本文關(guān)鍵詞：髁突軟骨中GLI2對(duì)下頜功能前伸力的應(yīng)答，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:髁突軟骨具有終生改建的能力,除受到機(jī)體自身遺傳、體液、神經(jīng)等因素控制之外,其局部所受的各種應(yīng)力刺激對(duì)髁突改建起重要作用。髁突軟骨細(xì)胞能夠感受各種應(yīng)力刺激,并將其轉(zhuǎn)化為化學(xué),生物信號(hào),繼而產(chǎn)生細(xì)胞增殖、分化和程序性細(xì)胞死亡等一系列的反應(yīng)。臨床上應(yīng)用功能矯治器通過(guò)改變髁突周圍生物力學(xué)環(huán)境達(dá)到刺激髁突生長(zhǎng)改建的目的。然而在機(jī)械應(yīng)力作用后,髁突軟骨細(xì)胞如何應(yīng)答機(jī)械應(yīng)力刺激,并將刺激信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),進(jìn)而調(diào)節(jié)髁突骨改建的細(xì)胞機(jī)制尚未得到清楚的認(rèn)識(shí)。鋅指蛋白2(Gli2)作為轉(zhuǎn)錄因子參與調(diào)節(jié)胚胎發(fā)育和器官形成。胚胎發(fā)育完成后,生理狀態(tài)下,細(xì)胞分泌Gli2于細(xì)胞質(zhì)并迅速水解。細(xì)胞增殖分化過(guò)程中,細(xì)胞質(zhì)中的Gli2轉(zhuǎn)向細(xì)胞核激活其目的基因,調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖分化。近年來(lái)有研究發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)錄因子Gli2與應(yīng)力刺激后細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和調(diào)控過(guò)程有關(guān),并且Gli2與髁突軟骨細(xì)胞增殖,分化以及骨形成存在密切聯(lián)系。PCNA是細(xì)胞周期特定時(shí)相內(nèi)表達(dá)的細(xì)胞核酸性蛋白,能有效反映細(xì)胞增殖功能,也是公認(rèn)的細(xì)胞增殖活動(dòng)的標(biāo)志之一,本文中其作為轉(zhuǎn)錄因子Gli2促進(jìn)細(xì)胞增殖功能參照物而入選本研究。本實(shí)驗(yàn)采用組織學(xué)染色,免疫組織化學(xué)染色的方法觀察和檢測(cè)大鼠下頜功能前伸后組織形態(tài)學(xué)變化,髁突軟骨中Gli2及PCNA的表達(dá)及其變化規(guī)律,在細(xì)胞學(xué)水平上探討功能矯治器的作用機(jī)理,為臨床上功能矯治的使用提供確切的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:選用4周齡健康雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠70只,體重約90克,隨機(jī)等量分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組,組內(nèi)根據(jù)實(shí)驗(yàn)周期(1、3、7、14、21、28和35天)分為7組(每組5只),共14組。適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后,實(shí)驗(yàn)組利用3M玻璃離子將自制下頜前伸斜面導(dǎo)板矯治器粘固于大鼠上切牙,通過(guò)鏈狀橡皮圈經(jīng)鼻上頜復(fù)合體與兩側(cè)口外弓連接,使得斜面導(dǎo)板獲得穩(wěn)定的固位,并將大鼠四肢用醫(yī)用橡皮膏包裹以有效地防止大鼠前爪對(duì)裝置的破壞及損傷面部組織,矯治器24h戴用;對(duì)照組不做任何實(shí)驗(yàn)操作。所有動(dòng)物均以軟食飼養(yǎng),自由飲水,同一環(huán)境下飼養(yǎng)至實(shí)驗(yàn)結(jié)束。實(shí)驗(yàn)后1、3、7、14、21、28、35天分別取材,常規(guī)固定,脫鈣,脫水,包埋。石蠟切片后進(jìn)行常規(guī)HE染色觀察髁突組織學(xué)變化;SP免疫組化方法檢測(cè)Gli2及PCNA的表達(dá),采用美國(guó)Media Cybernetics公司Image-Pro Plus多功能真彩色細(xì)胞圖象分析管理系統(tǒng)進(jìn)行免疫組化染色評(píng)分,以IHS值表示染色強(qiáng)度。所有數(shù)據(jù)結(jié)果均應(yīng)用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理,統(tǒng)計(jì)分析時(shí)實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組組間比較采用t檢驗(yàn),組內(nèi)比較采用單因素方差分析,P0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。PCNA實(shí)驗(yàn)組與Gli2實(shí)驗(yàn)組進(jìn)行雙變量相關(guān)分析。結(jié)果:1大體觀察:實(shí)驗(yàn)組大鼠上下頜前牙呈對(duì)刃或反He關(guān)系,下頜處于前伸狀態(tài),矯治器摘除后,下頜不能后退。對(duì)照組大鼠前牙覆蓋約3mm。2髁突形態(tài)學(xué)變化:對(duì)照組隨著觀測(cè)時(shí)間的延長(zhǎng),髁突軟骨主要表現(xiàn)為厚度變薄,其中軟骨中部和后部的變化更為顯著,呈現(xiàn)增齡性的變化;實(shí)驗(yàn)組自實(shí)驗(yàn)第3天時(shí),髁突軟骨各層組織變厚,細(xì)胞數(shù)量增多,髁突中后份有明顯變化,而前份不明顯。