胚胎發(fā)育末期維甲酸誘導(dǎo)腭裂小鼠腭突細(xì)胞增殖與分化的變化
發(fā)布時(shí)間:2020-12-05 05:14
背景:全反式維甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)是維生素A的衍生物,現(xiàn)已被證明具有顯著的致畸作用。在胚胎腭發(fā)育早期,母體攝入過(guò)量維甲酸可導(dǎo)致腭間充質(zhì)細(xì)胞增殖水平下降而產(chǎn)生腭裂。但在胚胎發(fā)育末期,腭突細(xì)胞尤其是腭間充質(zhì)細(xì)胞的增殖和分化程度尚未見報(bào)道。目的:在胚胎18.5天維甲酸誘導(dǎo)腭裂小鼠中,利用BrdU法標(biāo)記慢周期細(xì)胞,并結(jié)合PCNA、Sox-2和P75等細(xì)胞增殖和分化標(biāo)記物,檢測(cè)腭突上皮和間充質(zhì)細(xì)胞的增殖與分化水平。方法:選取10周齡左右SPF級(jí)ICR孕鼠,在胚胎10天時(shí)按100mg/kg體重維甲酸灌胃孕鼠建立腭裂動(dòng)物模型。在胚胎12天按80mg/kg體重對(duì)孕鼠腹膜下注射BrdU,用以標(biāo)記在胚胎18.5天處于低分裂的慢周期狀態(tài)細(xì)胞。在胚胎發(fā)育末期即出生前的胚胎18.5天,將腭裂組與對(duì)照組小鼠進(jìn)行灌流固定脫水包埋,利用多重免疫熒光法分別檢測(cè)BrdU與Sox-2、P75及PCNA陽(yáng)性細(xì)胞的分布;解離胚胎腭突上皮和間充質(zhì)組織,利用實(shí)時(shí)定量PCR法檢測(cè)Sox-2和75的表達(dá)水平。結(jié)果:(1)BrdU與PCNA雙重?zé)晒馊旧Y(jié)果顯示在E18.5天正常對(duì)照組中,Bru...
【文章來(lái)源】:大連醫(yī)科大學(xué)遼寧省
【文章頁(yè)數(shù)】:36 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
前言
材料和方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
本文編號(hào):2898943
【文章來(lái)源】:大連醫(yī)科大學(xué)遼寧省
【文章頁(yè)數(shù)】:36 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
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摘要
Abstract
前言
材料和方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
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