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超聲微泡介導pEGFP-N1轉(zhuǎn)染人牙齦成纖維細胞的初步研究

發(fā)布時間:2020-08-17 12:03
【摘要】: 目的:探討超聲破壞微泡介導pEGFP-N1轉(zhuǎn)染人牙齦成纖維細胞的適宜參數(shù)、轉(zhuǎn)染效率及有效性。 方法:體外原代培養(yǎng)HGF。以pEGFP-N1為報告基因,微泡造影劑為載體,用超聲微泡介導pEGFP-N1轉(zhuǎn)染HGF。實驗組分為質(zhì)粒組、微泡+質(zhì)粒組、超聲+質(zhì)粒組、超聲+微泡+質(zhì)粒組。超聲+微泡+質(zhì)粒組按不同的轉(zhuǎn)染條件分成24組。轉(zhuǎn)染48 h后倒置熒光顯微鏡下觀察GFP的表達,MTT法檢測HGF活性。 結(jié)果:超聲微泡介導pEGFP-N1對HGF的轉(zhuǎn)染效率明顯高于其他實驗組。優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件后,頻率300KHZ,聲強1.5w/cm2,連續(xù)波,輻照時間60s,微泡濃度10%,質(zhì)粒濃度6.67ug/ml時,轉(zhuǎn)染率較高。 結(jié)論:在一定條件下,超聲微泡能夠促進外源基因?qū)GF的轉(zhuǎn)染。
【學位授予單位】:重慶醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2009
【分類號】:R78
【圖文】:

微泡,波形絲蛋白,轉(zhuǎn)染,酶切鑒定


(圖 1)組織塊邊緣游出的細胞(100×)(FIG.1)Cells emigrating form edge of tissue(圖 2)原代培養(yǎng)的 HGF(×100)(FIG. 2) primary culture HGF(圖 3)原代培養(yǎng)的 HGF(×100)(FIG.3) primary culture HGF(圖 4)波形絲蛋白染色陽性(×200)(Fig.4) primary culture HGF cytochemicstaining is masc. (×200)

波形絲蛋白,微泡,轉(zhuǎn)染,酶切鑒定


(圖 3)原代培養(yǎng)的 HGF(×100)(FIG.3) primary culture HGF(圖 4)波形絲蛋白染色陽性(×200)(Fig.4) primary culture HGF cytochemicalstaining is masc. (×200)(圖 5)pEGFP-N1質(zhì)粒酶切鑒定(Fig.5)Identification of pEGFP-N1 plasmidwith enzyme digested(圖 6)超聲微泡介導的轉(zhuǎn)染(×200)(Fig.6)transfection withultrasound-mediated microbubble(×200)

細胞,波形絲蛋白


(圖 1)組織塊邊緣游出的細胞(100×)(FIG.1)Cells emigrating form edge of tissue(圖 2)原代培養(yǎng)的 HGF(×100)(FIG. 2) primary culture HGF(圖 3)原代培養(yǎng)的 HGF(×100)(FIG.3) primary culture HGF(圖 4)波形絲蛋白染色陽性(×200)(Fig.4) primary culture HGF cytochemicalstaining is masc. (×200)

【參考文獻】

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1 唐昊U

本文編號:2795297


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