAF-6蛋白表達(dá)的研究[J]. 徐利東,李衛(wèi)星,李霞,任娟,程玨,郝鳳翔.  中國(guó)藥物與臨床. 2008(03)
[10]荊芥揮發(fā)油對(duì)流感病毒性肺炎小鼠Myd88、TRAF6蛋白表達(dá)影響[J]. 解宇環(huán),沈映君,金沈銳,徐世軍.  中藥藥理與臨床. 2007(05)

碩士論文
[1]TRAF6在大鼠實(shí)驗(yàn)性牙周炎動(dòng)物模型表達(dá)的研究[D]. 程玨.山西醫(yī)科大學(xué) 2008



本文編號(hào)：2967115