【摘要】：本文從細胞水平探討感染根管內(nèi)G~-厭氧菌內(nèi)毒素對人牙髓、牙周膜成纖維細胞、破骨細胞和成骨細胞的影響，為牙髓、尖周病的發(fā)病和防治提供實驗依據(jù)，進行下列各項研究。 1 內(nèi)毒素的提取和純化 采用4株國際標準株。牙髓類桿菌(Be)(ATCC 35406)產(chǎn)黑類桿菌(Bm)(ATCC 25845)中間類桿菌(Bi)(ATCC 25261)具核梭桿菌(Fn)(ATCC 25586)。厭氧條件下培養(yǎng)，收集菌后，依Galanos的PW加PCP法提取和純化內(nèi)毒素脂多糖。提取率分別為：Be 2.67％、Bm3.23％、Bi2.96％、Fn2.77％。經(jīng)分析：所提取內(nèi)毒素純度高，物理、化學性能穩(wěn)定，活性較高。 2 內(nèi)毒素對人牙髓、牙周病成纖維細胞的直接損傷作用 2．1 人牙髓、牙周膜成纖維細胞的培養(yǎng)和鑒定 采用組織塊培養(yǎng)法對40例人的正常年輕恒牙的牙周膜和牙髓組織進行體外培養(yǎng)。牙髓成纖維細胞培養(yǎng)成功率為17.5％，牙周膜成纖維細胞為50％。細胞作生長曲線和分裂指數(shù)觀察：5代后細胞生長旺盛；分裂正常，但牙髓細胞生長速率慢于牙周膜細胞。經(jīng)ABC法作細胞的抗波形絲蛋白和抗角蛋白抗體染色證明其來源于中胚層的成纖維細胞。細胞的超微結(jié)構(gòu)呈正常像。 2．2 內(nèi)毒素對人牙髓、牙周膜成纖維細胞的細胞毒性 4種內(nèi)毒素配制成50μg／ml、100μg／ml、250μg／ml、500μg／ml 4種濃度。分別作用于牙髓成纖維細胞、牙周膜成纖維細胞和L929成纖維細胞系，連續(xù)觀察7d。用MTT法作內(nèi)毒素的細胞毒性檢測。結(jié)果為：內(nèi)毒素的細胞毒作用具有明顯的濃度依賴性和時間依賴性。在50μg／ml濃度下，在5d前對細胞無細胞毒性，而在100μg／ml以上濃度，隨濃度的升高和時間的延長，具有明顯的細胞毒性作用。其IC_(50)
【學位授予單位】：第四軍醫(yī)大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：1992
【分類號】：R780.2
【圖文】：

第四軍醫(yī)大學圖2.1一8，第5代人牙髓培養(yǎng)細胞，抗波形絲蛋白抗體染色陽性10x3.3圖2.1一，9第5代少心于髓細胞抗角蛋白抗體，染色陰性20x30HE復染后，顯示著色細胞核

一8，第5代人牙髓培養(yǎng)細胞，抗波形絲蛋白抗體染色陽性10x3.3

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【引證文獻】

相關(guān)碩士學位論文 前3條

1 王靜;五倍子水提取物對人牙周膜細胞保護作用的實驗研究[D];中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學;2003年

2 王志良;五倍子水提取物對牙周炎癥抗炎機理的實驗研究[D];中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學;2003年

3 李會英;中藥黃芩苷對人牙周膜成纖維細胞保護作用的實驗研究[D];河北醫(yī)科大學;2005年

本文編號：2780388