【摘要】： 目的:探討超聲破壞微泡介導(dǎo)pEGFP-N1轉(zhuǎn)染人牙齦成纖維細胞的適宜參數(shù)、轉(zhuǎn)染效率及有效性。 方法:體外原代培養(yǎng)HGF。以pEGFP-N1為報告基因,微泡造影劑為載體,用超聲微泡介導(dǎo)pEGFP-N1轉(zhuǎn)染HGF。實驗組分為質(zhì)粒組、微泡+質(zhì)粒組、超聲+質(zhì)粒組、超聲+微泡+質(zhì)粒組。超聲+微泡+質(zhì)粒組按不同的轉(zhuǎn)染條件分成24組。轉(zhuǎn)染48 h后倒置熒光顯微鏡下觀察GFP的表達,MTT法檢測HGF活性。 結(jié)果:超聲微泡介導(dǎo)pEGFP-N1對HGF的轉(zhuǎn)染效率明顯高于其他實驗組。優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件后,頻率300KHZ,聲強1.5w/cm2,連續(xù)波,輻照時間60s,微泡濃度10%,質(zhì)粒濃度6.67ug/ml時,轉(zhuǎn)染率較高。 結(jié)論:在一定條件下,超聲微泡能夠促進外源基因?qū)GF的轉(zhuǎn)染。
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類號】：R78
【圖文】：

（圖 1）組織塊邊緣游出的細胞（100×）(FIG.1)Cells emigrating form edge of tissue（圖 2）原代培養(yǎng)的 HGF（×100）(FIG. 2) primary culture HGF（圖 3）原代培養(yǎng)的 HGF（×100）(FIG.3) primary culture HGF（圖 4）波形絲蛋白染色陽性（×200）(Fig.4) primary culture HGF cytochemicstaining is masc. （×200）

（圖 3）原代培養(yǎng)的 HGF（×100）(FIG.3) primary culture HGF（圖 4）波形絲蛋白染色陽性（×200）(Fig.4) primary culture HGF cytochemicalstaining is masc. （×200）（圖 5）pEGFP-N1質(zhì)粒酶切鑒定(Fig.5)Identification of pEGFP-N1 plasmidwith enzyme digested(圖 6)超聲微泡介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染（×200）(Fig.6)transfection withultrasound-mediated microbubble（×200）

（圖 1）組織塊邊緣游出的細胞（100×）(FIG.1)Cells emigrating form edge of tissue（圖 2）原代培養(yǎng)的 HGF（×100）(FIG. 2) primary culture HGF（圖 3）原代培養(yǎng)的 HGF（×100）(FIG.3) primary culture HGF（圖 4）波形絲蛋白染色陽性（×200）(Fig.4) primary culture HGF cytochemicalstaining is masc. （×200）

【參考文獻】

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1 唐昊U

本文編號：2795297