1400W對(duì)缺氧培養(yǎng)的人舌鱗狀細(xì)胞癌CAL-27細(xì)胞株iNOS和MMP-9表達(dá)及意義
發(fā)布時(shí)間:2020-12-05 05:58
研究背景和目的舌為口腔內(nèi)鱗狀細(xì)胞癌最常見的原發(fā)部位之一,多呈浸潤(rùn)生長(zhǎng),易發(fā)生早期轉(zhuǎn)移。舌癌發(fā)病率近期呈增長(zhǎng)趨勢(shì),其早期轉(zhuǎn)移率為37%~85%,故研究舌鱗癌的治療方法并為其提供理論基礎(chǔ)有重要的意義?鼓[瘤血管形成是治療腫瘤有效的方法,針對(duì)性的抑制相關(guān)腫瘤血管形成因子的表達(dá)是目前研究的熱點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)在缺氧條件下給予不同劑量的誘導(dǎo)性一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)抑制劑1400W作用不同時(shí)間,觀察其對(duì)人舌鱗癌CAL-27細(xì)胞株iNOS活性和變化及iNOS.基質(zhì)金屬蛋白酶-9 (matrix metalloproteinases-9,MMP-9)表達(dá)的影響及相關(guān)性,,以探討抑制iNOS表達(dá),治療舌鱗癌的可能性。研究?jī)?nèi)容和方法1.在體外正常培養(yǎng)條件下,實(shí)驗(yàn)組分別采用濃度為50,100,200,400μmol/L的1400W對(duì)相同條件CAL-27細(xì)胞作用,并設(shè)計(jì)不加1400W的細(xì)胞組為對(duì)照組,24,48,72,96h后,分別用硝酸還原酶法測(cè)定各組人舌鱗癌細(xì)胞株CAL-27細(xì)胞培養(yǎng)上清液中一氧化氮(Nitric oxide, NO)的含量水平;并...
【文章來源】:南昌大學(xué)江西省 211工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】:48 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
缺氧培養(yǎng)條件下140OW對(duì)CAL一27細(xì)胞培養(yǎng)上清液中NO含量的影響
.21400W對(duì)各組CAL一27中1NOS、MMP一9基因mRNA表達(dá)水平檢1400W對(duì)各組CAL一27iNOS、MMp一9基因mRNA表達(dá)水平的影響見表及圖3.及3.2.2RT一尸CR擴(kuò)增產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳圖見見附錄B圖2。3.2.1不同濃度14OOW作用72h后對(duì)CAL一27中iNOS及刪P一9mRNA表達(dá)的檢測(cè)表3.2.1不同濃度I40OW作用72h后對(duì)細(xì)胞iNOS及MMP一9mRNA表達(dá)的影響又士s蜜別對(duì)照組0林mo盯L50林moFL100林moUL200林mo盯L400林mol/LiNOS0.248士0.0080.210士0.010#0.171士0.011*0.135士0.007*0.140士0.009*人扒護(hù)一91.05士0.021.36士0.03#0.91士0.03*0.40士0.03*0.62士0.05*注:,與對(duì)照組比較尸<0.05,#與對(duì)照組比較尸>0.05,各實(shí)驗(yàn)組之間比較尸<0.05
鍘蘭VN叱日HOdV口\︵6dl弓芝的O之叫iNOSMMP一9圖3, 2.2200pmol/L1400W作用不同時(shí)間對(duì)CAL一27細(xì)胞iNOSmRNA、MMP一gmRNA表達(dá)的影響3.2.3各實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組CAL一27細(xì)胞經(jīng)RT一PCR法擴(kuò)增后表達(dá)水平經(jīng)RT一PCR法擴(kuò)增后各實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組可見 593bpGAPDH特異性擴(kuò)增片段, 364bpiNOS特異性擴(kuò)增片段、 172bpMMp一9特異性擴(kuò)增片段見附錄B圖2。72h時(shí),經(jīng)不同濃度140OW處理的實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞中iNOS及MMP一9的基因mRNA表達(dá)水平均隨1400w濃度增加而逐漸下降。但24h、 50pm01/L組與對(duì)照組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P>0.05),實(shí)驗(yàn)組以72h,200pmOI/L抑制最為顯著(P<0.05);以濃度為200“mol/L為例,經(jīng)不同時(shí)間作用后各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞中iNOS及MM尸一9的mRNA表達(dá)水平均隨 14O0w作用時(shí)間延長(zhǎng)而逐漸下降,且兩者的表達(dá)遞減成明顯相關(guān)性(P<0.05)。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Notch1和表皮生長(zhǎng)因子受體在舌鱗癌及癌前病變中的表達(dá)[J]. 黃紅杰,平飛云,胡濟(jì)安,趙士芳. 華西口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2009(06)
[2]iNOS抑制劑1400W對(duì)宮頸癌HeLa細(xì)胞株生長(zhǎng)的抑制作用[J]. 葉君,孫紅. 復(fù)旦學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2009(02)
