目的: 細(xì)胞外基質(zhì)磷酸糖蛋白(matrix extracellular phosphoglycoprotein,MEPE)是小型N端連接整合糖蛋白(small integrin-binding ligand N-linked glycoprotein,SIBLING)家族成員。該家族成員還包括:骨橋蛋白,骨唾液蛋白,牙基質(zhì)蛋白1,牙本質(zhì)唾液磷酸蛋白和釉蛋白。SIBLING家族蛋白在基質(zhì)鈣化、調(diào)節(jié)成骨細(xì)胞及破骨細(xì)胞功能方面發(fā)揮重要作用。MEPE是一種磷調(diào)節(jié)因子,對(duì)磷酸鹽代謝紊亂及各種骨組織疾病的成骨細(xì)胞增生及牙周組織生理連接的重建過程中有重要作用。 本研究擬通過觀察小鼠出生后牙齒連續(xù)發(fā)育過程中MEPE在牙胚和牙周組織中的表達(dá)變化,研究MEPE在小鼠牙齒硬組織及牙周組織形成等方面可能發(fā)揮的作用,為進(jìn)一步研究牙齒發(fā)育的分子機(jī)制和牙周組織的再生提供理相應(yīng)的理論依據(jù)。通過觀察MEPE在牙周組織缺損愈合過程中的組織分布,探討MEPE在牙周組織再生中的作用,為臨床上利用MEPE治療牙周炎及牙槽骨萎縮、頜骨畸形及頜骨骨折等提供理論依據(jù)。 方法: 不同發(fā)育期SPF級(jí)BALB/c小鼠(山東大學(xué)動(dòng)物中心提供)88只。戊巴比妥鈉腹腔麻醉,新鮮配制4%多聚甲醛循環(huán)內(nèi)固定30分鐘,分離雙側(cè)下頜骨,4℃下再固定24h,10%EDTA脫鈣30-60天,梯度乙醇脫水、石蠟包埋,近遠(yuǎn)中向5μm連續(xù)切片。 成年SPF級(jí)Wistar大鼠(山東大學(xué)動(dòng)物中心提供)24只。戊巴比妥鈉腹腔麻醉后行右側(cè)磨牙區(qū)牙槽骨開窗手術(shù)(5mm×2mm×1mm),分別于術(shù)后14天和28天戊巴比妥鈉腹腔麻醉,新鮮配置4%多聚甲醛循環(huán)內(nèi)固定30分鐘,分離右側(cè)下頜骨,4℃下再固定24h、10%EDTA脫鈣90天,梯度乙醇脫水、石蠟包埋,近遠(yuǎn)中向5μm連續(xù)切片。 HE染色觀察牙周組織缺損愈合情況。 PV免疫組化兩步法檢測MEPE在牙齒發(fā)育及牙周組織缺損愈合過程中各組織的表達(dá)。 結(jié)果: 1.MEPE在出生后小鼠牙齒發(fā)育過程中的表達(dá):牙胚發(fā)育早期,MEPE在成釉細(xì)胞、成牙本質(zhì)細(xì)胞及牙髓組織中均有表達(dá)。隨著牙胚的不斷發(fā)育,MEPE在上述細(xì)胞中的表達(dá)逐步減弱;在牙周膜中逐漸表達(dá);在前期牙本質(zhì)中亦有表達(dá);在成年小鼠牙周膜中弱陽性表達(dá)。MEPE在嵌入骨陷窩的成熟成骨細(xì)胞中呈現(xiàn)高表達(dá)。 2.術(shù)后14天,術(shù)區(qū)有部分新生牙槽骨形成,部分牙周纖維附著于根面牙本質(zhì)上。術(shù)后28天,術(shù)區(qū)完全被新生牙槽骨覆蓋,在新生牙槽骨和牙本質(zhì)之間可見牙周膜和部分牙骨質(zhì)生成,牙周膜大部分附著于根面上。 3.牙周組織缺損愈合過程中,MEPE在缺損區(qū)牙槽骨和牙周膜相關(guān)細(xì)胞中表達(dá)。 結(jié)論: 1.細(xì)胞外基質(zhì)磷酸糖蛋白在牙齒硬組織,特別是在牙本質(zhì)小管形成過程中發(fā)揮重要作用。 2.細(xì)胞外基質(zhì)磷酸糖蛋白可能在牙周膜的形成以及在維持牙周組織內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定方面起一定作用。 3.在牙周缺組織損愈合過程中,細(xì)胞外基質(zhì)磷酸糖蛋白參與牙槽骨以及牙周膜的再生。
【學(xué)位單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2009
【中圖分類】：R78
【部分圖文】：

小鼠出生后3天MEPE免疫組化染色(免疫組化x40)

圖1一3小鼠出生后5天MEPE免疫組化染色(免疫組化X40)MEPE在成釉細(xì)胞層、成牙本質(zhì)細(xì)胞層和牙髓細(xì)胞中陽性表達(dá)，在前期牙本質(zhì)中弱陽性表達(dá)(A成釉細(xì)胞層D牙本質(zhì)E牙釉質(zhì)PD前期牙本質(zhì)O成牙本質(zhì)細(xì)胞層P牙髓)圖1一4小鼠出生后7天MEPE免疫組化染色(免疫組化火40)MEPE在成釉細(xì)胞層、成牙本質(zhì)細(xì)胞層、牙髓細(xì)胞和前期牙本質(zhì)中弱陽性表達(dá)(A成釉細(xì)胞層D牙本質(zhì)E牙釉質(zhì)PD前期牙本質(zhì)O成牙本質(zhì)細(xì)胞層P牙髓)

弱陽性表達(dá)(A成釉細(xì)胞層D牙本質(zhì)E牙釉質(zhì)PD前期牙本質(zhì)O成牙本質(zhì)細(xì)胞層P牙髓)圖1一4小鼠出生后7天MEPE免疫組化染色(免疫組化火40)MEPE在成釉細(xì)胞層、成牙本質(zhì)細(xì)胞層、牙髓細(xì)胞和前期牙本質(zhì)中弱陽性表達(dá)(A成釉細(xì)胞層D牙本質(zhì)E牙釉質(zhì)PD前期牙本質(zhì)O成牙本質(zhì)細(xì)胞層P牙髓)
【共引文獻(xiàn)】

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2 戰(zhàn)雷;NGF、bFGF用于大鼠磨牙蓋髓的實(shí)驗(yàn)研究[D];南昌大學(xué);2006年

本文編號(hào)：2888246