之后到21天時(shí),髁突軟骨各層逐漸穩(wěn)定,鈣化軟骨層較對(duì)照組仍明顯增厚,并可見(jiàn)處于分化末期的軟骨細(xì)胞,成骨細(xì)胞以及大量原始骨小梁和發(fā)育不完全的骨髓腔。3 Gli2及PCNA表達(dá)水平及分布:空白對(duì)照(PBS代替一抗)組未見(jiàn)陽(yáng)性著色顆粒。對(duì)照組髁突軟骨中僅肥大層少量細(xì)胞Gli2表達(dá)陽(yáng)性,且其表達(dá)逐漸降低,第28天以后表達(dá)穩(wěn)定在極低的水平,組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);實(shí)驗(yàn)組第3天時(shí),髁突軟骨中Gli2表達(dá)增強(qiáng),IHS=15.67±3.51與對(duì)照組IHS=6.00±1.00存在顯著差異(P0.05),第7天時(shí),實(shí)驗(yàn)組IHS=41.33±3.06陽(yáng)性表達(dá)顯著增強(qiáng),與對(duì)照組IHS=5.67±1.53有明顯差異(P0.01);第14天,實(shí)驗(yàn)組IHS=99.00±6.00陽(yáng)性表達(dá)持續(xù)增強(qiáng),與對(duì)照組IHS=5.67±2.08差異明顯(P0.01),第21天,實(shí)驗(yàn)組IHS=44.67±6.43,大部分樣本陽(yáng)性表達(dá)細(xì)胞開(kāi)始減少,但與對(duì)照組IHS=5.00±1.73相比仍有顯著差異(P0.05);第28天,實(shí)驗(yàn)組IHS=17.33±6.11,對(duì)照組IHS=4.33±1.53,差別無(wú)計(jì)學(xué)意義(P0.05);第35天,髁突軟骨Gli2表達(dá)回落至極低水平,實(shí)驗(yàn)組IHS=7.33±2.08,與對(duì)照組IHS=4.33±1.54相比仍無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。實(shí)驗(yàn)組第3天時(shí),髁突軟骨中PCNA表達(dá)增強(qiáng),IHS=49.67±13.50與對(duì)照組IHS=7.33±1.15顯著差異(P0.01),第7天時(shí),實(shí)驗(yàn)組IHS=124.00±7.55陽(yáng)性表達(dá)顯著增強(qiáng),與對(duì)照組IHS=9.00±2.00比較有明顯差異(P0.01);第14天,實(shí)驗(yàn)組IHS=108.33±8.50陽(yáng)性表達(dá)略有減弱,但與對(duì)照組IHS=8.67±0.58差異仍明顯(P0.01),第21天,實(shí)驗(yàn)組IHS=34.00±15.87,大部分樣本陽(yáng)性表達(dá)細(xì)胞開(kāi)始減少,與對(duì)照組IHS=7.67±1.53相比差異不明顯(P0.05);第28天,實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組差別仍無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);第35天,髁突軟骨PCNA表達(dá)回落至極低水平,實(shí)驗(yàn)組IHS=7.33±2.08,與對(duì)照組IHS=6.67±1.15相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。PCNA實(shí)驗(yàn)組與Gli2實(shí)驗(yàn)組相關(guān)系數(shù)為0.715,P0.01,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論:1大鼠下頜功能前伸過(guò)程中,Gli2參與髁突軟骨細(xì)胞的增殖分化以及新骨形成的整個(gè)過(guò)程。2 Gli2參與了大鼠髁突軟骨骨改建過(guò)程中機(jī)械外力-生物化學(xué)信號(hào)的轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程。
【關(guān)鍵詞】：下頜功能前伸 髁突改建 Gli2 PCNA 生長(zhǎng)期大鼠
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R782
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-12
• 英文縮寫(xiě)12-13
• 前言13-14
• 材料與方法14-19
• 結(jié)果19-22
• 附圖22-36
• 附表36-37
• 討論37-41
• 結(jié)論41
• 參考文獻(xiàn)41-45
• 綜述45-58
• 參考文獻(xiàn)51-58
• 致謝58-59
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷59

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 汪廷樂(lè);徐立群;王世唯;裴慶國(guó);宋萌;陳萬(wàn)濤;;利用基因芯片技術(shù)篩查腮腺多形性腺瘤差異表達(dá)基因的研究[J];口腔頜面外科雜志;2010年05期

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  本文關(guān)鍵詞：髁突軟骨中GLI2對(duì)下頜功能前伸力的應(yīng)答，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：293883