[3]選擇性iNOS抑制劑1400W對(duì)缺氧培養(yǎng)人肝癌SMMC-7721細(xì)胞株iNOS和VEGF表達(dá)的影響[J]. 邢宏松,黃長(zhǎng)文,傅華群,馬景勝,蔡成行. 實(shí)用臨床醫(yī)學(xué). 2008(09)
[4]誘導(dǎo)型一氧化氮合酶在腫瘤組織中的作用[J]. 劉陽(yáng)云,趙素萍. 國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志. 2008(05)
[5]一氧化氮與口腔黏膜癌前病變的相關(guān)性研究[J]. 方豪,張水龍,許勵(lì),曹之強(qiáng),張梅. 醫(yī)學(xué)研究雜志. 2007(04)
[6]Expressions of inducible nitric oxide synthase and matrix metalloproteinase-9 and their effects on angiogenesis and progression of hepatocellular carcinoma[J]. Min-Hua Sun, Xi-Chun Han, Ming-Ku Jia, Wei-Dong Jiang, Min Wang, Hong Zhang, Gang Han, Yi Jiang, Department of General Surgery, Second Hospital, Jilin University, Changchun 130041, Jilin Province, China. World Journal of Gastroenterology. 2005(38)
[7]Increased oxidative DNA damage, inducible nitric oxide synthase, nuclear factor кB expression and enhanced antiapoptosis-related proteins in Helicobacter pylori-infected non-cardiac gastric adenocarcinoma[J]. Chi-Sen Chang Wei-Na Chen Hui-Hsuan Lin Cheng-Chung Wu Chau-Jong Wang Division of Gastroenterology,Chung Shan Medical University,Taichung,Taiwan,ChinaDivision of Gastroenterology,Taichung Veterans General Hospital,Taichung,Taiwan,ChinaDivision of General Surgery,Taichung Veterans General Hospital,Taichung,Taiwan,ChinaInstitute of Biochemistry,Chung Shan Medical University,Taichung,Taiwan,ChinaNational Young-Min Medical University,Taipei,Taiwan,China. World Journal of Gastroenterology. 2004(15)
[8]口腔鱗癌VEGF和NOS的表達(dá)及其相關(guān)性[J]. 李曉光,王延秀,王春,楊憲勇,王青,李毅,侯剛. 口腔醫(yī)學(xué)研究. 2004(03)
[9]口腔鱗癌患者血清一氧化氮水平及其手術(shù)前后的變化[J]. 李衛(wèi)星,張朝霞,張秀清,甘世新. 中國(guó)癌癥雜志. 2003(01)
[10]5-氟脲嘧啶對(duì)惡性腫瘤患者血一氧化氮水平的影響[J]. 江素華,曾波航,李宇清,李丹. 實(shí)用癌癥雜志. 2000(04)
本文編號(hào):2898999
【文章來源】:南昌大學(xué)江西省 211工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】:48 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
缺氧培養(yǎng)條件下140OW對(duì)CAL一27細(xì)胞培養(yǎng)上清液中NO含量的影響
.21400W對(duì)各組CAL一27中1NOS、MMP一9基因mRNA表達(dá)水平檢1400W對(duì)各組CAL一27iNOS、MMp一9基因mRNA表達(dá)水平的影響見表及圖3.及3.2.2RT一尸CR擴(kuò)增產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳圖見見附錄B圖2。3.2.1不同濃度14OOW作用72h后對(duì)CAL一27中iNOS及刪P一9mRNA表達(dá)的檢測(cè)表3.2.1不同濃度I40OW作用72h后對(duì)細(xì)胞iNOS及MMP一9mRNA表達(dá)的影響又士s蜜別對(duì)照組0林mo盯L50林moFL100林moUL200林mo盯L400林mol/LiNOS0.248士0.0080.210士0.010#0.171士0.011*0.135士0.007*0.140士0.009*人扒護(hù)一91.05士0.021.36士0.03#0.91士0.03*0.40士0.03*0.62士0.05*注:,與對(duì)照組比較尸<0.05,#與對(duì)照組比較尸>0.05,各實(shí)驗(yàn)組之間比較尸<0.05
