目的: 細胞外基質(zhì)磷酸糖蛋白(matrix extracellular phosphoglycoprotein,MEPE)是小型N端連接整合糖蛋白(small integrin-binding ligand N-linked glycoprotein,SIBLING)家族成員。該家族成員還包括:骨橋蛋白,骨唾液蛋白,牙基質(zhì)蛋白1,牙本質(zhì)唾液磷酸蛋白和釉蛋白。SIBLING家族蛋白在基質(zhì)鈣化、調(diào)節(jié)成骨細胞及破骨細胞功能方面發(fā)揮重要作用。MEPE是一種磷調(diào)節(jié)因子,對磷酸鹽代謝紊亂及各種骨組織疾病的成骨細胞增生及牙周組織生理連接的重建過程中有重要作用。 本研究擬通過觀察小鼠出生后牙齒連續(xù)發(fā)育過程中MEPE在牙胚和牙周組織中的表達變化,研究MEPE在小鼠牙齒硬組織及牙周組織形成等方面可能發(fā)揮的作用,為進一步研究牙齒發(fā)育的分子機制和牙周組織的再生提供理相應(yīng)的理論依據(jù)。通過觀察MEPE在牙周組織缺損愈合過程中的組織分布,探討MEPE在牙周組織再生中的作用,為臨床上利用MEPE治療牙周炎及牙槽骨萎縮、頜骨畸形及頜骨骨折等提供理論依據(jù)。 方法: 不同發(fā)育期SPF級BALB/c小鼠(山東大學(xué)動物中心提供)88只。戊巴比妥鈉腹腔麻醉,新鮮配制4%多聚甲醛循環(huán)內(nèi)固定30分鐘,分離雙側(cè)下頜骨,4℃下再固定24h,10%EDTA脫鈣30-60天,梯度乙醇脫水、石蠟包埋,近遠中向5μm連續(xù)切片。 成年SPF級Wistar大鼠(山東大學(xué)動物中心提供)24只。戊巴比妥鈉腹腔麻醉后行右側(cè)磨牙區(qū)牙槽骨開窗手術(shù)(5mm×2mm×1mm),分別于術(shù)后14天和28天戊巴比妥鈉腹腔麻醉,新鮮配置4%多聚甲醛循環(huán)內(nèi)固定30分鐘,分離右側(cè)下頜骨,4℃下再固定24h、10%EDTA脫鈣90天,梯度乙醇脫水、石蠟包埋,近遠中向5μm連續(xù)切片。 HE染色觀察牙周組織缺損愈合情況。 PV免疫組化兩步法檢測MEPE在牙齒發(fā)育及牙周組織缺損愈合過程中各組織的表達。 結(jié)果: 1.MEPE在出生后小鼠牙齒發(fā)育過程中的表達:牙胚發(fā)育早期,MEPE在成釉細胞、成牙本質(zhì)細胞及牙髓組織中均有表達。隨著牙胚的不斷發(fā)育,MEPE在上述細胞中的表達逐步減弱;在牙周膜中逐漸表達;在前期牙本質(zhì)中亦有表達;在成年小鼠牙周膜中弱陽性表達。MEPE在嵌入骨陷窩的成熟成骨細胞中呈現(xiàn)高表達。 2.術(shù)后14天,術(shù)區(qū)有部分新生牙槽骨形成,部分牙周纖維附著于根面牙本質(zhì)上。術(shù)后28天,術(shù)區(qū)完全被新生牙槽骨覆蓋,在新生牙槽骨和牙本質(zhì)之間可見牙周膜和部分牙骨質(zhì)生成,牙周膜大部分附著于根面上。 3.牙周組織缺損愈合過程中,MEPE在缺損區(qū)牙槽骨和牙周膜相關(guān)細胞中表達。 結(jié)論: 1.細胞外基質(zhì)磷酸糖蛋白在牙齒硬組織,特別是在牙本質(zhì)小管形成過程中發(fā)揮重要作用。 2.細胞外基質(zhì)磷酸糖蛋白可能在牙周膜的形成以及在維持牙周組織內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定方面起一定作用。 3.在牙周缺組織損愈合過程中,細胞外基質(zhì)磷酸糖蛋白參與牙槽骨以及牙周膜的再生。
【學(xué)位單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2009
【中圖分類】：R78
【部分圖文】：

小鼠出生后3天MEPE免疫組化染色(免疫組化x40)

圖1一3小鼠出生后5天MEPE免疫組化染色(免疫組化X40)MEPE在成釉細胞層、成牙本質(zhì)細胞層和牙髓細胞中陽性表達，在前期牙本質(zhì)中弱陽性表達(A成釉細胞層D牙本質(zhì)E牙釉質(zhì)PD前期牙本質(zhì)O成牙本質(zhì)細胞層P牙髓)圖1一4小鼠出生后7天MEPE免疫組化染色(免疫組化火40)MEPE在成釉細胞層、成牙本質(zhì)細胞層、牙髓細胞和前期牙本質(zhì)中弱陽性表達(A成釉細胞層D牙本質(zhì)E牙釉質(zhì)PD前期牙本質(zhì)O成牙本質(zhì)細胞層P牙髓)

弱陽性表達(A成釉細胞層D牙本質(zhì)E牙釉質(zhì)PD前期牙本質(zhì)O成牙本質(zhì)細胞層P牙髓)圖1一4小鼠出生后7天MEPE免疫組化染色(免疫組化火40)MEPE在成釉細胞層、成牙本質(zhì)細胞層、牙髓細胞和前期牙本質(zhì)中弱陽性表達(A成釉細胞層D牙本質(zhì)E牙釉質(zhì)PD前期牙本質(zhì)O成牙本質(zhì)細胞層P牙髓)
【共引文獻】

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1 范紅渠;周衛(wèi)兵;許彪;;bFGF對成骨細胞的生物學(xué)作用及調(diào)控機制研究進展[J];口腔醫(yī)學(xué)研究;2006年05期

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2 戰(zhàn)雷;NGF、bFGF用于大鼠磨牙蓋髓的實驗研究[D];南昌大學(xué);2006年

本文編號：2888246