鍘蘭VN叱日HOdV口\︵6dl弓芝的O之叫iNOSMMP一9圖3, 2.2200pmol/L1400W作用不同時(shí)間對(duì)CAL一27細(xì)胞iNOSmRNA、MMP一gmRNA表達(dá)的影響3.2.3各實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組CAL一27細(xì)胞經(jīng)RT一PCR法擴(kuò)增后表達(dá)水平經(jīng)RT一PCR法擴(kuò)增后各實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組可見 593bpGAPDH特異性擴(kuò)增片段, 364bpiNOS特異性擴(kuò)增片段、 172bpMMp一9特異性擴(kuò)增片段見附錄B圖2。72h時(shí),經(jīng)不同濃度140OW處理的實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞中iNOS及MMP一9的基因mRNA表達(dá)水平均隨1400w濃度增加而逐漸下降。但24h、 50pm01/L組與對(duì)照組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P>0.05),實(shí)驗(yàn)組以72h,200pmOI/L抑制最為顯著(P<0.05);以濃度為200“mol/L為例,經(jīng)不同時(shí)間作用后各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞中iNOS及MM尸一9的mRNA表達(dá)水平均隨 14O0w作用時(shí)間延長(zhǎng)而逐漸下降,且兩者的表達(dá)遞減成明顯相關(guān)性(P<0.05)。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Notch1和表皮生長(zhǎng)因子受體在舌鱗癌及癌前病變中的表達(dá)[J]. 黃紅杰,平飛云,胡濟(jì)安,趙士芳. 華西口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2009(06)
[2]iNOS抑制劑1400W對(duì)宮頸癌HeLa細(xì)胞株生長(zhǎng)的抑制作用[J]. 葉君,孫紅. 復(fù)旦學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2009(02)
[3]選擇性iNOS抑制劑1400W對(duì)缺氧培養(yǎng)人肝癌SMMC-7721細(xì)胞株iNOS和VEGF表達(dá)的影響[J]. 邢宏松,黃長(zhǎng)文,傅華群,馬景勝,蔡成行. 實(shí)用臨床醫(yī)學(xué). 2008(09)
[4]誘導(dǎo)型一氧化氮合酶在腫瘤組織中的作用[J]. 劉陽(yáng)云,趙素萍. 國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志. 2008(05)
[5]一氧化氮與口腔黏膜癌前病變的相關(guān)性研究[J]. 方豪,張水龍,許勵(lì),曹之強(qiáng),張梅. 醫(yī)學(xué)研究雜志. 2007(04)
[6]Expressions of inducible nitric oxide synthase and matrix metalloproteinase-9 and their effects on angiogenesis and progression of hepatocellular carcinoma[J]. Min-Hua Sun, Xi-Chun Han, Ming-Ku Jia, Wei-Dong Jiang, Min Wang, Hong Zhang, Gang Han, Yi Jiang, Department of General Surgery, Second Hospital, Jilin University, Changchun 130041, Jilin Province, China. World Journal of Gastroenterology. 2005(38)
[7]Increased oxidative DNA damage, inducible nitric oxide synthase, nuclear factor кB expression and enhanced antiapoptosis-related proteins in Helicobacter pylori-infected non-cardiac gastric adenocarcinoma[J]. Chi-Sen Chang Wei-Na Chen Hui-Hsuan Lin Cheng-Chung Wu Chau-Jong Wang Division of Gastroenterology,Chung Shan Medical University,Taichung,Taiwan,ChinaDivision of Gastroenterology,Taichung Veterans General Hospital,Taichung,Taiwan,ChinaDivision of General Surgery,Taichung Veterans General Hospital,Taichung,Taiwan,ChinaInstitute of Biochemistry,Chung Shan Medical University,Taichung,Taiwan,ChinaNational Young-Min Medical University,Taipei,Taiwan,China. World Journal of Gastroenterology. 2004(15)
[8]口腔鱗癌VEGF和NOS的表達(dá)及其相關(guān)性[J]. 李曉光,王延秀,王春,楊憲勇,王青,李毅,侯剛. 口腔醫(yī)學(xué)研究. 2004(03)
[9]口腔鱗癌患者血清一氧化氮水平及其手術(shù)前后的變化[J]. 李衛(wèi)星,張朝霞,張秀清,甘世新. 中國(guó)癌癥雜志. 2003(01)
[10]5-氟脲嘧啶對(duì)惡性腫瘤患者血一氧化氮水平的影響[J]. 江素華,曾波航,李宇清,李丹. 實(shí)用癌癥雜志. 2000(04)
本文編號(hào):2898999
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